DAPI 細胞核探針

産品标簽

DAPI 藍色細胞核探針；PI 碘化丙啶；Hoechst 33342；Hoechst 33258；7-AAD；CAS：28718-90-3；

産品信息

溫馨提示：見(jiàn)我司整理的細胞核（Cell Nuclear）熒光(guāng)探針産品專題。

産品描述

DAPI，英文全稱4’,6-Diamidino-2’-phenylindole，中文全稱4’,6-聯脒-2’-苯基吲哚，是一(yī)種藍色熒光(guāng)染料，選擇性結合雙鏈DNA的小(xiǎo)溝區（優先結合AT富集的DNA）形成穩定的複合物(wù)，産生(shēng)比DAPI約強20倍的熒光(guāng)。DAPI的最大激發/發射波長(cháng)為(wèi)340/488nm，DAPI-DNA複合物(wù)的最大激發/發射波長(cháng)為(wèi)364/454nm，通(tōng)常用作熒光(guāng)顯微術(shù)、流式細胞術(shù)和染色體染色的細胞核複染劑。由于對DNA的高(gāo)親和性，DAPI還(hái)常常被用在細胞計數、凋亡檢測、支原體污染檢測、基于DNA内含物(wù)的細胞分選，以及高(gāo)内涵成像分析中的核分割工(gōng)具。雖然高(gāo)濃度情況下(xià)DAPI能(néng)夠進入活細胞，但DAPI不具細胞膜滲透性，通(tōng)常情況用來染固定細胞。對于活細胞染色，Hoechst 33342（貨号：MX4203-10MG）是一(yī)種受歡迎的具細胞膜滲透性的核複染劑。

本品為(wèi)DAPI的二鹽酸鹽（2HCl），粉末形式，易溶于水(shuǐ)。用于細胞核染色時，推薦工(gōng)作濃度為(wèi)0.5-10μg/ml。

産品特性

1）CAS NO：28718-90-3

2）英文同義名：DAPI dihydrochloride; 4’,6-Diamidino-2’-phenylindole dihydrochloride; 2-(4-Amidinophenyl)- 6-indolecarbamidine dihydrochloride; 4′,6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride;

3）中文同義名：DAPI二鹽酸鹽；4’,6-聯脒-2’-苯基吲哚二鹽酸鹽；

4）分子式：C16H15N5· 2HCl

5）分子量：350.25

6） 純度：>90% (from N)

7）溶解性：溶于水(shuǐ)（1-5mg/ml）

8）Ex/Em：340/488nm（DAPI）；364/454nm（DAPI-DNA）；

9）化學結構：

保存與運輸方法

保存：室溫幹燥避光(guāng)保存，2年(nián)有效。

運輸：室溫運輸。

儲存液配制

用雙蒸水(shuǐ)溶解，配制1-5mg/ml的儲存液。-20ºC避光(guāng)保存1年(nián)，建議分裝保存，避免反複凍融。【注意】：本品不可以用緩沖液直接溶解。

使用方法

1. 工(gōng)作液配制

用雙蒸水(shuǐ)或PBS稀釋母液，配制成所需要的工(gōng)作濃度（0.5-10μg/ml）。

2. 固定的細胞或組織染色

對于固定的細胞或組織樣品，固定後，适當洗滌去除固定劑。DAPI染色通(tōng)常在其他染色的最後進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行DAPI染色。

2.1 對于貼壁細胞或組織切片：加入适量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放(fàng)置3-5min。

2.2 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生(shēng)理鹽水(shuǐ)洗滌2-3次，每次3-5min。

2.3 直接在熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察或封片後熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察。Ex/Em=364/454nm。

3. 活的細胞或組織染色

3.1 細胞培養物(wù)中加入适量DAPI染色液，約1/10細胞培養基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。對于六孔闆，一(yī)個(gè)孔通(tōng)常需加入1ml染色液；對于96孔闆，一(yī)個(gè)孔通(tōng)常需加入100μl染色液。

3.2 在37℃培養細胞10～20min。

3.3 用PBS或合适的緩沖液洗細胞兩次。

3.4 直接在熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察或封片後熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察。Ex/Em=364/454nm。

注意事(shì)項

1）DAPI對人體有一(yī)定刺激性，請注意适當防護。

2）熒光(guāng)染料都存在淬滅的問題，建議染色後盡量當天完成檢測。

3）為(wèi)減緩熒光(guāng)淬滅可以使用抗熒光(guāng)淬滅封片液。

4）為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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