Tetramethylrhodamine Ethyl Ester (TMRE)

四甲基羅丹明乙酯

（線粒體膜電(diàn)位熒光(guāng)探針）

産品關鍵詞：

TMRE 四甲基羅丹明乙酯；4-Di-2-ASP；DASPEI；Styryl dye 苯乙烯染料；MitoTracker® Green FM；CAS NO：115532-52-0；

産品信息

【溫馨提示】：見(jiàn)我司懋康生(shēng)物(wù)（maokangbio）提供的線粒體熒光(guāng)探針産品專題。

産品描述

帶正電(diàn)荷的羅丹明染料（比如羅丹明酯）選擇性定位在線粒體，因此，普遍用來标記活細胞線粒體。除了選擇性标記線粒體外，與JC-1一(yī)樣，四甲基羅丹明乙酯（Tetramethylrhodamine Ethyl Ester,TMRE）廣泛用來測定線粒體膜電(diàn)位。TMRE在細胞膜不會(huì)形成聚集物(wù)，與膜蛋白(bái)的相(xiàng)互作用非常小(xiǎo)。因此，該染料的跨膜分布與膜電(diàn)位直接相(xiàng)關。TMRE的光(guāng)譜特性類似于TRITC，使用起來相(xiàng)當方便。

産品特性

1） CAS NO.：115532-52-0

2） 化學名：3,6-bis(dimethylamino)-9-[2-(ethoxycarbonyl)phenyl]-xanthylium, perchlorate

3） 同義名：Tetramethylrhodamine ethyl ester perchlorate 四甲基羅丹明乙酯高(gāo)氯酸鹽；TMR ethyl ester TMR乙酯；

4） 分子式：C26H27ClN2O7

5） 分子量：514.95

6） Ex/Em：549/574nm

7） 純度：≥95%

8） 溶解性：溶于DMSO

9） 化學結構式： 

保存與運輸方法

保存：-20℃避光(guāng)幹燥保存，至少一(yī)年(nián)有效。 

運輸：室溫運輸。

注意事(shì)項

1） TMRE适合活細胞染色，但不适合固定細胞染色。

2） 熒光(guāng)染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光(guāng)，以減緩熒光(guāng)淬滅。

3） 為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

操作步驟

1.儲存液制備

1.1将低(dī)溫保存的産品置于室溫回溫至少20min（此步非常重要，請勿忽略操作），低(dī)速離心片刻使粉末沉至管底。

1.2對于25mg粉末，往瓶内加入4.8548ml高(gāo)質量無水(shuǐ)DMSO配制成10mM儲存液；由于TMRE的使用濃度比較低(dī)，可再配制一(yī)個(gè)中間儲存濃度（比如：100μM），比如：取10μl TMRE（10mM）加入990μl DMSO，充分混勻後，即得到(dào)100μM的中間儲存濃度。

2.工(gōng)作液制備

于正式實驗前，用無血清細胞培養基稀釋母液到(dào)适宜的工(gōng)作濃度，比如：100nM。根據不同的實驗用途和細胞類型，TMRE的工(gōng)作濃度範圍一(yī)般在20nM~1000nM，初次使用務必優化獲得最佳工(gōng)作濃度。工(gōng)作液需現配現用。

3.染色步驟（以熒光(guāng)成像為(wèi)例）

注①：對于熒光(guāng)成像分析，常用的TMRE工(gōng)作濃度範圍是50-200nM。

注②：如果需測定某藥物(wù)對膜電(diàn)位的作用，需提前處理細胞，再用探針進行後續檢測。同時需要設置藥物(wù)未處理組和藥物(wù)處理組。

注③：如果需要陽性對照(zhào)，可選擇FCCP（Cat#：MX3259）或CCCP（Cat#：MX3258），這兩種化合物(wù)都是解偶聯劑，能(néng)夠降低(dī)線粒體膜電(diàn)位，從(cóng)而防止TMRE染色。

3.1 培養細胞。

3.2去除培養基，用生(shēng)理緩沖液比如PBS清洗1-2次。

3.3 加入新鮮配好的工(gōng)作液完全覆蓋細胞。

3.4于37℃避光(guāng)孵育15~45min。

3.5【可選】為(wèi)了增高(gāo)靈敏度，用PBS或類似緩沖液清洗細胞1~2次。

3.6 熒光(guāng)顯微鏡或共聚焦顯微鏡進行成像分析。

染色示例（來自(zì)文獻）

TMRE fluorescence decay upon FCCP treatment and the effect on (Ca2+)c.

(A) The representative micrographs showing a decay in TMRE fluorescence in a single cell after 30 s depolarization with 1 µM FCCP. Scale bar 10 µm. (B) Representative traces showing average FCCP-induced Fura-2 fluorescence increase due to release of mitochondrial Ca2+ in n = 15, n = 20, n = 19 cells for C, _2, _3 lines, respectively. (C) Representative traces of average Fura-2 fluorescence showing lack of 6 µM oligomycin effect on (Ca2+)c in 14 cells.

相(xiàng)關産品

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