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Fluo-8, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光(guāng)探針,超級純
時間:2016-07-02     作者:懋康生(shēng)物(wù)     文章來源:原創    

Fluo-8, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光(guāng)探針,超級純

最亮的Ca2+綠色熒光(guāng)探針


搜索關鍵詞:

Fluo-8 AM, Cell Permeant 鈣離子熒光(guāng)探針,超級純;Fluo-2, AM;Fluo-2 Medium Affinity,Acetoxymethyl Ester;可見(jiàn)光(guāng)激發波長(cháng)Ca2+熒光(guāng)探針;Fluo-3;Fluo-4;高(gāo)通(tōng)量篩選 HTS Screen Assay;


Fluo-8(Fluo-2 Medium Affinity),是目前最亮的可見(jiàn)光(guāng)激發波長(cháng)Ca2+熒光(guāng)探針,其熒光(guāng)強度比Fluo-4強兩倍,比Fluo-3強四倍。Fluo-8具中等程度的Ca2+親和力,幾乎接近Fluo-3,Fluo-4(Fluo-3: Kd=0.4μM、Fluo-4: Kd=0.36μM、Fluo-4: Kd= 0.389μM),使用上(shàng)幾乎同Fluo-3和Fluo-4。


Fluo-8不僅維持Fluo-3,Fluo-4便捷的光(guāng)譜檢測特性,與Ca2+結合後的最大激發波長(cháng)為(wèi)490nm,最大發射波長(cháng)為(wèi)514nm。而且具有改善的細胞載入和Ca2+響應能(néng)力。Fluo-8加載具較弱的溫度依賴性,在室溫或37℃孵育皆染色良好,不像Fluo-3,Fluo-4嚴格要求在37℃孵育,此特征使其更适用于HTS高(gāo)通(tōng)量篩選實驗。Fluo-8應用廣泛,與許多(duō)細胞系和靶向樣本兼容,不會(huì)受配體或靶标本身信号幹擾。Fluo-8可通(tōng)過激光(guāng)共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、熒光(guāng)酶标儀、熒光(guāng)顯微鏡等來檢測胞内鈣離子水(shuǐ)平的變化。Fluo-8, AM是Fluo-8的一(yī)種乙酰甲酯衍生(shēng)物(wù),具有細胞膜滲透性,隻需簡單培養,即可輕易進入細胞。一(yī)旦進入細胞内,即被其内酯酶剪切生(shēng)成不具膜滲透性的Fluo-8,從(cóng)而滞留在胞内以發揮相(xiàng)應生(shēng)理功能(néng)。


可見(jiàn)光(guāng)激發Ca2+熒光(guāng)探針的優勢:

與紫外光(guāng)激發的熒光(guāng)探針相(xiàng)比,如Fura-2和Indo-1,可見(jiàn)光(guāng)激發Ca2+探針具有以下(xià)特點:

1)适用于大多(duō)數的激光(guāng)共聚焦測鈣系統,包括共聚焦激發掃描顯微鏡以及流式細胞儀等。

2)具有更強的染料吸收性能(néng),使得更低(dī)濃度的探針即可成功檢測Ca2+變化,從(cóng)而降低(dī)對活細胞的光(guāng)毒性。

3)Ca2+依賴性熒光(guāng)強度增強,對Ca2+變化水(shuǐ)平檢測敏感度更高(gāo)。

4)降低(dī)樣品自(zì)熒光(guāng)以及光(guāng)散射的幹擾。

5)兼容光(guāng)激活探針以及UV-激發試劑,因此更方便于多(duō)參數檢測。

6)無光(guāng)譜偏移。


Fluo-8, AM相(xiàng)比較于Fluo-3,Fluo-4的優勢:

1)目前最亮的可見(jiàn)光(guāng)激發波長(cháng)Ca2+熒光(guāng)探針,熒光(guāng)強度是Fluo-4的兩倍,Fluo-3的四倍;

2)熒光(guāng)探針加載更靈活快速,室溫或37℃孵育染色效果好,不像Fluo-3、Fluo-4嚴格要求在37℃孵育;

3)維持Fluo-3、Fluo-4的檢測光(guāng)譜特性,與Ca2+結合後的最大激發波長(cháng)為(wèi)490nm,最大發射波長(cháng)為(wèi)514nm。4)50μg小(xiǎo)包裝供應,使用方便,且能(néng)很好保證産品的穩定性。


Fluo-8, AM的應用圖片:

Fig. 1,U2OS cells were seeded overnight at 40,000 cells per 100 µL per well in a 96-well black wall/clear bottom costar plate. The growth medium was removed, and the cells were incubated with 100 µl of 4 µMFluo-4, AMorFluo-8, AMin HHBS at 37 °C, 5% CO2incubator for 1 hour. The cells were washed twice with 200 µl HHBS, then imaged with a fluorescence microscope using FITC channel.


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Fluo-8, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光(guāng)探針,超級純

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MX4503-50UG        

Fluo-3, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光(guāng)探針,超級純

506/526

50μg

375

MX4503-250UG

506/526

5×50μg

1500

MX4504-50UG

Fluo-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光(guāng)探針,超級純

494/516

50μg

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MX4504-250UG

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Fluo-8 AM, Cell Permeant 鈣離子熒光(guāng)探針,超級純

490/514

50μg

375

MX4505-250UG

490/514

5×50μg

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MX4507-50UG

Rhod-2, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光(guāng)探針,超級純

549/578

50μg

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】


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