ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging

内質網藍色熒光(guāng)探針（活細胞成像用）

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産品标簽

ER-Tracker Blue-White DPX 内質網藍色熒光(guāng)探針；ER-Tracker Red; ER-Tracker Green; DiOC6(3)；CAS:53213-82-4；

産品信息

【溫馨提示1】：見(jiàn)我司懋康生(shēng)物(wù)整理得溶酶體熒光(guāng)探針（Lysotracker and Lysosensor）産品專題。

【溫馨提示2】：見(jiàn)我司懋康生(shēng)物(wù)整理得線粒體熒光(guāng)探針（Mitotracker）産品專題。

産品描述

ER-Tracker dyes是一(yī)系列細胞膜滲透性的活細胞染料，高(gāo)度選擇性結合内質網（ER）。不同于傳統的内質網染料DiOC6(3)，該系列染料極少染色線粒體，且低(dī)濃度下(xià)染色無細胞毒性。使用提供的優化步驟對細胞染色和甲醛處理後，可以保留部分的活細胞染色特征。

ER-Tracker Blue-White DPX是Dapoxyl (DPX)染料家族的成員(yuán)之一(yī)，這類染料具有長(cháng)發射波長(cháng)，高(gāo)吸光(guāng)系數，高(gāo)量子産量和寬廣的斯托克頻移特征。這類染料屬于環境敏感型的探針，随著(zhe)溶劑極性的增加，最大熒光(guāng)遷移到(dào)更長(cháng)的波長(cháng)，伴随著(zhe)光(guāng)量子産量降低(dī)。

本品為(wèi)DMSO儲存液，濃度為(wèi)1mM。用于活細胞内質網染色，建議工(gōng)作濃度為(wèi)100nM-1µM，需根據實際情況做優化調整。

産品特性

1）   分子式：C26H21F5N4O4S

2）   分子量：580.5283

3）   外觀：黃色液體

4）   Ex/Em：374/430-640nm (in methanol)

5）   檢測濾片：DAPI or UV longpass

6）   化學結構式：

保存與運輸方法

保存：≤-20ºC避光(guāng)幹燥保存，收到(dào)貨至少6個(gè)月(yuè)有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事(shì)項

1）   整個(gè)染色過程中需注意避光(guāng)。

2）   由于ER-Tracker Blue-White DPX是環境敏感型探針，會(huì)産生(shēng)波動較大的發射吸收峰，在430-640nm之間出現。長(cháng)通(tōng)DAPI濾光(guāng)片觀察效果最理想。 

3）   為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

使用方法

以下(xià)實驗方案是根據牛肺動脈内皮細胞（BPAE）優化所得，且已驗證适用于其他常規細胞系的染色。建議以下(xià)步驟僅作起始實驗的參考，請根據具體的細胞類型和實際情況來優化标記條件(jiàn)。

1.      試劑準備

ER-Tracker Blue-White DPX以1mM的DMSO儲存液形式提供，使用前請将ER-Tracker Blue-White DPX 從(cóng)冰箱内取出，确保回溫至室溫後，經短暫離心将所有溶液沉到(dào)管底。

2.      細胞染色

2.1    制備染色工(gōng)作液：将1mM ER-Tracker Blue-White DPX稀釋至工(gōng)作濃度，建議工(gōng)作濃度100nM-1µM。為(wèi)了最小(xiǎo)化染料過高(gāo)引起的假象，建議使用能(néng)達到(dào)實驗目的的最低(dī)濃度來完成染色。【注意】：在含Ca2+/Mg2+ 的Hank’s 平衡鹽溶液（HBSS/Ca/Mg, Cat# MS3501-500ML）内進行染色可得到(dào)最佳結果。

2.2    細胞染色：對于貼壁細胞，吸除培養基，用HBSS清洗細胞，加入預熱的染料工(gōng)作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探針的新鮮培養基，并在熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察細胞。如果細胞需要固定，請跳轉到(dào)步驟3。

3.      細胞固定及透化

3.1    固定和透化細胞：用4%甲醛于37℃固定細胞10-20min。ER-Tracker Blue-White DPX染色信号在甲醛固定後僅能(néng)部分保留下(xià)來。如果還(hái)需要做其他染色，細胞需用0.2% TritonX-100 透化處理10min。

3.2    清洗和觀察細胞：細胞固定後，用合适緩沖液清洗2次，每次5min。之後熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察。

染色示例

Fig 1. Live bovine pulmonary artery endothelial cells stained with ER-Tracker Blue-White DPX and MitoTracker Red CM-H2XRos. Live bovine pulmonary artery endothelial cells stained with ER-Tracker™ Blue-White DPX and MitoTracker® Red CM-H2XRos. The endoplasmic reticulum appears green and the mitochondria appear orange. The image was acquired using a fluorescence microscope equipped with a triple-bandpass filter set appropriate for DAPI, fluorescein and Texas Red®dyes.

相(xiàng)關産品

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