收藏本站    您好,歡迎光(guāng)臨上海夢澤生物科技有限公司!
登錄  |   注冊
當前位置: 首頁> 産品中心> 分子生(shēng)物(wù)學研究 > RNA提取 > DNase I Solution (RNase & Protease-free) 脫氧核糖核酸酶I溶液(無RNase&蛋白(bái)酶)
DNase I Solution (RNase & Protease-free) 脫氧核糖核酸酶I溶液(無RNase&蛋白(bái)酶)
目錄号 MF0405-200U 售價 198.00元
規格 200U 運輸溫度 冰袋運輸
其他名稱 脫氧核糖核酸酶I溶液(無RNase&蛋白(bái)酶) 保存溫度 -20℃保存
CAS号 9003-98-9 有效期 1年(nián)
應用 RNA樣本内殘留的DNA去除 訂購數量
産品簡介:

DNase I Solution (RNase & Protease-free)

脫氧核糖核酸酶I溶液(無RNase&蛋白(bái)酶)


關鍵詞:

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水(shuǐ)解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9


訂購信息【現貨供應】

産品名稱

産品編号

規格            

儲存          

價格(元)           

DNase I Solution (RNase & Protease-free)       

脫氧核糖核酸酶I溶液(無RNase &蛋白(bái)酶)

MF0405-200U         

200U

-20ºC

198

MF0405-1000U

1000U

-20ºC

848

【溫馨提示】:蛋白(bái)樣品制備中核酸酶的降解推薦使用全能(néng)型的全能(néng)核酸酶Benzonase Nuclease,點擊此處了解全能(néng)核酸酶的亮點在哪?


産品描述

脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,在大多(duō)數細胞和組織中都能(néng)發現的一(yī)種核酸内切酶,偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,産生(shēng)5’端為(wèi)磷酸基團、3’端為(wèi)羟基的多(duō)聚核苷酸,平均消化産物(wù)最小(xiǎo)為(wèi)多(duō)聚四核苷酸。Mg2+存在條件(jiàn)下(xià),DNase I可随機(jī)識别和切斷DNA任一(yī)條鏈上(shàng)的任意位點;而在Mn2+存在條件(jiàn)下(xià),DNase I識别DNA的兩條鏈并在幾乎相(xiàng)同的位點進行切割。DNase I可水(shuǐ)解多(duō)種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(其切割速率受組蛋白(bái)影響)。


脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,最早從(cóng)胰腺中分離而來,至今哺乳動物(wù)胰腺也是最主要的來源之一(yī)。DNase I以兩對二硫鍵結合的多(duō)種糖蛋白(bái)混合形式存在。最佳的工(gōng)作範圍是pH 7-8,DNase的活性依賴于Ca2+,并可被二價金屬離子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護酶使其不被水(shuǐ)解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來的1/2。


本品是即用型溶液形式的DNase I,不含RNase和蛋白(bái)酶,适用于各種RNA處理。另外還(hái)提供實驗所需的反應緩沖液和終止液,節省時間且用起來更方便。


産品應用

◇   制備不含DNA的RNA樣本;

◇   RT-PCR反應前RNA樣本内基因組DNA等可能(néng)存在DNA污染的去除;

◇   T7,T3,SP6等RNA聚合酶催化的體外RNA轉錄後DNA模闆的去除;

◇   DNase I足迹法(DNase I footprinting)研究DNA-蛋白(bái)質相(xiàng)互作用;

◇   缺口平移法标記探針用;

◇   制備随機(jī)DNA片段文庫;

◇   TUNEL細胞凋亡檢測中用于剪切DNA制備陽性對照(zhào);


産品包裝

組分編号          

組分名稱

貨号(規格)

MF0405-200U      

MF0405-1000U    

MF0405-A

DNase I Solution (RNase & Protease-free)      

200U

1000U

MF0405-B

10×Reaction Buffer

200μl

1ml

MF0405-C

10×Stop Solution

200μl

1ml


保存與運輸方法

保存:-20℃凍存,1年(nián)穩定。

運輸:冰袋運輸。


注意事(shì)項

1)   本DNase I的儲存緩沖液為(wèi)50mM Tris-acetate(pH 7.5),10mM CaCl2,50%(v/v) glycerol。如需對其進行稀釋,則使用本儲存緩沖液進行稀釋。

2)   酶的使用過程中需放(fàng)在冰盒或冰浴内,使用結束立即放(fàng)回-20℃保存。

3)  為(wèi)了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。


使用方法

一(yī)、RT-PCR反應前RNA樣本内DNA污染的去除

1.1    DNA模闆經核酸内切酶線性化,用酚/氯仿和氯仿/異丙醇提取DNA,用乙醇沉澱後,溶于适量無菌去離子水(shuǐ)中。

1.2    往一(yī)個(gè)RNase-free EP管内依次加入下(xià)列試劑:

RNA樣本

1μg                

10×Reaction Buffer

1μl

用DEPC-treated Water補充   

至9μl

DNase I (1U/μl)

1μl

【注意】:如果需要處理較大量的RNA樣品,可按比例放(fàng)大上(shàng)述反應體系。條件(jiàn)許可下(xià)最好往體系内加入适量RNase抑制劑(貨号:MF0218-2KU)以防止RNA降解。

1.3    37℃孵育30min。

1.4    往上(shàng)述體系内加入1μl 10× Stop Solution使其終濃度為(wèi)1×,混勻。之後65℃孵育10min使DNase I失活。【注意】:一(yī)定要先加入10× Stop Solution,然後再加熱失活RNase I,否則先加熱可能(néng)引起RNA被降解。

1.5    加熱處理後的RNA樣品即可直接用作RT-PCR反應用的模闆。


二、體外RNA反轉錄後模闆DNA的去除

2.1 每個(gè)含有0.5μg模闆DNA的反轉錄體系中加入1U DNase I,某些情況下(xià)模闆DNA完全消化所需的DNase I需通(tōng)過實驗來摸索。

2.2 37℃孵育15min。

2.3 酚/氯仿抽提失活DNase I。


三、其他用途請參考上(shàng)述方法或參考文獻等進行。


相(xiàng)關産品

貨号

名稱

規格          

MF0402-10MG      

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein      

10MG

MF0401-15KU

Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥2,000 units/mg protein

15KU

MF0405-200U

DNase I Solution (RNase & Protease-free) 脫氧核糖核酸酶I溶液

200U

MF0203-100MG

Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas

100mg

MP1509-25KU

Benzonase Nuclease 全能(néng)核酸酶

25KU

MF0201-100MG

Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白(bái)酶K

100mg

MF0218-2KU

RNase Inhibitor (40U/µl), Murine小(xiǎo)鼠RNA酶抑制劑

2KU

MF0404-500ML

DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(shuǐ)(無DNase、RNase ) 

500ml

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作,主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本,以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。

 



電(diàn)話:021-54736159    傳真:021-54736159    手機(jī):18121428569
郵箱: sales@maokangbio.com
地址:上(shàng)海市(shì)徐彙區龍吳路(lù)2888弄23号902室    
版權所有:上海夢澤生物科技有限公司
滬ICP備16016464号-1