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溶酶體熒光(guāng)探針(Probes for Lysosomes)專題
時間:2017-01-07     作者:懋康原創     文章來源:懋康生(shēng)物(wù)    

 

 

搜索關鍵詞:

溶酶體(Lysosome);Acidic Organelle 酸性細胞器(qì);MitoTracker;MitoSOX;LysoTracker;LysoSensor;溶酶體貯積症(Lysosome Storage Diseases,LSDs)

 

基本介紹:

溶酶體(Lysosome)又(yòu)稱為(wèi)溶質體,是由單層膜圍成的球狀體,主要化學成分為(wèi)脂類和蛋白(bái)質。溶酶體内富含幾十種酸性水(shuǐ)解酶,包括蛋白(bái)酶、核酸酶、磷酸酶、糖苷酶、脂肪酶、磷酸酯酶及硫酸酯酶等,能(néng)夠控制多(duō)種内源性和外源性大分子物(wù)質的消化。因此,溶酶體具有溶解或消化功能(néng),是物(wù)質代謝的場所。

 

溶酶體結構和功能(néng)異常引起的疾病稱為(wèi)溶酶體病。常見(jiàn)的有溶酶體相(xiàng)關的遺傳性疾病,緻病機(jī)理在于酸性水(shuǐ)解酶合成基因突變引起酶合成障礙,造成溶酶體酶缺乏,從(cóng)而緻使相(xiàng)應酶代謝底物(wù)不能(néng)降解而積蓄在溶酶體中,造成細胞代謝障礙,形成溶酶體貯積症。溶酶體異常還(hái)與休克、類風濕關節炎、腫瘤等疾病發生(shēng)有關聯。

 

溶酶體系列探針:

一(yī)、LysoTracker Probes酸性細胞器(qì)選擇性的細胞膜滲透性探針)

1. 傳統溶酶體探針的缺點:

弱堿性胺類選擇性聚積在低(dī)pH的細胞區室(cellular compartments),可用來研究溶酶體的生(shēng)物(wù)合成和發病機(jī)制。最常用的一(yī)種酸性細胞器(qì)探針為(wèi)DAMP,本身無熒光(guāng),需要與抗DNP抗體聯合使用,并直接或間接偶聯到(dào)熒光(guāng)素或酶上(shàng),從(cóng)而可視化觀察染色特征。熒光(guāng)探針中性紅(hóng)和吖啶橙也常用來染酸性細胞器(qì),即使無染色特異性。

 

2. LysoTracker溶酶體探針的優點

正是以上(shàng)缺點促使我們開(kāi)發替代性的酸性細胞器(qì)選擇性探針,用于短期和長(cháng)期示蹤研究。

Lysotracker探針是向酸性熒光(guāng)探針,用于活細胞内酸性細胞器(qì)的标記和示蹤。這些探針具有幾個(gè)重要特征,包括高(gāo)度選擇靶向酸性細胞器(qì)和納摩爾濃度有效标記活細胞。另外,LysoTracker系列有幾種熒光(guāng)顔色,特别适合用于多(duō)色标記實驗。

Lysotracker探針,含一(yī)連接到(dào)弱堿基上(shàng)的熒光(guāng)素,中性pH下(xià)呈部分質子化,能(néng)夠自(zì)由穿透細胞膜且典型聚集在球形細胞器(qì)上(shàng)。研究發現,Lysotracker探針必須在極低(dī)濃度(通(tōng)常約50nM)下(xià)才能(néng)獲得優異的選擇性。這些探針的滞留(retention)機(jī)制雖然沒有被完全研究透,但很可能(néng)與酸性細胞器(qì)的質子化和滞留性有關,即使後續的弱堿性細胞滲透化合物(wù)處理細胞通(tōng)常不會(huì)可逆化染色結果。Lysotracker探針的内吞化動力學研究顯示染料進入活細胞的攝入速率僅幾秒(miǎo)即可。然而,這些溶酶體探針會(huì)導緻溶酶體被堿化,比如長(cháng)期孵育會(huì)誘使溶酶體pH的增加。因此,建議成像前用探針孵育細胞的時間僅1-5min就(jiù)好。

 

3. LysoTracker溶酶體探針産品

我們提供5種Lysotracker探針,它們在光(guāng)譜特性和使用特點上(shàng)有所差異,具體見(jiàn)下(xià)表。

貨号           

産品名稱                                          

Ex/Em(nm)       

規格               

價格(元)   

L7525

LysoTracker Blue DND-22 藍色

373/422

20 x 50 µL

4,992.00

L7526

LysoTracker Green DND-26 綠色

504/511

20 x 50 µL

4,968.00

L12491

LysoTracker® Yellow-HCK-123 黃色

465/535

20 x 50 µL

4,267.00

L7528

LysoTracker® Red DND-99 紅(hóng)色

577/590

20 x 50 µL

4,909.00

L12492

LysoTracker® Deep Red 遠(yuǎn)紅(hóng)

647/668

5 x 50 µL

3,696.00

以上(shàng)所有産品均為(wèi)Life(Invitrogen)原裝正品,原始包裝為(wèi)20x50 µg(20支50µg單個(gè)包裝構成)或5x50 µg(5支50µg單個(gè)包裝構成)。我司對L7526,L7528進行拆開(kāi)銷售,特惠價為(wèi)430元/支,單支50µl;L7525 單支550元;另外對L12492進行拆開(kāi)銷售,特惠價1160元/支,單支50µl;現貨銷售,歡迎訂購。

 

二、LysoSensor Probes(酸性細胞器(qì)選擇性的pH指示劑)

1. 産品描述

為(wèi)滿足研究者研究活細胞内溶酶體生(shēng)成和功能(néng)的動力學特征,特此開(kāi)發Lysosensor系列探針。

LysoSensor探針是一(yī)種區分酸性細胞器(qì)的熒光(guāng)pH指示劑。該系列染料屬于向酸性探針,能(néng)夠聚集在呈質子化的酸性細胞器(qì)上(shàng)。這一(yī)質子化過程使得因弱堿性側鏈而封閉熒光(guāng)的探針得以熒光(guāng)釋放(fàng),促使熒光(guāng)信号增強。因此,LysoSensor探針遇酸後熒光(guāng)信号呈現pH依賴性的增強。


 2. LysoSensor溶酶體探針産品

我們提供3種Lysosensor探針,它們在光(guāng)譜特性和使用特點上(shàng)有所差異,具體見(jiàn)下(xià)表。

貨号      

産品名稱                                             

Ex/Em(nm)           

pKa        

規格 

價格(元)

L7533

LysoSensor Blue DND-167 藍色

373/425

5.1

20 x 50 µL

4,174.00

L7535

LysoSensor Green DND-189 綠色

443/505

5.2

20 x 50 µL

4,225.00

L7545

LysoSensor Yellow/Blue DND-160 藍/黃色

384/540, 329/440

4.2

20 x 50 µL

4,211.00

以上(shàng)所有産品均為(wèi)Life(Invitrogen)原裝正品,原始包裝為(wèi)20x50 µl(20支50µl單個(gè)包裝構成)。我司對L7545進行拆開(kāi)銷售,特惠價為(wèi)550元/支,單支50µl,現貨銷售,歡迎訂購。

  

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

 

上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作,主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本,以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。 
 

 

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