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cDNA過表達慢(màn)病毒包裝服務
時間:2016-05-11     作者:懋康生(shēng)物(wù)    

★  服務描述
cDNA過表達慢(màn)病毒包裝是根據客戶提供的目的基因信息,将其構建至所需的慢(màn)病毒過表達載體中,與其餘的慢(màn)病毒包裝輔助質粒共同轉染HEK293T細胞包裝獲得過表達目的基因的慢(màn)病毒顆粒。


★  服務内容
1:根據客戶提供的基因信息設計引物(wù);
2:根據客戶需求選擇合适的慢(màn)病毒載體,并擴增目的基因構建慢(màn)病毒過表達質粒;
3:将測序正确的慢(màn)病毒過表達質粒與其餘輔助質粒共同轉染HEK293T細胞包裝病毒并檢測病毒滴度;
4:用包裝好的病毒侵染靶細胞,建立穩定轉染細胞系;
5:從(cóng)RNA水(shuǐ)平(Real-time PCR)和/或蛋白(bái)水(shuǐ)平(Western Blot)驗證過表達效果;


★ 

服務說明
1:客戶需提供詳細的目的基因信息(完整的cDNA序列或NCBI登錄号)及實驗要求;
2:目的基因來源可以是客戶構建好的慢(màn)病毒過表達質粒,也可以提供模闆或由我們基因調取來構建;如果調取失敗,我們會(huì)盡快與您溝通(tōng)協商購買或全基因合成;
3:我們提供多(duō)個(gè)慢(màn)病毒過表達載體供客戶選擇(見(jiàn)下(xià)方載體信息);
4:對于過表達效果的驗證,客戶可以選擇隻從(cóng)RNA水(shuǐ)平(或蛋白(bái)水(shuǐ)平)進行驗證,也可選擇兩個(gè)水(shuǐ)平都進行驗證;
5:靶細胞和Western Blot 實驗需要的一(yī)抗由客戶提供,也可委托我公司代購;
6:Real-time PCR采用Sybr green 法 三複孔進行過表達效果驗證,确保實驗結果真實可信;


★  客戶所得
1:構建好的慢(màn)病毒過表達質粒(過表達慢(màn)病毒顆粒及穩轉株細胞);
2:完整的實驗報(bào)告(包括實驗材料,實驗步驟,實驗結果等)及慢(màn)病毒使用操作說明書一(yī)份;


★  服務周期
根據具體服務協商确定;


★  載體信息

載體編号

攜帶标記

載體骨架主要元件(jiàn)

熒光(guāng)

真核抗性

pHY-LV-OE1.1

CMV-MCS

pHY-LV-OE1.2

GFP

CMV-MCS-IRES-GFP

pHY-LV-OE1.3

RFP

CMV-MCS-IRES-RFP

pHY-LV-OE1.4

GFP

CMV-MCS-GFP

pHY-LV-OE1.5

RFP

CMV-MCS-RFP

pHY-LV-OE1.6

Puromycin

CMV-MCS-PGK- Puromycin

pHY-LV-OE2.1

GFP

EF1α-MCS-IRES-GFP

pHY-LV-OE2.2

Puromycin

EF1α-MCS-IRES- Puromycin

pHY-LV-OE5.1

GFP

Puromycin

CMV-MCS-GFP -PGK- Puromycin

pHY-LV-OE5.2

RFP

Puromycin

CMV-MCS-RFP-PGK- Puromycin

pHY-LV-OE5.3

RFP

Puromycin

CMV-MCS-IRES-GFP-PGK- Puromycin

pHY-LV-OE5.4

GFP

Puromycin

CMV-MCS-2A-GFP-PGK- Puromycin

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