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PEI 25K Transfection Reagent 線性化聚乙烯亞胺轉染試劑
目錄号 MX2204-10ML 售價 880.00元
規格 10ml 運輸溫度 冰袋運輸
其他名稱 保存溫度 -20℃保存
CAS号 9002-98-6 有效期 1年(nián)
應用 轉染 訂購數量
産品簡介:

PEI 25K Transfection Reagent

線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

搜索關鍵詞:

PEI25K;PEI 25000;PEI 40K;線性化聚乙烯亞胺PEI;PEI轉染試劑;PEI 25000;CAS:9002-98-6, 26913-06-4;Polysciences;

産品信息

産品名稱

産品編号

規格

價格(元)

PEI 25K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

MX2204-1ML

1ml

280

PEI 25K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

MX2204-10ML

10ml

880

PEI 25K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

MX2204-50ML

50ml

1680

【溫馨提示】:見(jiàn)我司整理的線性化聚乙烯亞胺PEI 25000/ PEI40000轉染試劑專題。

産品描述

線性化聚乙烯亞胺PEI 25,000,一(yī)種高(gāo)電(diàn)荷陽離子聚合物(wù),非常容易結合于高(gāo)電(diàn)荷陰離子基質。工(gōng)業(yè)應用上(shàng),線性化PEI可改善負電(diàn)荷染料的物(wù)理外觀,以調整染料的化學特性和增強染料與固相(xiàng)基質的黏附能(néng)力,常用作黏附增強劑,作用同多(duō)聚賴氨酸(poly-lysine);科研應用上(shàng),線性化PEI能(néng)與DNA或其他負電(diàn)荷生(shēng)物(wù)大分子簡單結合,正是這一(yī)特性,使得成為(wèi)一(yī)種非常行之有效的載體運輸介質(Vector carrier),即轉染試劑。

線性化聚乙烯亞胺PEI 25000(Polyethylenimine Linear, MW 25000)是一(yī)款優秀、低(dī)成本、值得信賴的瞬時性轉染試劑。在HEK293和CHO表達系統中,PEI在寬廣的生(shēng)産規模内(從(cóng)96孔闆到(dào)100L生(shēng)物(wù)反應器(qì))能(néng)提供連續性的高(gāo)基因表達。

本品是PEI25K的無菌溶液,濃度為(wèi)1mg/ml,直接使用即可。按照(zhào)DNA:PEI25K=1:3的比例來操作,1ml本品足以用來轉染330μg DNA,或者,6孔闆内約做80-160次轉染。

保存與運輸方法

保存:-20℃保存,1年(nián)有效。

運輸:冰袋運輸。

注意事(shì)項

1)收到(dào)本品或第一(yī)次使用,請根據單次用量分裝後置于-20℃凍存,盡量降低(dī)反複凍融次數。

2)本品為(wèi)無菌溶液,請操作過程中執行無菌操作。

3)請務必使用高(gāo)質量的無内毒素質粒。通(tōng)過260 nm光(guāng)吸收測定DNA濃度,260nm / 280nm比值确定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的範圍之内)。如有可能(néng),請通(tōng)過瓊脂糖凝膠電(diàn)泳檢測質粒的完整性。

4)使用适當保存和經常傳代的健康細胞。确保培養基沒有被細菌、真菌或支原體污染。如果細胞是近期複蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。

5)對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪闆可顯著提高(gāo)重組蛋白(bái)的表達水(shuǐ)平。如果選擇轉染前兩天鋪闆,可适當降低(dī)鋪闆密度,以确保轉染時細胞的彙合度仍為(wèi)60-80%。

6)對于接觸抑制敏感的細胞,可适當降低(dī)鋪闆密度。

7)推薦用商業(yè)化的無血清培養基比如Opti-MEM I來稀釋DNA和PEI25K,制備轉染複合物(wù)。

8)轉染過程請不要使用抗生(shēng)素。

9)為(wèi)了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

一(yī)、操作方法(貼壁細胞)

1.1鋪闆

a)轉染前18-24h進行鋪闆,調整合适的細胞密度(參考表1),使其在轉染時細胞密度達60-80%。

【注意】:高(gāo)血清水(shuǐ)平會(huì)抑制轉染效率,大多(duō)數情況,低(dī)血清水(shuǐ)平(≤5%)能(néng)産生(shēng)最高(gāo)的轉染效率。

1.2轉染步驟(以6孔闆的單孔為(wèi)例)

a)轉染前1-2h,每孔替換為(wèi)3ml含2%血清的新鮮生(shēng)長(cháng)培養基。

b)制備PEI25K-DNA轉染複合物(wù)(嚴格按照(zhào)以下(xià)步驟進行):①往300μl無血清培養基(比如:Opti-MEM I)加入2μg質粒DNA,低(dī)速混合/渦旋均勻;②往混合物(wù)内加入6μl PEI25K(1mg/ml)(DNA/PEI25K=1:3),低(dī)速渦旋5s;③無菌環境,室溫靜(jìng)置30min以形成PEI25K-DNA轉染複合物(wù)。④用移液槍上(shàng)下(xià)吹打3次,輕輕混勻。

c)将PEI25K-DNA轉染複合物(wù)轉到(dào)孔内。輕輕晃動培養皿或輕微渦旋,使得複合物(wù)分散均勻。

【注意】:以上(shàng)步驟可通(tōng)過調整PEI25K-DNA複合物(wù)在無血清培養基内的體積(為(wèi)培養總體積的10%)來進行放(fàng)大或縮小(xiǎo)(可參考表2)。

1.3 孵育

a)37℃,5% CO2培養箱内培養細胞,轉染後12-18h,去除含PEI25K-DNA複合物(wù)的培養液,更換新鮮的生(shēng)長(cháng)培養基。

b)通(tōng)常,轉染後36-48h能(néng)檢測到(dào)重組蛋白(bái)表達。一(yī)般在轉染後72-96h能(néng)觀察到(dào)最大水(shuǐ)平的表達。

 

PEI25K客戶使用案例(逐步增加中)

 

圖片描述:以人結腸癌細胞(HCT116)為(wèi)對象,按照(zhào)質粒DNA:PEI 2,5000(MX2202-250MG)=1:4的比例制備轉染混合物(wù)并轉染進入HCT116細胞,36h後于熒光(guāng)顯微鏡下(xià)觀察轉染效率(GFP,綠色熒光(guāng)蛋白(bái))。

【數據來源:廈門(mén)大學 于老師(shī)】

相(xiàng)關産品

貨号

名稱

規格

MX2202-250MG

Polyethylenimine Linear, MW 25000線性化聚乙烯亞胺PEI 25000

250mg

MX2203-250MG

Polyethylenimine Linear, MW 40000 (PEI 40K)線性化聚乙烯亞胺PEI 40000

250mg

MX2204-1ML

PEI 25K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

1ml

MX2205-1ML

PEI 40K Transfection Reagent線性化聚乙烯亞胺轉染試劑

1ml

MX2211-0.15ML

Lipo2000 Transfection Reagent Lipo2000脂質體轉染試劑

0.15ml

MX2216-0.5KIT

CPFect siRNA/miRNA Transfection Kit CPFect小(xiǎo)分子RNA轉染試劑盒

0.5kit

 

 

  — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸集奇生(shēng)物(wù)/MKBio懋康所有】

 

 

      上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作,主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本,以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。

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