目錄号 | MF0405-200U | 售價 | 198.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
規格 | 200U | 運輸溫度 | 冰袋運輸 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名稱 | 脫氧核糖核酸酶I溶液(無RNase&蛋白(bái)酶) | 保存溫度 | -20℃保存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | 9003-98-9 | 有效期 | 1年(nián) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
應用 | RNA樣本内殘留的DNA去除 | 訂購數量 |
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産品簡介: DNase I Solution (RNase & Protease-free) 脫氧核糖核酸酶I溶液(無RNase&蛋白(bái)酶)
關鍵詞: Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase,5′-寡核苷酸-水(shuǐ)解酶,Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas,EC No: 3.1.21.1,CAS NO:9003-98-9
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【溫馨提示】:蛋白(bái)樣品制備中核酸酶的降解推薦使用全能(néng)型的全能(néng)核酸酶Benzonase Nuclease,點擊此處了解全能(néng)核酸酶的亮點在哪? 産品描述 脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,在大多(duō)數細胞和組織中都能(néng)發現的一(yī)種核酸内切酶,偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,産生(shēng)5’端為(wèi)磷酸基團、3’端為(wèi)羟基的多(duō)聚核苷酸,平均消化産物(wù)最小(xiǎo)為(wèi)多(duō)聚四核苷酸。Mg2+存在條件(jiàn)下(xià),DNase I可随機(jī)識别和切斷DNA任一(yī)條鏈上(shàng)的任意位點;而在Mn2+存在條件(jiàn)下(xià),DNase I識别DNA的兩條鏈并在幾乎相(xiàng)同的位點進行切割。DNase I可水(shuǐ)解多(duō)種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(其切割速率受組蛋白(bái)影響)。
脫氧核糖核酸酶I,英文Deoxyribonuclease I,縮寫DNase I,最早從(cóng)胰腺中分離而來,至今哺乳動物(wù)胰腺也是最主要的來源之一(yī)。DNase I以兩對二硫鍵結合的多(duō)種糖蛋白(bái)混合形式存在。最佳的工(gōng)作範圍是pH 7-8,DNase的活性依賴于Ca2+,并可被二價金屬離子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護酶使其不被水(shuǐ)解,而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來的1/2。
本品是即用型溶液形式的DNase I,不含RNase和蛋白(bái)酶,适用于各種RNA處理。另外還(hái)提供實驗所需的反應緩沖液和終止液,節省時間且用起來更方便。
産品應用 ◇ 制備不含DNA的RNA樣本; ◇ RT-PCR反應前RNA樣本内基因組DNA等可能(néng)存在DNA污染的去除; ◇ T7,T3,SP6等RNA聚合酶催化的體外RNA轉錄後DNA模闆的去除; ◇ DNase I足迹法(DNase I footprinting)研究DNA-蛋白(bái)質相(xiàng)互作用; ◇ 缺口平移法标記探針用; ◇ 制備随機(jī)DNA片段文庫; ◇ TUNEL細胞凋亡檢測中用于剪切DNA制備陽性對照(zhào);
産品包裝
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RNA樣本 |
1μg |
10×Reaction Buffer |
1μl |
用DEPC-treated Water補充 |
至9μl |
DNase I (1U/μl) |
1μl |
【注意】:如果需要處理較大量的RNA樣品,可按比例放(fàng)大上(shàng)述反應體系。條件(jiàn)許可下(xià)最好往體系内加入适量RNase抑制劑(貨号:MF0218-2KU)以防止RNA降解。
1.3 37℃孵育30min。
1.4 往上(shàng)述體系内加入1μl 10× Stop Solution使其終濃度為(wèi)1×,混勻。之後65℃孵育10min使DNase I失活。【注意】:一(yī)定要先加入10× Stop Solution,然後再加熱失活RNase I,否則先加熱可能(néng)引起RNA被降解。
1.5 加熱處理後的RNA樣品即可直接用作RT-PCR反應用的模闆。
二、體外RNA反轉錄後模闆DNA的去除
2.1 每個(gè)含有0.5μg模闆DNA的反轉錄體系中加入1U DNase I,某些情況下(xià)模闆DNA完全消化所需的DNase I需通(tōng)過實驗來摸索。
2.2 37℃孵育15min。
2.3 酚/氯仿抽提失活DNase I。
三、其他用途請參考上(shàng)述方法或參考文獻等進行。
相(xiàng)關産品
貨号 |
名稱 |
規格 |
Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥500 units/mg protein |
10MG |
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Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas, ≥2,000 units/mg protein |
15KU |
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MF0405-200U |
DNase I Solution (RNase & Protease-free) 脫氧核糖核酸酶I溶液 |
200U |
MF0203-100MG |
Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas |
100mg |
25KU |
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MF0201-100MG |
Proteinase K, Molecular Biology Grade蛋白(bái)酶K |
100mg |
MF0218-2KU |
RNase Inhibitor (40U/µl), Murine小(xiǎo)鼠RNA酶抑制劑 |
2KU |
MF0404-500ML |
DEPC-treated Water (DNase、RNase free) DEPC水(shuǐ)(無DNase、RNase ) |
500ml |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作,主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本,以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。