Hoechst 33258 細胞核探針

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産品标簽

Hoechst 33258 活細胞細胞核探針；Hoechst 33342；DAPI；PI 碘化丙啶；7-AAD；CAS：23491-45-4；

産品信息

溫馨提示：見(jiàn)我司整理的細胞核（Cell Nuclear）熒光(guāng)探針産品專題。

産品描述

Hoechst 33258，也稱為(wèi)bisBenzimide H 33258（雙苯酰亞胺H33258），是一(yī)種通(tōng)過熒光(guāng)顯微鏡和流式細胞儀進行DNA檢測的藍色熒光(guāng)探針。Hoechst 33258可用于活細胞或固定細胞，也适用于流式細胞術(shù)對細胞周期的分析和DNA濃縮的監測。雖然Hoechst 33258比其他衍生(shēng)物(wù)（如Hoechst 33342）的細胞膜滲透性差些，但其能(néng)通(tōng)過繪制發射光(guāng)強度與DNA含量的标準曲線（a standard emission-to-content curve）來定量測量DNA含量。Hoechst 33258的最大激發波長(cháng)是346nm，最大發射波長(cháng)為(wèi)460nm；與雙鏈DNA結合後的最大激發波長(cháng)為(wèi)352nm，最大發射波長(cháng)為(wèi)461nm。

本品以粉末形式提供，溶于水(shuǐ)，溶解度可達10mg/ml。用于細胞核染色，推薦工(gōng)作濃度為(wèi)0.5-10μg/ml。

産品特性

1）CAS NO：23491-45-4

2）英文同義名：4-[5-(4-Methyl-1-piperazinyl)[2,5'-bi-1H-benzimidazol]-2'-yl]-phenol.trihydrochloride;bisBenzimide H 33258trihydrochloride; HOE 33258; BBIH; BXI-72;NSC33407;

3）中文同義名：雙苯酰亞胺H 33258三鹽酸鹽；赫斯特熒光(guāng)染料33258；煙(yān)酸己可堿三鹽酸鹽；甲嗪雙苯咪酚三鹽酸鹽；

4）分子式：C25H24N6O · 3HCl

5）分子量：533.88

6）純度：≥95%

7）外觀：黃色至深黃色粉末

8）溶解性：溶于水(shuǐ)（10 mg/ml）

9）Ex/Em：346/460 nm；352/461 nm（Hoechst 33258-DNA）；

10）化學結構：

保存與運輸方法

保存：-20°C避光(guāng)幹燥保存，3年(nián)有效。

運輸：冰袋運輸。

儲存液配制

用雙蒸水(shuǐ)溶解，溶解度高(gāo)達10mg/ml，根據實際情況配制所需濃度的儲存液如5mg/ml。儲存液2-8ºC避光(guāng)保存，至少1個(gè)月(yuè)有效。【注意】：本品用磷酸鹽緩沖液溶解會(huì)出現沉澱。

使用方法

1. 工(gōng)作液配制

用雙蒸水(shuǐ)或PBS稀釋母液，配制成所需要的工(gōng)作濃度（0.5-10μg/ml）。

2. 固定的細胞或組織染色

對于固定的細胞或組織樣品，固定後，适當洗滌去除固定劑。Hoechst 33258染色通(tōng)常在其他染色的最後進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行Hoechst 33258染色。

2.1 對于貼壁細胞或組織切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放(fàng)置3-5min。

2.2 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生(shēng)理鹽水(shuǐ)洗滌2-3次，每次3-5min。

2.3 直接在熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察或封片後熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察。Ex/Em=352/461nm。

3. 活的細胞或組織染色

3.1 細胞培養物(wù)中加入适量Hoechst 33258染色液，約1/10細胞培養基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。對于六孔闆，一(yī)個(gè)孔通(tōng)常需加入1ml染色液；對于96孔闆，一(yī)個(gè)孔通(tōng)常需加入100μl染色液。

3.2 在37℃培養細胞10～20min。

3.3 用PBS或合适的緩沖液洗細胞兩次。

3.4 直接在熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察或封片後熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察。Ex/Em=352/461nm。

注意事(shì)項

1）Hoechst 33258對人體有一(yī)定刺激性，請注意适當防護。

2）熒光(guāng)染料都存在淬滅的問題，建議染色後盡量當天完成檢測。

3）為(wèi)減緩熒光(guāng)淬滅可以使用抗熒光(guāng)淬滅封片液（Fluoromount-GTM抗熒光(guāng)淬滅封片劑（水(shuǐ)溶性），貨号：MM1401-5ML）。

4）為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

 — — Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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