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Cell apoptosis細胞凋亡；Mitochondrial membrane potential線粒體膜電(diàn)位；MitoTracker；MitoSOX；JC-1；JC-10；Rhodamine 123；CAS：555-60-2；

基本介紹：

線粒體（Mitochondrial）是一(yī)種存在于大多(duō)數真核細胞中的由兩層膜包被的細胞器(qì)，約占細胞體積10%。作為(wèi)一(yī)種多(duō)形細胞器(qì)，其結構因細胞類型、細胞周期狀态意思胞内代謝狀态而不斷變化。線粒體至關重要的功能(néng)是由氧化磷酸化（Oxphos）和脂質氧化介導的能(néng)量産生(shēng)。線粒體内還(hái)參與其他幾種代謝活動，包括尿素生(shēng)成，血紅(hóng)素和非血紅(hóng)素鐵和類固醇生(shēng)物(wù)起源，以及胞内鈣離子（Ca2+）穩态。線粒體還(hái)在凋亡中發揮重要作用。目前對線粒體參與生(shēng)理功能(néng)的了解隻有很少一(yī)部分，而對其作用機(jī)理和調控方式的了解就(jiù)更少。

線粒體（Mitochondrial）的分布依據細胞能(néng)量水(shuǐ)平而變化，是細胞類型、細胞周期狀态和增殖情況的一(yī)種功能(néng)表現。比如，褐色脂肪組織細胞，肝細胞和某些腎上(shàng)皮細胞富集存在于活躍線粒體中，而靜(jìng)息免疫系統祖細胞或前體細胞使用線粒體選擇性探針染色率很低(dī)。阿爾茨海默病線粒體數目減少，且其蛋白(bái)和核酸易被包括一(yī)氧化氮在内的活性氧（ROS）所攻擊造成損傷。

我司提供一(yī)系列線粒體選擇性熒光(guāng)探針和有機(jī)染料，能(néng)夠用來監測細胞形态和細胞器(qì)功能(néng)。大多(duō)數線粒體選擇性有機(jī)染料的攝取依賴于線粒體膜電(diàn)位。因此這些染料能(néng)讓研究者标記線粒體活動、定位、含量，以及觀察一(yī)些能(néng)改變線粒體功能(néng)的某些藥物(wù)的生(shēng)理效應。

線粒體探針：

一(yī)、MitoTracker Probes（可固定的線粒體選擇性探針）

1）傳統線粒體探針的缺點：

傳統線粒體探針如羅丹明123（Rhodamine 123）雖然可立即聚集在功能(néng)線粒體上(shàng)，然而，一(yī)旦線粒體膜電(diàn)位喪失，這些探針就(jiù)能(néng)很容易清洗掉離開(kāi)細胞。當碰到(dào)細胞需要進行醛類固定或細胞内含影響膜電(diàn)位藥物(wù)的實驗中，這些探針則受到(dào)限制，不可使用。

2）MitoTracker線粒體探針的優點

Mitotracker正克服傳統探針的缺點而被生(shēng)産，其能(néng)夠聚集在活線粒體上(shàng)，并且細胞固定中也能(néng)良好維持。其中，Mitotracker orange，red，and deep red這三種探針經透化（permeabilization）後仍能(néng)良好維持。在接下(xià)來免疫細胞化學（ICC）、原位雜(zá)交（ISH）或電(diàn)鏡實驗的處理步驟中樣本仍保留線粒體的活細胞染色形态。另外，Mitotracker探針去除病原細胞線粒體染色可能(néng)遇到(dào)的一(yī)些問題，因為(wèi)一(yī)旦線粒體染色後，細胞即可被固定然後進行結果分析。

3）MitoTracker線粒體探針産品

我們提供7種Mitotracker探針，它們在光(guāng)譜特性、氧化态以及可否固定幾個(gè)參數上(shàng)有所差異，具體見(jiàn)下(xià)表。

【注1】：MitoTracker® Green FM（#M7514）在水(shuǐ)溶液中無熒光(guāng)；

【注2】：MitoTracker® Orange CM-H2TMRos（#M7511），MitoTracker® Red CM-H2XRos（#M7513）為(wèi)還(hái)原态探針，無熒光(guāng)。隻有被氧化後才發熒光(guāng)。

4）MitoTracker線粒體探針訂購信息

以上(shàng)所有産品均為(wèi)Life（Invitrogen）原裝正品，原始包裝為(wèi)20x50 µg（20支50µg單個(gè)包裝構成）。我司對M7512，M7514，M22426進行拆開(kāi)銷售，特惠價為(wèi)400元/支，單支50µg。對M7513，M7510 單支特惠價為(wèi)450元。現貨銷售，歡迎訂購。

二、MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator（線粒體超氧化物(wù)探針）

1）背景介紹

線粒體超氧化物(wù)（Mitochondrial superoxide）是氧化磷酸化的副産物(wù)。一(yī)條緊密偶聯的電(diàn)子運傳遞鏈中約1-3%被消耗的線粒體氧不能(néng)完全被還(hái)原，這些‘遺漏’的電(diàn)子能(néng)與分子氧快速反應産生(shēng)超氧陰離子，即線粒體中含量最高(gāo)的活性氧（ROS）分子。細胞過氧化物(wù)生(shēng)成量的增加在心血管疾病中得到(dào)闡釋，這些疾病包括高(gāo)血壓、動脈粥樣硬化和糖尿病相(xiàng)關的血管損傷，以及神經退化疾病如帕金森疾病，阿爾茨海默病和肌萎縮性[脊髓]側索硬化（ALS）。

MitoSOX紅(hóng)色線粒體超氧化物(wù)熒光(guāng)探針（MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator）是二氫乙啶（dihydroethidum，DHE）的一(yī)種陽離子衍生(shēng)物(wù)，特别設計高(gāo)度特異性檢測活細胞線粒體超氧化物(wù)。

MitoSOX Red是一(yī)種特異性靶向活細胞線粒體的新型熒光(guāng)探針，具細胞膜滲透性，且能(néng)快速和選擇性結合線粒體。一(yī)旦進入線粒體，被超氧化物(wù)氧化，與核酸結合後産生(shēng)很強的紅(hóng)色熒光(guāng)。MitoSOX Red能(néng)夠立即被超氧化物(wù)，并不是其他ROS-或RNS（活性氮）生(shēng)成系統氧化。超氧化物(wù)歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）能(néng)夠預防MitoSOX Red被氧化。

MitoSOX Red可用于在對活細胞線粒體釋放(fàng)的超氧化物(wù)的直接檢測中區别純化線粒體的人為(wèi)誤差。另外，MitoSOX Red是一(yī)種有價值的工(gōng)具，用來篩選多(duō)種疾病中調節氧化應激的藥物(wù)。

• 容易為(wèi)超氧化物(wù)而不是其他的ROS、RNS生(shēng)成系統氧化

• 吸收波長(cháng)⁄發射波長(cháng)最大值：~510⁄580 nm

• 用于活細胞成像

以上(shàng)所有産品均為(wèi)Life（Invitrogen）原裝正品，原始包裝為(wèi)10x50 µg（10支50µg單個(gè)包裝構成）。我司對M36008進行拆開(kāi)銷售，特惠價為(wèi)750元/支，單支50µg，現貨銷售，歡迎訂購。

三、JC-1/JC-10線粒體膜電(diàn)位檢測探針（早期凋亡檢測）

1）背景介紹

線粒體膜通(tōng)透性的改變是細胞早期凋亡發生(shēng)的重要特征之一(yī)。

凋亡早期，線粒體膜通(tōng)透性增加，線粒體蛋白(bái)包括：細胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸内切酶G（EndoG）、凋亡誘導因子（AIF）等，從(cóng)線粒體基質釋放(fàng)到(dào)細胞漿。細胞色素C的釋放(fàng)伴随著(zhe)線粒體膜電(diàn)位的喪失，呼吸鏈障礙，鈣離子的釋放(fàng)。

線粒體膜電(diàn)位的破壞是誘導細胞凋亡後最早發生(shēng)的胞内事(shì)件(jiàn)，目前常用一(yī)些親脂性陽離子染料如JC-1，JC-10，羅丹明123（Rhodamine 123）等在線粒體膜電(diàn)位變化中聚合形式的差異來區分正常細胞和凋亡細胞。基本原理是：正常細胞中陽離子染料在線粒體中積累并聚合，聚合物(wù)發出強烈的紅(hóng)色熒光(guāng)；凋亡細胞中由于線粒體膜電(diàn)位的喪失，染料不能(néng)在線粒體中積累并以單體形式存在于胞漿中，單體發出綠色熒光(guāng)。

2）産品描述

JC-1是一(yī)種廣泛用于檢測線粒體膜電(diàn)△Ψm位的理想熒光(guāng)探針。JC-1染料以電(diàn)勢依賴性的方式積聚在線粒體内，可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電(diàn)位。正常線粒體内，JC-1聚集在線粒體基質中形成聚合物(wù)，聚合物(wù)發出強烈的紅(hóng)色熒光(guāng)（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電(diàn)位的下(xià)降或喪失，JC-1隻能(néng)以單體的形式存在于胞漿中，産生(shēng)綠色熒光(guāng)（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不僅可用于定性檢測，因顔色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電(diàn)位的變化。也可以用于定量檢測，因線粒體的去極化程度可以通(tōng)過紅(hóng)/綠熒光(guāng)強度的比例來衡量。

JC-10是JC-1的升級産品，優勢在其比JC-1具更好的水(shuǐ)溶性，特别适合替代需要更好染料濃度的實驗。JC-10的檢測原理同JC-1。

3）訂購信息

4）相(xiàng)關産品（凋亡誘導劑）

線粒體凋亡研究中常需要陽性誘導劑建立陽性的凋亡模型，從(cóng)而用于細胞凋亡機(jī)理或凋亡相(xiàng)關藥物(wù)的篩選。

CCCP，即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone，一(yī)種質子載體（H+ionophore），是一(yī)種強效的線粒體氧化磷酸化解偶聯劑，促使線粒體内膜對H+産生(shēng)通(tōng)透性，導緻線粒體内膜兩側的膜電(diàn)位喪失，誘導凋亡發生(shēng)。也可作用于葉綠體膜，抑制光(guāng)合作用；CCCP還(hái)可抑制内質網-高(gāo)爾基體（ER-Golgi）之間的蛋白(bái)轉運，高(gāo)親和力結合細胞色素C氧化酶。

FCCP，即Carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)phenylhydrazone，一(yī)種質子載體（H+ionophore），也是一(yī)種強效的線粒體氧化磷酸化解偶聯劑，促使質膜和線粒體膜去極化。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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