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JC-1 (Powder) 線粒體膜電(diàn)位熒光(guāng)探針(粉末)
目錄号 MX3203-1MG 售價 588.00元
規格 1mg 運輸溫度 冰袋
其他名稱 5,5‘,6,6’-Tetrachloro-1,1‘,3,3’-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide 保存溫度 -20℃幹燥避光(guāng)保存
CAS号 3520-43-2 有效期 2年(nián)
應用 線粒體熒光(guāng)探針檢測 訂購數量
産品簡介:

JC-1 線粒體膜電(diàn)位熒光(guāng)探針

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産品标簽

Rhodamine 123羅丹明123;JC-1;JC-10;CCCP;CAS:62669-70-9


産品信息

産品名稱

産品編号

CAS NO.        

規格            

價格(元)  

JC-1 (Powder) 線粒體膜電(diàn)位熒光(guāng)探針    

MX3203-1MG      

3520-43-2

1mg

588

JC-1 (Powder) 線粒體膜電(diàn)位熒光(guāng)探針

MX3203-5MG

3520-43-2

5mg

1918

JC-1 (Powder) 線粒體膜電(diàn)位熒光(guāng)探針

MX3203-25MG

3520-43-2

25mg

7288


溫馨提示:見(jiàn)我司整理線粒體熒光(guāng)探針産品專題


産品描述

JC-1是一(yī)種廣泛用于檢測線粒體膜電(diàn)△Ψm位的理想熒光(guāng)探針。JC-1染料以電(diàn)勢依賴性的方式積聚在線粒體内,可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電(diàn)位。正常線粒體内,JC-1聚集在線粒體基質中形成聚合物(wù),聚合物(wù)發出強烈的紅(hóng)色熒光(guāng)(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電(diàn)位的下(xià)降或喪失,JC-1隻能(néng)以單體的形式存在于胞漿中,産生(shēng)綠色熒光(guāng)(Ex=514 nm, Em=529 nm)。

JC-1不僅可用于定性檢測,因顔色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電(diàn)位的變化。也可以用于定量檢測,因線粒體的去極化程度可以通(tōng)過紅(hóng)/綠熒光(guāng)強度的比例來衡量。觀察時,隻需使用常規的觀察紅(hóng)色熒光(guāng)和綠色熒光(guāng)的設置即可。


本品以凍幹粉形式提供,CAS NO.3520-43-2 ,細胞培養級。用于檢測細胞的線粒體膜電(diàn)位時常用的濃度範圍為(wèi)1~20 µg/ml,對于很多(duō)細胞适宜采用的工(gōng)作濃度為(wèi)10 µg/ml。


産品特性

1)CAS NO:3520-43-2 

2)化學名:5,5‘,6,6’-Tetrachloro-1,1‘,3,3’-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide

3)分子式:C25H27Cl4IN4

4)分子量:652.23 g/mol

5)  純度:>95%(HPLC)

6)  外觀:紅(hóng)褐色粉末

7)  溶解性:溶于DMSO、DMF,幾乎不溶于水(shuǐ)

8)  Ex/Em:單體形式(monomer form):Ex=514 nm, Em=529 nm;

                  聚合物(wù)形式(J-aggregate form):Ex=585 nm, Em=590 nm;


保存與運輸方法

保存:-20℃幹燥避光(guāng)保存,2年(nián)有效。

運輸:冰袋運輸。


注意事(shì)項

1)JC-1是光(guāng)敏感性的,所有染色步驟的操作過程中避免強光(guāng)接觸。

2)JC-1染色完成後,立即進行後續的結果分析非常必要;

3)為(wèi)了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。


使用方法

1. 染色工(gōng)作液制備

1)JC-1儲存液制備:将JC-1粉末室溫回溫20min左右,直接加1ml無水(shuǐ)DMSO到(dào)5mg粉末,颠倒混勻,使其充分溶解後,即得到(dào)5mg/ml的儲存液。溶液單次用量分裝存于-20℃,避光(guāng)幹燥且避免反複凍融。

2)JC-1工(gōng)作液制備:将凍存的儲存液置于室溫充分融化,之後用緩沖液或者預熱的培養基直接稀釋儲存液(5 mg/ml)到(dào)需要的工(gōng)作濃度,邊震蕩邊稀釋,充分混勻。為(wèi)了去除任何不溶顆粒,建議13,000 x g離心工(gōng)作液1 min,小(xiǎo)心吸取上(shàng)清轉移到(dào)新的管子内。整個(gè)過程要避光(guāng)操作。

【注意】:因JC-1不溶于水(shuǐ),很可能(néng)在稀釋到(dào)工(gōng)作液的過程中形成聚集顆粒,建議細胞染色前用離心或者過濾的方法去除這些顆粒後再使用。


2. JC-1染色步驟(流式細胞儀)

1)于6-,12或24-孔闆上(shàng)進行細胞鋪闆,調整密度為(wèi)5×105cells/ml。37℃,5% CO2培養箱培養過夜。選擇合适的化合物(wù)根據特定的步驟進行凋亡誘導。【注意】:進行凋亡誘導時的細胞密度建議不超過1×106cells/ml,也可根據自(zì)己的細胞類型培養至合适的密度。

2)取0.5 ml細胞懸液至無菌的離心管内;

3)室溫條件(jiàn)400 x g離心5 min;吸掉上(shàng)清。

4)用0.5 ml JC-1工(gōng)作液重懸細胞,于37℃,5% CO2培養箱孵育15-30 min;【注意】:一(yī)般情況,15 min足以進行充分的染色

5)室溫條件(jiàn)400 x g離心5 min;吸掉上(shàng)清;

6)用2 ml細胞培養液或者緩沖液重懸細胞,之後室溫條件(jiàn)400 x g離心5 min;吸掉上(shàng)清;

7)重複步驟6);

8)用0.5 ml新鮮培養液或者緩沖液重懸細胞,即可進行後續的流式分析。【注意】:請馬上(shàng)進行流式定量分析,此細節很重要。

數據分析:含有紅(hóng)色JC-1聚集物(wù)的健康細胞線粒體用FL2通(tōng)道檢測;含有綠色JC-1單體的凋亡或不健康細胞用FL1(FITC)通(tōng)道檢測。


3. JC-1染色步驟(熒光(guāng)顯微鏡)

A、懸浮細胞

1)-6)同上(shàng)JC-1染色步驟(流式細胞儀);

7)用0.3 ml緩沖液重懸細胞,即可進行熒光(guāng)顯微鏡檢測。【注意】:請馬上(shàng)進行熒光(guāng)顯微分析,此細節重要。


 
數據分析:

使用可同時檢測FITC/TRITC或者FITC/Texas RedTM的雙帶帶通(tōng)濾波器(qì)進行檢測。健康細胞因JC-1聚集後線粒體呈紅(hóng)色,最大發射波長(cháng)為(wèi)590 nm。而凋亡/壞死細胞内的JC-1以單體形式存在,線粒體呈綠色,最大發射波長(cháng)為(wèi)530 nm。


B、貼壁細胞

1)培養皿内用蓋玻片進行細胞爬片或者細胞培養在腔室玻片(chamber slide)上(shàng)。選擇合适的化合物(wù)根據特定的步驟進行凋亡誘導。

2)染色前開(kāi)始配制JC-1工(gōng)作液,配制步驟見(jiàn)上(shàng)。

3)吸掉細胞培養液,然後加入足夠覆蓋所有細胞的JC-1工(gōng)作液。于37℃,5% CO2培養箱孵育15-30 min;【注意】:一(yī)般情況,15 min足以進行充分的染色。

4)吸掉培養液,然後用合适的緩沖液清洗細胞2次。

5)加入2ml細胞培養液(培養液可含血清和酚紅(hóng))或者PBS緩沖液,于熒光(guāng)顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下(xià)觀察。數據分析同A.懸浮細胞。


4. JC-1染色步驟(熒光(guāng)酶标儀)

1)-7)同上(shàng)JC-1染色步驟(流式細胞儀);

8)用0.3 ml緩沖液重懸細胞;然後按照(zhào)每孔0.1 ml的量将染色好的細胞轉移到(dào)黑(hēi)色的96孔闆内,即可進行熒光(guāng)酶标闆分析。【注意】:請馬上(shàng)進行熒光(guāng)顯微分析,此細節重要。


 
數據分析:

健康細胞,JC-1單體聚集形成聚合物(wù),線粒體呈現強烈的紅(hóng)色熒光(guāng)(激發波長(cháng)550 nm,發射波長(cháng)600 nm)。而凋亡或壞死細胞内JC-1以單體形式存在,線粒體呈強烈的綠色熒光(guāng)(激發波長(cháng)485 nm,發射波長(cháng)535nm)。之後計算(suàn)紅(hóng)色熒光(guāng)信号與綠色熒光(guāng)信号的比值,用來判斷細胞健康程度。


相(xiàng)關産品:

産品編号

産品名稱

規格

MX3203-1MG

JC-1 (Powder)線粒體膜電(diàn)位熒光(guāng)探針(粉末)

1mg

MX3204-100T

JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit

100T

MX3206-1MG

JC-10 for Mitochondrial Membrane Potential

1mg

MX3207-100T

JC-10 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit 

100T

MX3208-5MG

Rhodamine 123羅丹明123(線粒體膜電(diàn)位熒光(guāng)探針)

5mg

MX3209-100T

Rhodamine 123 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit

100T

MX3210-50T

Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit

50T

MX3212-50T

Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit

50T


 

 

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】


 

上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作,主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本,以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。


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