▶▶ 載體：A23187 / 4-bromo-A23187 /Ionomycin

▶▶ 探針：Fluo-3, AM/Fluo-4, AM/Rhod-2, AM/Rhod-4, AM（可見(jiàn)光(guāng)激發）

▶▶ 探針：Fura-2, AM/Indo-1, AM（紫外光(guāng)UV激發）

▶▶ 螯合劑：EGTA（金屬螯合劑）

搜索關鍵詞：Calcium Ionophore 鈣離子Ca2+載體；Calcium Indicators 鈣離子指示劑；Visible light-excitable 可見(jiàn)光(guāng)激發；UV-excitable紫外光(guāng)激發；Ionomycin離 子黴素；Fluo-3, AM CAS: 121714-22-5；Fura-2, AM CAS:108964-32-5;

背景描述：

鈣（Calcium）是一(yī)種重要的且普遍存在的第二信使，參與調控各種各樣的細胞過程，包括細胞增殖，基因轉錄，肌肉收縮和胞吞作用。響應于大量的刺激物(wù)，鈣離子（Ca2+）從(cóng)胞内的儲存池釋放(fàng)出來；而胞内Ca2+濃度的增加會(huì)引起細胞功能(néng)的活化、調節和終止。許多(duō)泵和離子通(tōng)道都允許這種獨特的陽離子進入和離開(kāi)細胞，并且在細胞質和胞内蓄池間移動。

我司（懋康生(shēng)物(wù)，MKbio）提供各種優質的指示劑/探針來檢測Ca2+釋放(fàng)；Ca2+螯合劑和離子探針用做對照(zhào)，以檢測鈣離子信号通(tōng)路(lù)調控的酶活性。

▶ A1. 鈣離子載體（Ca²⁺ ionophores）基本介紹

1. A23187（CAS NO：52665-69-7），由于能(néng)夠非常明顯的提高(gāo)二價陽離子穿透生(shēng)物(wù)膜，呈現出離子載體（ionophore）特性。A23187對Ca2+具有高(gāo)度的選擇性，因此常用來增加完整細胞的胞内Ca2+水(shuǐ)平，進而研究胞内Ca2+介導的生(shēng)理事(shì)件(jiàn)。含内源性的UV激發的自(zì)熒光(guāng)，不能(néng)與UV激發的Ca2+指示劑聯合使用，比如：Fura-2。但仍可與長(cháng)波長(cháng)激發的鈣離子指示劑，如Fluo-2聯合使用。 

2. 4-Br- A23187（CAS NO：76455-82-8），高(gāo)度選擇性的Ca2+載體，能(néng)夠提高(gāo)胞内Ca2+水(shuǐ)平。通(tōng)常用做熒光(guāng)探針确定胞内Ca2+水(shuǐ)平的校準标準品（calibration standard），用來平衡胞内外的Ca2+水(shuǐ)平，以及運載Mn2+進入細胞以淬滅胞内探針的熒光(guāng)。作為(wèi)抗生(shēng)素A23187的鹵化衍生(shēng)物(wù)，基本沒有内源熒光(guāng)，可與UV激發的Ca2+指示劑如Fura-2，Indo-1，Quin-2，以及可見(jiàn)光(guāng)激發的指示劑如Fluo-4，Fluo-3，Rhod-2聯合使用。還(hái)能(néng)用來平衡胞内外Mg2+濃度，适合校準Mg2+指示劑。 

3. 離子黴素（Ionomycin，CAS：56092-81-0），一(yī)種有效的Ca2+載體，通(tōng)常用來校準熒光(guāng)Ca2+指示劑以及修飾胞内Ca2+濃度，以及用在對細胞過程中Ca2+的調控特性的研究中；

▶ A2. 鈣離子載體訂購信息：更大包裝或産品技(jì)術(shù)問題，請來電(diàn)/在線咨詢，電(diàn)話：021-54736159 楊先生(shēng)。

▶ B1. 可見(jiàn)光(guāng)激發鈣離子指示劑（Visible-lightexcitable Ca²⁺ indicators）的優勢

與紫外光(guāng)激發的熒光(guāng)探針相(xiàng)比，如Fura-2和Indo-1，可見(jiàn)光(guāng)激發Ca2+探針具有以下(xià)特點：

1）适用于大多(duō)數的激光(guāng)共聚焦鈣離子濃度檢測系統，包括共聚焦激發掃描顯微鏡以及流式細胞儀等。

2）具有更強的染料吸收性能(néng)，使得更低(dī)濃度的探針即可成功檢測Ca2+變化，從(cóng)而降低(dī)了對活細胞的光(guāng)毒性。

3）Ca2+依賴性熒光(guāng)強度增強，對Ca2+變化水(shuǐ)平檢測敏感度更高(gāo)。

4）降低(dī)樣品自(zì)熒光(guāng)以及光(guāng)散射的幹擾。

5）兼容光(guāng)激活探針以及UV-激發試劑，因此更方便于多(duō)參數檢測。

6）無光(guāng)譜偏移。

▶ B2. 常見(jiàn)的幾種可見(jiàn)光(guāng)激發鈣離子指示劑基本介紹

1. Fluo-3, AM（CAS NO：121714-22-5），常用的可見(jiàn)光(guāng)激發波長(cháng)Ca2+熒光(guāng)探針，具有較高(gāo)的Ca2+捕獲能(néng)力，通(tōng)過熒光(guāng)強度的變化直接反映Ca2+信号的動力學變化。當Fluo-3以遊離配體形式存在時幾乎是非熒光(guāng)性的，但一(yī)旦與Ca2+結合即可産生(shēng)很強的熒光(guāng)，熒光(guāng)信号增強60~80倍，此時的最大激發波長(cháng)為(wèi)506nm，最大發射波長(cháng)為(wèi)526nm。可通(tōng)過激光(guāng)共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、熒光(guāng)酶标儀等來檢測胞内鈣離子水(shuǐ)平的變化。 

2. Fluo-4, AM（CAS NO：273221-67-3），Fluo-3的改良版本，通(tōng)過将Fluo-3結構上(shàng)的氯離子（Cl-）替換為(wèi)電(diàn)子吸引力更強的氟離子（F-），使得最大激發波長(cháng)往短波長(cháng)偏移10nm左右。正由于這個(gè)波長(cháng)更接近氩激光(guāng)器(qì)的波長(cháng)，則當使用氩激光(guāng)器(qì)來激發探針Fluo-4，能(néng)夠得到(dào)更強的熒光(guāng)強度，比Fluo-3強一(yī)倍。另外，Fluo-4的Ca2+親和力幾乎接近Fluo-3（Fluo-3: Kd=0.4μM、Fluo-4: Kd=0.36μM），因此，使用上(shàng)幾乎同Fluo-3。Ca2+結合後的最大激發波長(cháng)為(wèi)494nm，最大發射波長(cháng)為(wèi)516nm。 

3. Fluo-8, AM，目前最亮的可見(jiàn)光(guāng)激發波長(cháng)Ca2+熒光(guāng)探針，其熒光(guāng)強度比Fluo-4強兩倍，比Fluo-3強四倍。 

4. Rhod-2, AM（CAS NO：129787-64-0），一(yī)種高(gāo)親和力的可見(jiàn)光(guāng)激發波長(cháng)Ca2+熒光(guāng)探針。類似于Fluo-3或Fluo-4，其激發和發射光(guāng)譜不會(huì)随著(zhe)Ca2+濃度變化發生(shēng)明顯的遷移，熒光(guāng)信号一(yī)旦與Ca2+結合後明顯增強。不同于Fluo-3或Fluo-4，Rhod-2的波長(cháng)更長(cháng)（Ex/Em=549/578 nm，Ca2+結合），這一(yī)特性使其更适合具高(gāo)水(shuǐ)平自(zì)熒光(guāng)信号細胞或組織的Ca2+水(shuǐ)平檢測，還(hái)可用來檢測由光(guāng)感受器(qì)和籠鎖Ca2+螯合劑光(guāng)激活導緻的Ca2+釋放(fàng)。

▶ B3. 可見(jiàn)光(guāng)激發鈣離子訂購信息: 更大包裝或産品技(jì)術(shù)問題，請來電(diàn)/在線咨詢，電(diàn)話：021-54736159 楊先生(shēng)。

▶ C1. 紫外光(guāng)激發鈣離子指示劑（UV-excitable C a²⁺ indicators）基本介紹

1. Fura-2, AM（CAS NO：108964-32-5），一(yī)種常用的紫外光(guāng)激發和比率測定型Ca2+熒光(guāng)探針。一(yī)旦與Ca2+結合後，Fura-2的最大激發波長(cháng)發生(shēng)藍色遷移，由原來的363nm（Ca2+-free）遷移到(dào)335nm（Ca2+-saturated），而最大發射波長(cháng)基本未變化，保持在510nm左右。通(tōng)常情況，分别用最大激發波長(cháng)340nm和380nm來激發Fura-2，且用340/380nm激發下(xià)的熒光(guāng)比值來檢測細胞内Ca2+濃度。使用比值檢測，可消除不同細胞樣品間熒光(guāng)探針裝載效率的差異，探針的滲漏，細胞厚度差異等因素導緻的檢測誤差。 

2. Indo-1, AM（CAS NO：112926-02-0），一(yī)種常用的紫外光(guāng)激發和比率測定型Ca2+熒光(guāng)探針。一(yī)旦與Ca2+結合後，Indo-1的最大發射波長(cháng)向短波長(cháng)遷移，由原來的475nm（Ca2+-free）遷移到(dào)401nm（Ca2+-saturated），而最大激發波長(cháng)無明顯變化，維持在346nm~ 330nm範圍内，适宜用氩離子激發器(qì)的UV激發光(guāng)譜（351~364nm）進行熒光(guāng)激活。因此，不同于Fura-2，Indo-1是發射波長(cháng)率圖Ca2+熒光(guāng)探針，特别适合流式細胞儀檢測，因其可在控制單一(yī)激發波長(cháng)的條件(jiàn)下(xià)輕易調整發射濾片，也特别适合多(duō)色熒光(guāng)檢測。使用發射波長(cháng)下(xià)熒光(guāng)強度的比率來測定細胞内Ca2+濃度，可消除不同細胞樣品間熒光(guāng)探針裝載效率的差異，探針的滲漏，細胞厚度差異等因素導緻的檢測誤差。實際檢測，推薦使用最大發射波長(cháng)分别用405nm和485nm。

▶ C2. 紫外光(guāng)激發鈣離子指示劑訂購信息: 更大包裝或産品技(jì)術(shù)問題，請來電(diàn)/在線咨詢，電(diàn)話：021-54736159 楊先生(shēng)。

▶ D1. 鈣離子螯合劑（EGTA）基本介紹

EGTA，英文名Ethylene Glycol Tetraacetic Acid，中文名乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸，CAS：67-42-5，各種緩沖液中的一(yī)種重要化學試劑。最廣泛使用的一(yī)種鈣離子螯合劑，可在鎂離子Mg2+存在情況下(xià)，用來測定鈣離子，因鈣離子Ca2+-EGTA複合物(wù)的穩定性約比Mg2+-EGTA複合物(wù)強100,000倍。可用來制備鈣離子緩沖液和調控鈣離子濃度。

常在鈣離子載體如Ionomycin（離子黴素）存在的條件(jiàn)下(xià)，使用CaEDTA buffer原位校準細胞内鈣離子指示劑。

▶ D2. 鈣離子螯合劑（EGTA）産品訂購：更大包裝或産品技(jì)術(shù)問題，請來電(diàn)/在線咨詢，電(diàn)話：021-54736159 楊先生(shēng)。

注意事(shì)項

為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作，主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本，以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。