Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas

脫氧核糖核酸酶I，來源于牛胰腺

關鍵詞：

Deoxyribonucleate 5 –Oligonucleotidohydrolase，5′-寡核苷酸-水(shuǐ)解酶，Deoxyribonuclease I (DNase I) from Bovine Pancreas，EC No: 3.1.21.1，CAS NO：9003-98-9

産品描述

脫氧核糖核酸酶I，英文Deoxyribonuclease I，縮寫DNase I，在大多(duō)數細胞和組織中都能(néng)發現的一(yī)種核酸内切酶，偏好切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵，産生(shēng)5’端為(wèi)磷酸基團、3’端為(wèi)羟基的多(duō)聚核苷酸，平均消化産物(wù)最小(xiǎo)為(wèi)多(duō)聚四核苷酸。Mg2+存在條件(jiàn)下(xià)，DNase I可随機(jī)識别和切斷DNA任一(yī)條鏈上(shàng)的任意位點；而在Mn2+存在條件(jiàn)下(xià)，DNase I識别DNA的兩條鏈并在幾乎相(xiàng)同的位點進行切割。DNase I可水(shuǐ)解多(duō)種形式DNA，如單鏈DNA、雙鏈DNA，甚至染色質（其切割速率受組蛋白(bái)影響）。

脫氧核糖核酸酶I，英文Deoxyribonuclease I，縮寫DNase I，最早從(cóng)胰腺中分離而來，至今哺乳動物(wù)胰腺也是最主要的來源之一(yī)。DNase I以兩對二硫鍵結合的多(duō)種糖蛋白(bái)混合形式存在。最佳的工(gōng)作範圍是pH 7-8，DNase的活性依賴于Ca2+，并可被二價金屬離子如Co2+，Mn2+，Zn2+等激活。5mM Ca2+可保護酶使其不被水(shuǐ)解，而0.1mM Ca2+可使酶失活速率降至原來的1/2。

本品來自(zì)牛胰腺，色譜純化制備，常用于去除蛋白(bái)或RNA樣品中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使标記堿基插入DNA。本品以含氯化鈣的凍幹粉形式供應，比活≥2000Kunit Units/mg蛋白(bái)。

産品特性

1）CAS NO：9003-98-9

2）蛋白(bái)純度：≥80%（biuret），色譜純化

3）比活力：≥2000Kunit Units/mg protein

4）活力定義：25℃，pH5.0條件(jiàn)下(xià)DNase催化底物(wù)DNA，使每毫升每分鍾ΔA260增加0.001的變化定義為(wèi)一(yī)個(gè)酶活力單位（Kunitz unit）。

5）激活劑：多(duō)種二價金屬離子如Mg2+、Mn2+、Ca2+、Co2+、and Zn2+

6）抑制劑：β-巯基乙醇；螯合劑；SDS；肌動蛋白(bái)；并沒有特異性抑制DNase I酶活的通(tōng)用抑制劑，比如檸檬酸鹽抑制Mg2+活化的DNase I，但不能(néng)影響Mn2+激活的DNase I。

7）溶解性：溶于0.15M NaCl（5mg/ml），無色透明溶液

保存與運輸方法

保存：凍幹粉-20℃幹燥凍存，至少3年(nián)穩定。

運輸：冰袋運輸。

常見(jiàn)問題

1、如何溶解DNase I粉末？

将本品溶解于0.15 M NaCl溶液，可配置成5-10 mg/ml的儲存液，-20℃分裝凍存。需要注意：本品儲存液即使-20℃分裝凍存，一(yī)周可能(néng)會(huì)有＜10%活力損失；置于2-8℃，約會(huì)有20%活力損失。

2、如何将本品活力換算(suàn)成質量？

根據本品各批次的比活力和蛋白(bái)含量，比如當酶比活力為(wèi)2000 Kunits/mg，蛋白(bái)含量為(wèi)100%（biuret）也，那麽15KU=15000Kunits/2000Kunits/mg/100%=7.5mg本品。

3、使用多(duō)大濃度DNase I用來去除溶液内的DNA？

在含50mM Tris-HCl（pH7.5），10mM MgCl2的溶液體系内，加入20-50μg DNase I，并于37℃孵育60min以去除DNA污染。本用量僅作參考，具體實驗請做适當調整。

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相(xiàng)關産品：

注意事(shì)項

為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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