關鍵詞：淋巴細胞活化（Lymphocyte Activation），胞内細胞因子表達，流式分析FACS，PKC激活劑PMA，鈣離子載體，蛋白(bái)轉運阻斷劑，CAS：20350-15-6
基本描述：
細胞因子（Cytokines）表達水(shuǐ)平高(gāo)低(dī)直接反映細胞在特異性刺激劑（物(wù)）下(xià)的應答活動，免疫學研究通(tōng)常使用适當的刺激劑來激活細胞應答，并通(tōng)過某些藥物(wù)如莫能(néng)黴素（monensin）或布雷非德菌素A（Brefeldin A，BFA）作用以阻斷胞内高(gāo)爾基體介導的蛋白(bái)轉運，促使細胞因子累積，提高(gāo)細胞因子的胞内信号，從(cóng)而能(néng)借助流式分選技(jì)術(shù)（FACS）檢測細胞因子的表達水(shuǐ)平。細胞因子表達具有自(zì)身的特征性。
常見(jiàn)的蛋白(bái)轉運抑制劑：
1、 Monensin莫能(néng)黴素，CAS：22373-78-0
簡單描述：天然離子載體(ionophore)，選擇性結合單價陽離子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+，并将這些陽離子轉運到(dào)細胞膜内。可破壞高(gāo)爾基體，抑制細胞内的蛋白(bái)轉運，常用作蛋白(bái)轉運抑制劑，用于抑制細胞因子等分泌型蛋白(bái)的分泌，使其保留在細胞内。
2、 Brefeldin A（BFA，布雷非德菌素A），CAS：20350-15-6
簡單描述：一(yī)種常用的蛋白(bái)轉運抑制劑，特異性地可逆地阻斷蛋白(bái)質從(cóng)内質網（ER）轉運到(dào)高(gāo)爾基體（Golgi）。經BFA處理，高(gāo)爾基體很快被破壞并融合到(dào)内質網上(shàng)，該過程呈現能(néng)量、溫度和微管依賴性。BFA是一(yī)種真菌代謝物(wù)，最初曾用作抗病毒試劑，現主要用于研究蛋白(bái)轉運。BFA也常被用于抑制細胞因子等蛋白(bái)的分泌，并用于增強分泌蛋白(bái)的免疫染色檢測。BFA可激活神經鞘磷脂循環（sphingomyelin cycle），還(hái)可誘導一(yī)些腫瘤細胞發生(shēng)凋亡。
一(yī)些應用實例：
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細胞因子 |
克隆号 |
靶向細胞 |
刺激物(wù) |
刺激時間 |
蛋白(bái)轉運抑制劑 |
表面标志(zhì)蛋白(bái) |
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IL-2 |
JES6-5H4 |
Splenocytes |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD3 |
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IL-3 |
MP2-8F8 |
Purified CD4+ T cells stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) + IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 + IL-4 for 3-4 days |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD4 |
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GM-CSF |
MP1-22E9 |
Splenocytes stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 3-4 day |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD3 |
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IFN-γ |
XMG1.2 |
Splenocytes |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD3 |
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貨号 |
産品名稱 |
規格 |
價格（元） |
貨期 |
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MZ2101-1ML |
1ml |
165 |
現貨 |
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MZ2102-100MG |
Monensin, Sodium Salt 莫能(néng)黴素（鈉鹽） |
100mg |
460 |
現貨 |
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200μl |
245 |
現貨 |
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MZ2103-1000UL |
Brefeldin A (BFA, 5mg/ml) 布雷非德菌素A |
1ml |
980 |
現貨 |
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5mg |
880 |
現貨 |
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MZ2104-25MG |
Brefeldin A (BFA, Powder) 布雷非德菌素A（粉末） |
25mg |
3080 |
3-4周 |
相(xiàng)關産品：
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MZ2151-1MG |
1mg |
535 |
現貨 |
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MZ2151-5MG |
Ionomycin, Free Base 離子黴素（遊離酸） |
5mg |
1720 |
3-4周 |
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MZ2152-1MG |
1mg |
535 |
現貨 |
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MZ2152-5MG |
Ionomycin, Calcium Salt 離子黴素（鈣鹽） |
5mg |
1720 |
3-4周 |
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MZ2401-100UL |
100μl |
280 |
現貨 |
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MZ2401-200UL |
PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸 |
200μl |
510 |
現貨 |
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MZ2402-5MG |
5mg |
1780 |
現貨 |
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MZ2402-25MG |
PMA (TPA, Powder) 佛波肉荳蔻醋酸（粉末） |
25mg |
7150 |
3-4周 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
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