Gelatin, Type A 明膠（A型）

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Extracellular Matrix (ECM) 細胞外基質；Gelatin 明膠；Collagen Type I 膠原蛋白(bái)I型；Poly-L-lysine 多(duō)聚L-賴氨酸；Fibronectin 纖連蛋白(bái)；Matrigel 基質膠；CAS：9000-70-8；

産品信息：

基本介紹：

明膠（Gelatin）是一(yī)種由高(gāo)平均分子量的水(shuǐ)溶性蛋白(bái)組成的非勻質混合物(wù)，存在于膠原蛋白(bái)中。通(tōng)過對皮膚、肌腱、韌帶和骨頭等組織煮沸後提煉所得。A型明膠（Type A Gelatin）來自(zì)酸水(shuǐ)解的組織，B型明膠（Type B Gelatin）來自(zì)石灰水(shuǐ)解的組織。

生(shēng)物(wù)學研究，明膠的應用包括：1）包被細胞培養闆以提高(gāo)細胞的貼壁能(néng)力；2）加入PCR反應以穩定Taq DNA聚合酶活性；3）WB、ELISA和IHC實驗中用作封閉劑；4）微生(shēng)物(wù)學研究用作物(wù)種分化培養基組成成分之一(yī)；5）作為(wèi)生(shēng)物(wù)兼容性聚合物(wù)，明膠能(néng)用作運輸載體來釋放(fàng)生(shēng)化活性分子，或組織再生(shēng)學中建立支架。工(gōng)業(yè)領域，明膠的應用包括穩定劑、增稠劑和組織形成劑，用在食品中或橡膠替代品、粘合劑、水(shuǐ)泥、平闆印刷油墨、塑料、人造絲、照(zhào)相(xiàng)底片和膠片等的生(shēng)産制造中。醫(yī)藥工(gōng)業(yè)中，明膠可用作助懸劑、包膠劑和藥片粘合劑。獸醫(yī)方面明膠可用作血漿擴容劑和止血劑。

本品以豬皮為(wèi)原料，通(tōng)過酸解法提煉所得，為(wèi)A型明膠。本品以凍幹粉形式提供，CAS NO：9000-70-8，凝膠強度~300 g Bloom，達細胞培養級别。用于細胞包被基質的推薦工(gōng)作濃度為(wèi)0.1-0.2 mg/cm2。

保存與運輸方法：

保存：室溫密封保存，數年(nián)穩定。

運輸：室溫運輸。

注意事(shì)項

1）明膠凍幹粉室溫密封保存保持數年(nián)穩定。但在空氣中加熱到(dào)100°C，會(huì)膨脹變軟，解聚産生(shēng)一(yī)種碳質并伴随吡啶堿類和氨氣的産生(shēng)。＜35-40°C明膠膨脹且吸收5~10倍體積的水(shuǐ)産生(shēng)凝膠。明膠溶于甘油和醋酸，在熱水(shuǐ)比冷水(shuǐ)溶解性強。幾乎不溶于大多(duō)數有機(jī)溶劑比如醇類、氯仿、二硫化碳、四氯化碳、酯類、苯類、酮類和油。

2）Bloom number由凝膠強度測定計（Bloom gelometer）測定，指的是從(cóng)已知濃度溶液的成膠強度。Bloom number與平均分子量成正比。豬皮明膠的Bloom number約為(wèi)90~300g。

3） 為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

使用方法

1. 明膠溶液的制備

1.1 明膠的溶解

根據實驗所需的明膠濃度，稱取适量明膠粉末，加入含雙蒸水(shuǐ)或PBS緩沖液的容器(qì)内，按照(zhào)以下(xià)兩種方法之一(yī)：1）明膠經10 min浸泡後，用熱水(shuǐ)浴加熱（溫度不要超過70℃），攪拌直至完全溶解；2）明膠經10 min浸泡後用小(xiǎo)火加熱（溫度不要超過70℃），并不斷攪拌直至完全溶解；

1.2 明膠的除菌

按照(zhào)以下(xià)兩種方法之一(yī)：

1）高(gāo)壓滅菌：将配好的明膠溶液（常用濃度0.1%~2.0%之間）裝入瓶内，121℃，15 psi，高(gāo)壓滅菌20min；

2）濾膜除菌：低(dī)濃度明膠溶液（如0.1%或0.2%）溶解後可用0.2μm濾膜除菌。但需多(duō)準備幾個(gè)濾器(qì)，因為(wèi)明膠相(xiàng)對比較難過濾。

1.3 明膠的保存

明膠溶液穩定性比較高(gāo)，置于4℃保存能(néng)長(cháng)期保持穩定。【注意】：溫度提高(gāo)會(huì)明顯降低(dī)明膠強度和粘度，導緻性能(néng)降低(dī)。

2. 明膠溶液的包被方法

具體的使用濃度和使用量依據細胞類型和實驗目的而定。

1）用組織培養級别的水(shuǐ)配制2%（w/v）的明膠溶液；

2）121℃，15 psi，高(gāo)壓滅菌20-30 min；

3）按照(zhào)5-10 μL明膠溶液/cm2（或0.1-0.2 mg/cm2）的比例包被培養皿/闆/瓶表面。充分覆蓋包被表面。

4）放(fàng)置37℃培養箱，至少幹燥2h。吸掉多(duō)餘明膠溶液，用培養基或PBS緩沖液清洗一(yī)遍，晾幹後即可使用。

相(xiàng)關産品：

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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