Tartrate Resistant Acid Phosphatase Stain Kit

抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒

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産品信息

産品描述

酸性磷酸酶（Acid Phosphatase，ACP），是一(yī)類磷酸酯酶，在酸性條件(jiàn)下(xià)可以催化磷酸酯鍵的水(shuǐ)解。酸性磷酸酶是一(yī)個(gè)蛋白(bái)家族，哺乳動物(wù)中分子量從(cóng)18kD到(dào)100kD不等。ACP主要分為(wèi)兩類，一(yī)類為(wèi)抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate resistant acid phosphatase，TRAP），一(yī)類為(wèi)抗氟酸性磷酸酶（Fluoride resistant acid phosphatase，FRAR）。 

TRAP是一(yī)種糖基化的含金屬蛋白(bái)酶，在破骨細胞（Osteoclast）和破軟骨細胞（Chondroclast）中高(gāo)表達，在活化的巨噬細胞和神經元中也有表達。存在于正常人肺泡巨噬細胞和白(bái)血病人脾髒的TRAP均在細胞濾泡中，并非釋放(fàng)到(dào)血液中。血液中TRAP絕大部分來源于破骨細胞，因此，測量血液中TRAP可以了解破骨細胞的功能(néng)狀态。TRAP在細胞信号轉導、細胞增殖和分化等方面起重要作用，也和活性氧産生(shēng)和鐵離子轉運等有關。 

本抗酒石酸酸性磷酸酶染色試劑盒（Tartrate Resistant Acid Phosphatase Stain Kit, TRAP Stain Kit）以萘酚AS-BI為(wèi)底物(wù)，酸性pH下(xià)被ACP水(shuǐ)解生(shēng)成磷酸和萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯生(shēng)成有色産物(wù)，定位于細胞胞漿中。若細胞内ACP含抗酒石酸活性，則呈陽性反應。本品可用于新鮮血塗片、細胞塗片和冰凍切片染色。

産品組成

保存與運輸方法

保存：-20℃~RT保存，-20℃~RT保存，各組分保存詳見(jiàn)标簽，6個(gè)月(yuè)穩定。開(kāi)封後3個(gè)月(yuè)内使用。

運輸：冰袋運輸。

注意事(shì)項

1） TRAP染色液易失效，請務必現配現用。

3） 樣本需新鮮，取材後請立即處理，否則會(huì)影響酶活性。

4） 對于冰凍切片染色，應盡量減少切片在室溫暴露的時間。

5） 對于血液塗片，推薦皮膚穿刺血塗片，晾幹後及時染色

6） 本品不建議用于石蠟切片染色。

7） 組織固定需在4℃冰箱進行，時間不要超過24h，否則酶活性會(huì)減弱或消失。

8） 為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

操作步驟 

實驗前準備材料：蒸餾水(shuǐ)，恒溫箱，載玻片，光(guāng)學顯微鏡 

一(yī)、 血液、細胞塗片

1.1 推片：取新鮮血液或骨髓塗片置于載玻片上(shàng)，推玻片與載玻片保持30°，置于血液或細胞滴液的正前方，稍往後移與血液或細胞滴液接觸使後者沿推片下(xià)緣散開(kāi)，再勻速沿載玻片平面平穩向前方滑動置鋪滿血膜為(wèi)止。

1.2 自(zì)然晾幹，TRAP固定液4℃固定30s~3min，多(duō)數情況1min内即可。

1.3 水(shuǐ)洗、稍微晾幹（不易過分幹燥）。

1.4 切片入現配的TRAP染色液，置于37℃溫箱，避光(guāng)浸染45~60min，水(shuǐ)洗。

1.5 複染：用蘇木(mù)素染色液複染3~5min。

1.6 水(shuǐ)洗、晾幹、鏡檢。

二、 冰凍切片染色 

2.1 冰凍切片回溫至37℃，水(shuǐ)中浸泡1~2min。

2.2 自(zì)然晾幹，TRAP固定液4℃固定1~3min

2.3 水(shuǐ)洗、稍微晾幹（不易過分幹燥）。

2.4 切片入現配的TRAP染色液，置于37℃溫箱，避光(guāng)浸染45~60min，水(shuǐ)洗。

2.5 複染：用蘇木(mù)素染色液複染5~8min。

2.6 水(shuǐ)洗、晾幹、鏡檢。

三、 染色結果

相(xiàng)關産品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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