MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝膠染料（效果同GelRed）
MKRed核酸染料特點
●無毒性：MKRed獨特的油性和大分子量特點使其不能(néng)穿透細胞膜進入細胞内，艾姆斯氏試驗結果也表明，該染料的誘變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小(xiǎo)于EB。
●靈敏度高(gāo)：适用于各種大小(xiǎo)片段的電(diàn)泳染色，對核酸遷移的影響小(xiǎo)于SYBR Green I。
●穩定性高(gāo)：适用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠；室溫下(xià)在酸或堿緩沖液中極其穩定，耐光(guāng)性強。
●信噪比高(gāo)：樣品熒光(guāng)信号強，背景信号低(dī)。
●操作簡單：與EB一(yī)樣，在預制膠和電(diàn)泳過程中染料不降解；而電(diàn)泳後染色過程也隻需30分鍾且無需脫色或沖洗，即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
●适用範圍廣：可選擇電(diàn)泳前染色（膠染法）或電(diàn)泳後染色（泡染法）；适用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電(diàn)泳；可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色。
●與EB有相(xiàng)同的光(guāng)譜特性，無需改變濾光(guāng)片及觀察裝置：标準的EB濾光(guāng)片或SYBR濾光(guāng)片都适用，使用與觀察EB相(xiàng)同的普通(tōng)紫外凝膠透射儀觀察即可，在300nm紫外光(guāng)附近可得到(dào)最佳激發。但是MKRed不能(néng)被488 nm氩離子激光(guāng)器(qì)或相(xiàng)似波長(cháng)的可見(jiàn)光(guāng)完全激發，因此不推薦使用此類激發裝置的成像系統。對于此類裝置，我們推薦您使用MKGreen（Cat# 011或012），它和SYBR Green I的光(guāng)譜相(xiàng)似，靈敏度相(xiàng)當，但更加穩定。
MKRed使用方法簡介
1．膠染法（用法同EB）（推薦方法）
（1）制膠時加入MKRed核酸染料（例如：每50mL瓊脂糖溶液中加入5μL MKRed 10,000×MKRed以此比例類推）。
（2）按照(zhào)常規方法進行電(diàn)泳。
注意事(shì)項：
♦ 此方法染色染料用量相(xiàng)對較少。500 μL染料大約可以做100塊50mL的膠。
♦ 由于MKRed具有良好的熱穩定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。也可以選擇将MKRed儲液加到(dào)MKRed和電(diàn)泳緩沖液中，然後用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。MKRed兼容所有常用的電(diàn)泳緩沖溶液。
♦ 如果總是看(kàn)到(dào)條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以确認問題是否與染料有關。如果染色後問題依舊(jiù)存在，則說明問題與染料無關，請嘗試：降低(dī)瓊脂糖濃度；選用更長(cháng)的凝膠；延長(cháng)凝膠時間以保證邊緣清晰；改進上(shàng)樣技(jì)巧或選擇泡染法染色。
♦ 此方法不适合預制聚丙烯酰胺凝膠，對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
2．泡染法
（1）按照(zhào)常規方法進行電(diàn)泳。
（2）用H2O将MKRed10,000×儲液稀釋約3,300倍到(dào)0.1M NaCl中，制成3×染色液。（例如将15μL MKRed10,000×MKRed 1M NaCl加到(dào)45mL H2O中）。
（3）将凝膠小(xiǎo)心地放(fàng)入合适的容器(qì)中，如聚丙烯容器(qì)中。緩慢(màn)加入足量的3×染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右，最佳染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5～10％丙烯酰胺的凝膠，染色時間通(tōng)常介于30min到(dào)1h，并随丙烯酰胺含量增加而延長(cháng)。
注意事(shì)項：
♦ 用泡染法染色時，染料用量較多(duō)。單次使用的染色液可重複使用3次左右。
♦ 3× MKRed染色液可以大量制備，在室溫下(xià)避光(guāng)保存直至用完。
幾種核酸染料比較
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名稱 |
靈敏度 |
穩定性 |
對DNA 遷移的影響 |
安全性 |
适用性 |
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MKRed |
高(gāo) |
高(gāo) |
條帶不彎曲，DNA片段不遷移 |
· 是一(yī)種獨特的油性大分子，不易揮發升華，不易吸入人體，不能(néng)穿透細胞膜進入活體細胞内，安全無毒。 · 艾姆斯氏測試結果表明，MKRed在凝膠染色濃度下(xià)完全沒有誘變性，因此完全沒有緻癌毒性。 |
通(tōng)用大小(xiǎo)片段電(diàn)泳染色，與EB有相(xiàng)同的光(guāng)譜特性，無需改變濾光(guāng)片及觀察裝置。标準的EB濾光(guāng)片或SYBR濾光(guāng)片都适用，使用普通(tōng)紫外凝膠透射儀觀察即可，在300nm紫外光(guāng)附近可得到(dào)最佳激發。 |
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MKGreen |
高(gāo) |
高(gāo) |
條帶不彎曲，DNA片段不遷移 |
① 是一(yī)種獨特的油性大分子，不易揮發升華，不易吸入人體，不能(néng)穿透細胞膜進入活體細胞内，安全無毒。 |
通(tōng)用大小(xiǎo)片段電(diàn)泳染色，适用于使用254nm激發的紫外凝膠透射儀或可見(jiàn)光(guāng)凝膠透射儀觀察。 |
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SYBR Green I |
高(gāo) |
低(dī) |
染料濃度較高(gāo)時，條帶容易彎曲，DNA片段遷移的現象明顯 |
屬花箐染料，能(néng)透過細胞膜進入活體細胞内，但容易生(shēng)物(wù)降解，不會(huì)在體内殘留，安全無毒。 |
100bp以上(shàng)電(diàn)泳染色，适用于使用254nm激發的紫外凝膠透射儀或可見(jiàn)光(guāng)凝膠透射儀觀察。 |
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EB |
低(dī) |
高(gāo) |
條帶不彎曲，DNA片段不遷移 |
① 分子量小(xiǎo)，易揮發升華，易吸入人體，不易生(shēng)物(wù)降解，在體内長(cháng)期殘留。 |
100bp以上(shàng)電(diàn)泳染色，背景熒光(guāng)信号高(gāo)；使用普通(tōng)紫外凝膠透射儀觀察。 |
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Goldview |
低(dī) |
高(gāo) |
條帶不彎曲，DNA片段不遷移 |
① 主要成分為(wèi)吖啶橙，是一(yī)種煤焦油提取物(wù)，具有高(gāo)毒，緻癌，高(gāo)誘變性。 |
100bp以上(shàng)電(diàn)泳染色，背景熒光(guāng)信号高(gāo)；适用于使用254nm激發的紫外凝膠透射儀或可見(jiàn)光(guāng)凝膠透射儀觀察。 |
特别提醒：
♦ 如果您使用的是紫外成像儀，請選擇MKRed；如果您使用激光(guāng)成像儀或希望在可見(jiàn)光(guāng)下(xià)觀測，請選擇MKGreen。
♦ 在極少數情況下(xià)，質粒經某些酶切後的DNA樣品會(huì)出現拖尾和分辨率降低(dī)，此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合适。
訂購信息：
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品名 |
産地 |
貨号 |
規格 |
單價 |
備注 |
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MKRed（10,000×水(shuǐ)溶液） |
MKbio |
MF0754-500UL |
500ul |
460 |
現貨 |
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