Bleomycins (BLMs) 博萊黴素家族常用抗生(shēng)素成員(yuán)的應用選擇

◇◇ Bleomycin Sulfate 硫酸博萊黴素；Bleomycin A5 Hydrochloride 鹽酸平陽黴素；

◇◇ Zeocin 博萊黴素；Phleomycin 腐草(cǎo)黴素；

基本概念：

博萊黴素（博來黴素）（Bleomycins, BLMs），由輪枝鏈黴菌（Streptomyces verticillus）代謝産生(shēng)的一(yī)種抗腫瘤糖肽抗生(shēng)素，是臨床上(shàng)相(xiàng)關的天然産物(wù)，用于化療治療淋巴瘤、鱗狀細胞癌和睾丸癌。BLMs通(tōng)過一(yī)種金屬依賴的機(jī)制引起序列特異性的氧化切割dsDNA。BLMs含4個(gè)功能(néng)結構域：i）包含嘧啶博萊酸（pyrimidoblamic acid）和β-羟基組氨酸的金屬結合域；ii）由二噻唑部分和與嘧啶胺環相(xiàng)互作用的C端胺基尾部構成的DNA結合域；iii）連接金屬和DNA結合域的一(yī)連接區域；以及iv）負責細胞選擇性和DNA斷裂活性的二糖部分[1]。【文獻1：Coughlin JM et al. BlmB and TlmB provide resistance to the bleomycin family of antitumor antibiotics by N-acetylating metal-free bleomycin, tallysomycin, phleomycin, and zorbamycin. Biochemistry. 2014 Nov 11;53(44):6901-9.】

一(yī)、硫酸博萊黴素（Bleomycin Sulfate）與鹽酸平陽黴素（Bleomycin A5 Hydrochloride）

□ 用途：抗腫瘤藥物(wù)（Anticancer agent）

平陽黴素和博萊黴素通(tōng)常與其他抗腫瘤劑聯合使用在臨床上(shàng)用來治療睾丸癌、卵巢癌、子宮頸癌、頭頸癌、食道癌、甲狀腺癌和淋巴瘤。

1.1 兩種抗生(shēng)素的結構特征

平陽黴素（Pingyangmycin），也稱為(wèi)博萊黴素A5（Bleomycin A5），是博萊黴素家族成員(yuán)之一(yī)。于1969年(nián)發現于中國(guó)浙江平陽縣，之後于1978年(nián)國(guó)家食品藥品監督管理（SFDA）授權用于臨床用途。

博萊黴素（Bleomycin, BLM）于1962年(nián)發現，于1969年(nián)在日本授權為(wèi)抗腫瘤藥物(wù)，也在1973年(nián)獲US FDA許可用于臨床藥。BLM是兩種主要成分構成的混合物(wù)，博萊黴素A2（55-70%）和B2（25-32%）。

博萊黴素A2、B2和A5結構見(jiàn)圖1，三個(gè)化合物(wù)具有相(xiàng)同的化學骨架，但不同的帶正電(diàn)荷R基團。幾種轉運體負責攝取帶正電(diàn)荷的BLMs。一(yī)旦進入細胞，BLMs的抗腫瘤活性取決于它們産生(shēng)RNA和DNA斷裂的能(néng)力，引起細胞死亡。

圖1. 博萊黴素A2、B2和A5的化學結構圖。

1.2 兩種抗生(shēng)素（三個(gè)化合物(wù)）的藥理特征

He Y et al.[2]對6種不同的細胞系，包括一(yī)種獨特的CHO突變細胞（GAG生(shēng)物(wù)合成缺陷）比較博萊黴素A2、B2和A5的細胞毒性和分子機(jī)制，細胞毒性數據表明GAGs可能(néng)是BLMs的細胞攝取受體。而BLM和A5作用下(xià)EGFR表達和磷酸化的下(xià)調說明，不同的BLMs具有相(xiàng)同的分子機(jī)制來誘導細胞毒性（基于細胞周期數據、參與細胞周期、凋亡和其他過程重要蛋白(bái)的免疫印迹分析）。（文獻2：He Y et al. Pingyangmycin and Bleomycin Share the Same Cytotoxicity Pathway. Molecules. 2016 Jun 30;21(7).）from maokangbio)

在中國(guó)，博萊黴素A5更多(duō)替代BLM用作一(yī)種抗腫瘤藥，因組分單一(yī)且價格更便宜，更重要的是A5是有效的，雖然在腫瘤細胞上(shàng)并未比BLM更優秀。的确，本文中A5的細胞毒性和IC50數據也表明其在所有腫瘤和CHOK1細胞系（除CHO745）毒性更強（見(jiàn)圖2）。有意思的是，A2和B2在CHO745中的毒性明顯強于A5。進一(yī)步說明GAGs可能(néng)是哺乳動物(wù)細胞内負責BLM攝取的受體。

圖2. Growth inhibitory effect of BLMs on A549, H1299, HCT116, HT29, CHO745 and CHOK1 cell lines. Two human lung cancer cell lines A549 and H1299, two human colon cancer cell lines HCT116 and HT29, and two Chinese hamster ovary cell lines (CHO745 and CHOK1) were used to measure the percentage of viable cells after 48 h exposure to 0–160 μM BLM (A2B2), A2, B2, A5, A2A5 and B2A5. The experiment was repeated three times with similar results. The untreated cells (control) were assigned values of 100 and the results were presented as mean ± S.D. (n = 3). Different letters (a, b, or c) in each concentration group mean significant differences (ANOVA with Tukey test for multiple comparisons, p < 0.05).

二、博萊黴素（Zeocin）和腐草(cǎo)黴素（Phleomycin）

□ 用途：篩選抗生(shēng)素（selection antibiotic）

2.1 兩種抗生(shēng)素的基本介紹

腐草(cǎo)黴素（Phleomycin）是一(yī)種糖肽類抗生(shēng)素，結構上(shàng)類似于抗生(shēng)素Bleomycin (BLM)。純化的腐草(cǎo)黴素主要由腐草(cǎo)黴素D1（Phleomycin D1）（末端胺基是胍丁胺）以銅離子螯合和鹽酸鹽形式提供。腐草(cǎo)黴素阻斷細胞周期進入S期，雖然腐草(cǎo)黴素類似于Bleomycin，能(néng)破壞DNA，但不用作一(yī)種抗腫瘤劑。目前腐草(cǎo)黴素的作用機(jī)理并未完全得以闡明，據報(bào)道由于修飾的二噻唑部分，其不能(néng)插入DNA。RAD6 DNA修複基因在突變酵母内對腐草(cǎo)黴素抗性是必須的。分子遺傳實驗中腐草(cǎo)黴素用作一(yī)種選擇性抗生(shēng)素，其具廣譜的毒性，對細菌、真核微生(shēng)物(wù)和植物(wù)和動物(wù)細胞呈體内活性。腐草(cǎo)黴素因此能(néng)用于鑒定和篩選含腐草(cǎo)黴素抗性基因比如Sh ble基因的各種細胞。

Zeocin™是博萊黴素/腐草(cǎo)黴素（bleomycin/phleomycin）抗生(shēng)素家族的成員(yuán)之一(yī)，從(cóng)輪枝鏈黴菌Streptomyces verticillus中分離得到(dào)，對細菌、真菌（包括酵母菌）、植物(wù)和哺乳動物(wù)細胞具很強的毒性。Zeocin™是腐草(cǎo)黴素D1的商業(yè)名稱，一(yī)種堿性、水(shuǐ)溶性、銅離子螯合的糖肽抗生(shēng)素。銅離子的存在使得溶液為(wèi)藍色，此銅螯合的形式為(wèi)無活性。一(yī)旦進入細胞後，二價銅離子（Cu2+）被還(hái)原為(wèi)一(yī)價銅離子（Cu+），并被細胞内的巯基化合物(wù)去除。銅離子被去除後，Zeocin™被活化，嵌入DNA使其斷裂，最終導緻細胞死亡。

2.2 兩種抗生(shēng)素的應用差異

腐草(cǎo)黴素（Phleomycin）和Zeocin™都屬于博萊黴素/腐草(cǎo)黴素（bleomycin/phleomycin）抗生(shēng)素家族的成員(yuán)，後者是對Phleomycin D1的商業(yè)名稱。這兩種抗生(shēng)素都用作篩選抗生(shēng)素，分子遺傳學中用來攜帶腐草(cǎo)黴素抗性基因比如Sh ble基因的轉染細胞。

腐草(cǎo)黴素（Phleomycin）與Zeocin™有效成分基本差不多(duō)，但有所差異，腐草(cǎo)黴素（Phleomycin）建議用于對Zeocin™敏感性比較差的細胞，比如：絲狀真菌和某些酵母菌。

三、四種化合物(wù)的産品信息【我司懋康生(shēng)物(wù)maokangbio提供以上(shàng)四種産品的博萊黴素家族化合物(wù)，現貨供應，歡迎訂購或來電(diàn)資料，021-54736159】

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