時間:2016-05-11
作者:懋康生(shēng)物(wù)
★ 服務描述
細胞增殖是生(shēng)物(wù)體生(shēng)長(cháng)、發育、繁殖和遺傳的基礎。細胞增殖的研究方法有很多(duō),其中測定細胞生(shēng)長(cháng)曲線是檢測細胞絕對生(shēng)長(cháng)數的常用方法,也是判定細胞活力的重要指标。我公司通(tōng)過CCK-8和克隆形成實驗來測定細胞的生(shēng)長(cháng)和增殖能(néng)力。
★ 服務内容
1:CCK-8檢測細胞毒性實驗;
CCK-8檢測細胞毒性的原理是:CCK8在電(diàn)子耦合試劑存在的情況下(xià),可以被線粒體内的一(yī)些脫氫酶還(hái)原為(wèi)具有高(gāo)度水(shuǐ)溶性的黃色甲瓒産物(wù)(Formazan dye)。細胞毒性越小(xiǎo),則顔色越深;因此,對于同樣的細胞,顔色的深淺和細胞數目呈線性關系。
2:克隆形成實驗;
克隆形成實驗是測定細胞增殖能(néng)力的有效方法之一(yī)。其原理是:單個(gè)細胞在體外增殖6代以上(shàng),其後代所形成的細胞群體稱為(wèi)克隆。每個(gè)克隆約含有50個(gè)以上(shàng)的細胞。通(tōng)過計數克隆形成率,可以反映細胞的增殖能(néng)力和獨立生(shēng)存能(néng)力。常用的方法有:平闆克隆形成實驗和軟瓊脂培養克隆形成實驗。
①:平闆克隆形成實驗
該方法操作簡單,适用于貼壁生(shēng)長(cháng)的細胞。适宜底物(wù)為(wèi)玻璃的、塑料瓶皿。實驗成功的關鍵是細胞懸液的制備和接種密度。 細胞一(yī)定要分散成單個(gè)細胞,不能(néng)有細胞團。同時,接種密度不能(néng)過大。
②:軟瓊脂培養克隆形成實驗
軟瓊脂培養法常用于檢測腫瘤細胞和轉化細胞系。實驗中瓊脂與細胞相(xiàng)混時,要注意控制瓊脂的溫度不宜超過40℃。細胞的密度每平方厘米不超過35個(gè),一(yī)般6cm的平皿接種1000個(gè)細胞。正常細胞在懸浮狀态下(xià)不能(néng)增殖,不适用于軟瓊脂克隆形成試驗。
★ 客戶所得
1:克隆形成實驗的原始圖片及分析結果;
2:完整的實驗報(bào)告(包括實驗材料,實驗步驟,實驗結果等);