Aureobasidin A (AbA)金擔子素A/短梗黴素A
——Clontech/Takara 酵母菌/真菌轉化實驗選擇性抗生(shēng)素/酵母單雜(zá)交/雙雜(zá)交研究
搜索關鍵詞：選擇性抗生(shēng)素；酵母菌轉化系統【釀酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】；真菌轉化系統【構巢曲黴、黑(hēi)曲黴】；酵母單雜(zá)交/雙雜(zá)交；AUR1基因；AURA基因；IPAC合成酶；AUR1-C突變基因；
基本描述：
金擔子素A（Aureobasidin A，AbA），也稱為(wèi)短梗黴素A，一(yī)種來源于絲狀真菌Aureobasidium pullulansNo. R106的環酯肽類抗真菌抗生(shēng)素，在較低(dī)濃度（0.1-0.5μg/ml）下(xià)即可對酵母菌産生(shēng)毒性，對該抗生(shēng)素敏感的真菌包括：釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光(guāng)滑念珠菌（Candida glabrata）、構巢曲黴（Aspergillus nidulans）和黑(hēi)曲黴（Aspergillusniger.）。金擔子素AbA通(tōng)過抑制真菌生(shēng)長(cháng)所依賴的肌醇磷脂酰神經酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻礙神經酰胺到(dào)肌醇磷脂酰神經酰胺的合成，導緻鞘脂類物(wù)質的合成量不足，細胞膜破裂，進而殺死菌株。研究發現，來自(zì)釀酒酵母菌的AUR1和構巢曲黴的AURA基因，兩者具有同源性，都能(néng)夠編碼IPC合成酶，對這兩種基因的點突變，也都賦予菌株對AbA産生(shēng)很強的抗性，比如：突變基因AUR1-C。
AbA用作選擇性标記的應用和優勢：
1. 酵母轉化研究中，金擔子素A（AbA）是一(yī)種非常有效的選擇性标志(zhì)；
2. 使用上(shàng)基本不需優化條件(jiàn)，且創造極低(dī)背景。AbA抗性是酵母雙雜(zá)交研究中理想的報(bào)告子，兼容于攜帶相(xiàng)應抗性的酵母單雜(zá)交/雙雜(zá)交系統，并提供良好的篩選結果。
攜帶AbA抗性基因（AUR1-C）的商業(yè)化載體：
1. 大腸杆菌-酵母菌穿梭載體/大腸杆菌-曲黴穿梭載體（shuttle vector）
簡單描述：pAUR載體系統包含六種大腸杆菌-酵母菌穿梭載體，每一(yī)種特别改造用于釀酒酵母、粟酒裂殖酵母或者構巢曲黴，這些載體都涵蓋一(yī)個(gè)新型的藥物(wù)抗性選擇性标志(zhì)（金擔子素Aureobasidin A抗性），使得酵母菌或絲狀真菌具有此抗性。
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載體 |
貨号 |
規格 |
特點 |
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pAUR101 DNA |
3600 |
20μg |
在酵母細胞内不會(huì)自(zì)主複制，僅通(tōng)過重組方法整合進入染色體才能(néng)保留在細胞内。染色體整合和釀酒酵母菌轉化用載體。含來自(zì)釀酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大腸杆菌-酵母菌穿梭載體； |
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pAUR112 DNA |
3601 |
20μg |
含CEN/ARS區域，在酵母細胞内能(néng)自(zì)主複制，因此細胞分裂過程能(néng)保持穩定。含AmpR和URA3基因（尿嘧啶選擇性标記），來自(zì)釀酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大腸杆菌-酵母菌穿梭載體； |
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pAUR123 DNA |
3602 |
20μg |
來自(zì)釀酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。蛋白(bái)表達載體和來源于pAUR112的大腸杆菌-酵母菌穿梭載體；含用于酵母細胞蛋白(bái)表達用的ADH1持續性啓動子； |
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pAUR135 DNA |
3604 |
20μg |
Vector for marker removal in S. cerevisiae；大腸杆菌-酵母菌穿梭載體； |
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pAUR224 DNA |
3603 |
20μg |
含來自(zì)粟酒裂殖酵母的AbA抗性基因-aur1R；蛋白(bái)表達載體，含粟酒裂殖酵母中發揮作用的CMV持續性啓動子； |
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pAUR316 DNA |
3605 |
20μg |
構巢曲黴内能(néng)夠自(zì)主複制；來自(zì)構巢曲黴的AbA抗性基因-aurAr以及AMA1區域（複制起始區）和AmpR；大腸杆菌-曲黴穿梭載體； |
2. 酵母報(bào)告基因載體（yeast reporter vector）
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載體名稱 |
特點 |
備注 |
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pAbAi Vector |
用于單雜(zá)交（one-hybrid）實驗的酵母報(bào)告載體，可用來鑒定和分類DNA結合蛋白(bái)。特别設計兼容于Matchmaker Gold酵母單雜(zá)交篩選系統，順式作用元件(jiàn)（靶向序列）可插入MCS用作誘餌以篩選GAL4 AD/cDNA融合文庫；目标蛋白(bái)-DNA的相(xiàng)互作用驅動AUR1-C抗性基因表達，從(cóng)而能(néng)篩選到(dào)AbA抗性酵母； |
Matchmaker Gold酵母單雜(zá)交系統 |
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p53-AbAi Vector |
酵母報(bào)告載體，配合Matchmaker Gold酵母單雜(zá)交篩選系統的陽性對照(zhào)載體；含p53結合序列（順式作用元件(jiàn)）；AbA抗性基因AUR1-C的表達受GAL4 AD-p53與p53結合序列的相(xiàng)互作用而誘發；p53-AbAi在酵母細胞内不能(néng)遊離繁殖，僅當整合進入宿主染色體才可以穩定存在，通(tōng)過載體上(shàng)的URA3基因和酵母菌株上(shàng)的非功能(néng)ura3-52 locus發生(shēng)同源重組以實現整合。另，含Col E1複制起始子和AmpR，可實現大腸杆菌内的擴增和複制。 |
基本特性：
1） 同義名：短梗黴素A
3） 分子量：1100Da
4） 純度：≥95%
5） 熔點：155-157℃
6）溶解性：不溶于水(shuǐ)，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）
産品訂購：更大訂購或産品技(jì)術(shù)問題，請來電(diàn)/在線咨詢，電(diàn)話：021-54736159 。網站：www.maokangbio.com。
或直接參考Clontech官網：http://www.clontech.com/CN/Products/Protein_Interactions_and_Profiling/Yeast_Two-Hybrid/Aureobasidin?sitex=10022:22372:US
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貨号 |
産品名稱 |
規格 |
價格（元） |
貨期 |
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Clontech |
630466 |
Aureobasidin A for Yeast Two-Hybrid Studies【1mg/ml in methanol特殊包裝，經濟實惠】 |
1mg |
1400 |
現貨 |
相(xiàng)關産品：
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品牌 |
貨号 |
産品名稱 |
規格 |
價格（元） |
貨期 |
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MKbio |
10g |
100 |
現貨 |
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MKbio |
MS0018-25G |
Ampicillin, Sodium Salt 氨苄青黴素鈉 |
25g |
220 |
現貨 |
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MKbio |
MS0018-100G |
Ampicillin, Sodium Salt 氨苄青黴素鈉 |
100g |
750 |
現貨 |
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MKbio |
25mg |
285 |
現貨 |
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MKbio |
MF2003-100MG |
100mg |
800 |
現貨 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作，主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本，以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。
