5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脫氧尿苷

産品标簽

EdU 5-乙炔基-2’-脫氧尿苷；BrdU 5-溴-2’-脫氧尿苷；Alexa Fluor 488 azide；Anti-BrdU antibody（DSHB，G3G4）；Cell Proliferation 細胞增殖檢測；CAS NO:61135-33-9；

産品信息

産品描述

EdU，英文全稱5-Ethynyl-2'-deoxyuridine，中文全稱5-乙炔基-2’-脫氧尿苷，是BrdU（5-溴-2’-脫氧尿苷）的新型替代物(wù)，可直接檢測活躍的DNA合成或細胞周期的S期合成。作為(wèi)胸苷的核苷類似物(wù)，可插入細胞培養物(wù)或動物(wù)體内處于活躍合成期的細胞DNA，無明顯毒性。EdU的檢測基于高(gāo)效的點擊化學反應（click reaction），是由I價銅離子催化的疊氮化物(wù)和炔烴化合物(wù)之間的反應過程。EdU含有炔烴基，可與含疊氮基團的熒光(guāng)探針反應形成穩定的三唑環。

借EdU的點擊反應進行DNA檢測的優勢是非常顯而易見(jiàn)的。含疊氮基團熒光(guāng)探針的小(xiǎo)分子量使得EdU能(néng)在溫和條件(jiàn)插入DNA，這相(xiàng)反于BrdU為(wèi)基礎的反應，後者需要DNA變性（通(tōng)常使用HCl，加熱或DNase消化）促使BrdU暴露，從(cóng)而被抗BrdU抗體檢測到(dào)。因此，少了變性步驟的EdU反應流程快鍵方便，可得到(dào)高(gāo)重複性的結果，并且能(néng)輕易的與相(xiàng)關抗體檢測靶标包括磷酸化H3、Ki67、周期蛋白(bái)cyclin B1等進行多(duō)重分析，通(tōng)過流式細胞儀、熒光(guāng)顯微鏡或高(gāo)通(tōng)量成像儀（HCS）來檢測。

産品特性

1）CAS NO：61135-33-9

2）同義名：2'-deoxy-5-ethynyl-uridine2’-脫氧-5-乙炔基-尿苷, 2'-deoxy-5-Ethynyluridine, 5-EdU,EdU

3）分子式：C11H12N2O5

4）分子量：252.23 g/mol

5）純度：≥98% (HPLC)

6）外觀：白(bái)色至類白(bái)色固體

7）溶解性：溶于DMSO（20mg/ml），無水(shuǐ)乙醇（~25mg/ml），PBS, pH 7.2（~10 mg/ml）

8）化學結構：

保存與運輸方法

保存：-20°C幹燥保存，至少2年(nián)有效。

運輸：冰袋運輸。

常見(jiàn)問題（FAQs）

1. 是否任何細胞型都能(néng)插入EdU？

答：不是。細胞必須含嘧啶核苷酸補救合成途徑（pyrimidine salvage pathway），沒有該途徑，EdU不能(néng)被磷酸化進而不能(néng)插入複制中的DNA。

2. EdU儲存液如何制備？

答：體外細胞實驗，取适量EdU（Mw：252.23）溶于DMSO或生(shēng)理緩沖液配制10mM母液，按單次用量分裝，置于≤-20°C凍存，1年(nián)穩定。

3. 如何進行EdU标記？

起始實驗建議測試一(yī)系列EdU濃度來确定最佳濃度。如果目前有進行基于BrdU的标記實驗，可選擇相(xiàng)似的濃度和标記時間作為(wèi)起始EdU标記條件(jiàn)。更低(dī)量的EdU可能(néng)達到(dào)同BrdU的标記效果，最優濃度根據标記時間有所變化，原則上(shàng)濃度越低(dī)，标記時間越長(cháng)。

對于細胞培養物(wù)——哺乳動物(wù)和植物(wù)細胞用0.1–10 µM EdU孵育0.5-3h能(néng)達到(dào)相(xiàng)對理想的标記；

對于活體動物(wù)——根據注射方式、給藥次數和檢測位置有所變化。參考相(xiàng)應文獻進行優化調整。

4. 如何進行EdU檢測？

使用含疊氮基團的熒光(guāng)探針如TAMRA azide，Alexa Fluor azide（包括Alexa fluor 488, 555, 594, 647）等，在含有CuSO4的染色反應液中進行熒光(guāng)染色。或者直接使用我司提供的EdU增殖檢測試劑盒（成像或流式檢測），含有所有檢測組分，使用方便。

注意事(shì)項

1）EdU是一(yī)種能(néng)插入DNA的核苷類似物(wù)，操作過程一(yī)定要注意防護，不要與皮膚直接接觸。另需戴口罩避免粉塵吸入。

2）為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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