★ 服務描述
一(yī)般情況下(xià)，RNA幹擾實驗是通(tōng)過化學合成小(xiǎo)片段siRNA，或者構建shRNA表達質粒，通(tōng)過轉染試劑介導進入細胞實現RNA幹擾。但是這兩種方式對于難轉染的細胞（例如原代細胞，幹細胞，懸浮細胞等）往往因為(wèi)轉染效率低(dī)而導緻RNA幹擾實驗失敗。而通(tōng)過構建慢(màn)病毒shRNA幹擾質粒并包裝病毒，再用病毒侵染靶細胞能(néng)很好的解決這一(yī)難題。
★ 服務内容
1：shRNA幹擾靶點序列的設計；
2：shRNA 慢(màn)病毒質粒的構建；
3：shRNA慢(màn)病毒包裝與病毒滴度測定；
★ 服務說明
1：我們的RNA幹擾服務針對所有的哺乳動物(wù)細胞，暫不提供植物(wù)和原核生(shēng)物(wù)的RNA幹擾服務；
2：RNA幹擾的對象可以是編碼蛋白(bái)的mRNA序列，也可以是長(cháng)的非編碼RNA(lncRNA)序列；
3：針對不同的靶基因，我們一(yī)般設計3-4條幹擾序列，保證至少有一(yī)條序列幹擾效果大于70%（RNA水(shuǐ)平）。也可由客戶提供幹擾靶點，但我們不保證幹擾效果；
4：我們提供多(duō)個(gè)慢(màn)病毒幹擾載體供客戶選擇（見(jiàn)下(xià)方載體信息）；
5：我公司包裝的shRNA幹擾慢(màn)病毒顆粒滴度可以達到(dào)1×1010TU/ml，完全能(néng)夠滿足動物(wù)實驗；
★ 客戶所得
1：構建好的shRNA質粒及對照(zhào)質粒；
2：合同規定量的慢(màn)病毒顆粒及等量的對照(zhào)病毒顆粒；
3：完整的實驗報(bào)告（包括實驗材料，實驗步驟，實驗結果等）；
★ 服務周期
從(cóng)靶點設計到(dào)病毒包裝完成總共需要25個(gè)工(gōng)作日；
★ 載體信息
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載體編号 |
篩選标記 |
載體骨架主要元件(jiàn) |
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熒光(guāng) |
真核抗性 |
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pHY-LV-KD1.1 |
GFP |
無 |
U6-shRNA-CMV-GFP |
|
pHY-LV-KD1.2 |
RFP |
無 |
U6-shRNA-CMV-RFP |
|
pHY-LV-KD1.4 |
無 |
Puromycin |
U6-shRNA-CMV-Puromycin |
|
pHY-LV-KD2.1 |
GFP |
無 |
U6-shRNA-EF1α-GFP |
|
pHY-LV-KD3.1 |
GFP |
無 |
U6-shRNA-UBC-GFP |
|
pHY-LV-KD5.1 |
GFP |
Puromycin |
U6-shRNA-CMV-GFP-PGK- Puromycin |
|
pHY-LV-KD5.2 |
RFP |
Puromycin |
U6-shRNA-CMV-RFP-PGK- Puromycin |
|
pHY-LV-KD5.4 |
GFP |
Puromycin |
U6-shRNA-UBC-GFP-PGK- Puromycin |
