搜索關鍵詞：細胞膜熒光(guāng)探針，紅(hóng)色細胞膜探針DiI，綠色細胞膜探針DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神經示蹤，Life C7000，活細胞體内外示蹤，CAS：180854-97-1

CM-DiI基本描述：

CM-DiI（活細胞的多(duō)代示蹤、固定細胞長(cháng)期示蹤）

CellTracker CM-DiI為(wèi)DiI的衍生(shēng)物(wù)，在DiI中加入了具有中度巯基反應特性的氯甲基取代物(wù)，後者能(néng)與細胞内含巯基的肽和蛋白(bái)結合，使得CM-DiI能(néng)夠抵抗醛類的固定作用。CM-DiI在細胞固定、破膜及石蠟包埋的整個(gè)過程中均能(néng)很好的保留在細胞内，因此，與傳統細胞膜探針DiI相(xiàng)比較，更适于固定後标本的長(cháng)期示蹤。其紅(hóng)色/綠色的光(guāng)譜特征，使其可與綠色探針或者綠色熒光(guāng)蛋白(bái)如GFP一(yī)起用于雙标實驗。

CellTracker CM-DiI具以下(xià)特征：

a）使用方便，隻需吸掉培養液，加入探針，30min孵育，顯微成像；

b）熒光(guāng)信号至少可持續72h以上(shàng)（一(yī)般3-6代），染料隻傳到(dào)子代細胞，不會(huì)染上(shàng)鄰近細胞。

c）毒性很低(dī)，不會(huì)影響細胞增殖和活力。

總而言之，CellTracker CM-DiI具有良好的示蹤特征，對細胞無毒，穩定長(cháng)效，染料很好保留在細胞内，生(shēng)理pH熒光(guāng)信号強。

研究證實，CM-DiI标記後熒光(guāng)在胞内表達穩定，陽性标記率達98%以上(shàng)，标記細胞形态良好，能(néng)有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況；或将标記的細胞注入體内，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。

CM-DiI（改良探針）與DiI（傳統探針）在透化和非透化處理樣本的效果比較：【來自(zì)文獻Staffend NA, et al. DiOlistic labeling of neurons in tissue slices: a qualitative and quantitative analysis of methodological variations.Front Neuroanat. 2011 Mar 1;5:14.】

1、未透化組織DiI&CM-DiI标記完整性的比較

結果顯示【見(jiàn)圖1&圖2】：兩種熒光(guāng)探針（DiI和CM-DiI）标記組織的全細胞檢測顯示，不管是即刻觀察，還(hái)是2周後觀察，染料完整性和圖片質量都保持完整。對于樹突狀片段的結果染色結果一(yī)緻。另外，通(tōng)過分析樹突段的突棘密度來調查不同時間周期下(xià)染色穩定性和完整性。對于DiI标記的樹突段，不會(huì)時間段染色幾乎無差異。然而，CM-DiI标記的樹突段，突棘密度封片2周後明顯增強。

圖1（左）. 非透化熒光(guāng)染色組織的全細胞檢測。A）DiI标記組織封片後馬上(shàng)檢測；B）DiI标記組織封片2周後熒光(guāng)檢測；C）CM-DiI标記組織封片後馬上(shàng)檢測；D）CM-DiI标記組織封片2周後熒光(guāng)檢測；

圖2（右）. 非透化熒光(guāng)染色組織的樹突片段檢測。A）DiI标記組織封片後馬上(shàng)檢測；B）DiI标記組織封片2周後熒光(guāng)檢測；C）CM-DiI标記組織封片後馬上(shàng)檢測；D）CM-DiI标記組織封片2周後熒光(guāng)檢測；

2、透化組織DiI&CM-DiI标記完整性的比較

結果顯示【見(jiàn)圖3&圖4】：兩種熒光(guāng)探針（DiI和CM-DiI）标記組織封片後即刻檢測，不論是全細胞還(hái)是樹突段，結果都無明顯差異；兩種熒光(guāng)探針（DiI和CM-DiI）标記組織封片2周後檢測，不論是全細胞還(hái)是樹突段，CM-DiI标記的穩定性在熒光(guāng)信号、光(guāng)淬滅和最終圖片質量上(shàng)都強于DiI。

不管是即刻觀察，還(hái)是2周後觀察，染料完整性和圖片質量都保持完整。對于樹突狀片段的結果染色結果一(yī)緻。另外，通(tōng)過分析樹突段的突棘密度來調查不同時間周期下(xià)染色穩定性和完整性。對于DiI标記的樹突段，不會(huì)時間段染色幾乎無差異。然而，CM-DiI标記的樹突段，突棘密度封片2周後明顯增強。

圖3（左）. 透化熒光(guāng)染色組織的全細胞檢測。A）DiI标記組織封片後馬上(shàng)檢測；B）DiI标記組織封片2周後熒光(guāng)檢測；C）CM-DiI标記組織封片後馬上(shàng)檢測；D）CM-DiI标記組織封片2周後熒光(guāng)檢測；

圖4（右）. 透化熒光(guāng)染色組織的樹突片段檢測。A）DiI标記組織封片後馬上(shàng)檢測；B）DiI标記組織封片2周後熒光(guāng)檢測；C）CM-DiI标記組織封片後馬上(shàng)檢測；D）CM-DiI标記組織封片2周後熒光(guāng)檢測；

溫馨提示：對于不經透化處理的樣本，隻需用傳統的細胞膜熒光(guāng)探針如DiI染色即可。對于後續需透化處理的樣本，推薦用改良探針如CM-DiI（貨号：MX4007-50UG）進行染色。

CM-DiI基本特性：

1）CAS NO：180854-97-1

2）化學名：3H-Indolium, 5-[[[4-(chloromethyl)benzoyl]amino]methyl]-2-[3-(1,3-dihydro-3,3-dimethyl-1- octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl]-3,3-dimethyl-1-octadecyl-, chloride

3）分子式：C68H105Cl2N3O

4）分子量：1051.5g/mol

5）  純度：≥95%

6）  外觀：紅(hóng)色固體

7）  Ex/Em：553/570 nm（甲醇）

8）  推薦濾光(guāng)器(qì)：Omega-XF32, Chroma-31002

9）  溶解性：溶于DMSO，乙醇，DMF

10）化學結構圖：    

細胞膜探針光(guāng)譜和檢測濾片：

産品訂購信息：【現貨提供】

應用文獻：

1.  Hemmrich Ket al,Applicability of the dyes CFSE, CM-DiI and PKH26 for tracking of human preadipocytes to evaluate adipose tissue engineering.Cells Tissues Organs. 2006; 184(3-4):117-27.

2.  Andrade W, et al, The use of the lipophilic fluorochrome CM-DiI for tracking the migration of lymphocytes.J Immunol Methods. 1996 Aug 14;194(2):181-9.

3.  Schatteman GC, et al,Blood-derived angioblasts accelerate blood-flow restoration in diabetic mice.J Clin Invest. 2000 Aug; 106(4):571-8.

4.  Foley-Comer AJ, et al, Evidence for incorporation of free-floating mesothelial cells as a mechanism of serosal healing.J Cell Sci. 2002 Apr 1;115(Pt 7):1383-9.

5.  Djouad F, et al,Immunosuppressive effect of mesenchymal stem cells favors tumor growth in allogeneic animals.Blood. 2003 Nov 15;102(10):3837-44. Epub 2003 Jul 24.

6.  Hosie KA, et al,Chronic excitotoxin-induced axon degeneration in a compartmented neuronal culture model.ASN Neuro. 2012 Feb 23;4(1). pii: e00076. doi: 10.1042/AN20110031.

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