植物(wù)血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)
— —最常用的促有絲分裂原(Mitogen)
關鍵詞:
淋巴細胞轉化實驗(T Lymphocyte Transformation Test),非特異性有絲分裂原(mitogen),T細胞活化和增殖,PHA-M,PHA-P,PHA-L,PHA-E,Con A,CAS:9008-97-3
T淋巴細胞轉化實驗(T Lymphocyte Transformation Test)背景與意義:
T細胞在體外培養時,受到(dào)非特異性有絲分裂原(如PHA、ConA)刺激後,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白(bái)和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高(gāo)低(dī)可以反映機(jī)體的細胞免疫水(shuǐ)平,因此可作為(wèi)測定機(jī)體免疫功能(néng)的指标之一(yī)。
Phytohemagglutinin(植物(wù)血凝素),簡稱為(wèi)PHA,多(duō)指來源于Phaseolus Vulgaris菜豆屬(紅(hóng)腰豆)的凝集素(lectin),常用于人淋巴細胞培養物(wù)的促有絲分裂原(mitogen),具有促進有絲分裂和誘導幹擾素分泌的活性。PHA誘導B細胞活化效應比較弱,主要用做T細胞活化誘導劑。
植物(wù)血凝素(PHA)屬于高(gāo)分子糖蛋白(bái),是低(dī)聚糖(由半乳糖,N-乙酰葡糖胺和甘露糖所構成)和蛋白(bái)質形成的複合物(wù)。由4個(gè)亞基通(tōng)過非共價鍵結合形成的四聚體糖蛋白(bái),包含兩種亞基分子,L亞基(白(bái)細胞凝集素)和E(紅(hóng)細胞凝集素),因此含有5種異構體(L4, L3E1, L2E2, L1E3和E4)。L亞基具有白(bái)細胞凝集和高(gāo)促有絲分裂活性,E亞基具有高(gāo)紅(hóng)細胞凝集和低(dī)促有絲分裂活性。
目前市(shì)場上(shàng)提供的植物(wù)血凝素(PHA)主要以PHA-L,PHA-E,PHA-M和PHA-P四種形式提供,在應用上(shàng)具有一(yī)些差異,具體如下(xià):
類型 |
應 用 |
PHA-L |
純化的L4,是白(bái)細胞凝集素,具有高(gāo)促有絲分裂和白(bái)細胞凝集活性,但紅(hóng)細胞凝集活性極低(dī)。廣泛用于免疫學研究,比如用作PBMC培養的刺激物(wù);用作INF-γ ICS、ELISPOT實驗的陽性對照(zhào);或用作順行性神經示蹤劑。 |
PHA-E |
純化的E4,是紅(hóng)細胞凝集素,具有低(dī)促有絲分裂活性和高(gāo)紅(hóng)細胞凝集活性。不具有血型特異性,但凝集作用會(huì)受到(dào)某些寡糖抑制。也常用于糖基化修飾研究。 |
PHA-P |
為(wèi)未分離純化PHA-E和PHA-L之前的原PHA蛋白(bái)形式(含PHA-E及PHA-L二種分子)。 |
PHA-M |
PHA的粘性蛋白(bái)形式(mucoprotein form),與PHA-P成分差不多(duō),都是粗提物(wù),主要用于刺激外周血單個(gè)核細胞增殖,促進一(yī)些細胞因子生(shēng)成和膜表面蛋白(bái)的表達。PHA-M具有強大的紅(hóng)細胞凝集特性,最初用來分離全血中的淋巴細胞。 |
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