FITC-Dextran 70 (FD70) FITC标記葡聚糖（70 kDa）

産品标簽

FITC-Dextran FITC标記葡聚糖；FD40； FD70；TRITC-dextran 羅丹明标記葡聚糖；TD40；TD70；microcirculation 微循環研究；Cell permeability 細胞滲透性研究；Microfluorimetry 顯微熒光(guāng)測定法；

産品信息

【變更說明】：FITC-Dextran 70 (FD70)自(zì)2018.6月(yuè)開(kāi)始産品貨号由原來的MS0995變更為(wèi)MS0905。

産品描述

FITC标記葡聚糖（FITC-Dextran）是以天然葡聚糖B512F限制水(shuǐ)解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為(wèi)底物(wù)，經熒光(guāng)素标記所得的合成探針。熒光(guāng)素基團通(tōng)過一(yī)個(gè)穩定的硫代氨甲酰鍵連接到(dào)葡聚糖上(shàng)（見(jiàn)附錄圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征），此标記步驟不會(huì)引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran内每個(gè)葡萄糖單位含0.002~0.008 mol FITC，這一(yī)低(dī)水(shuǐ)平的替換确保葡聚糖最小(xiǎo)的結構變化，這一(yī)特性對滲透性研究來說是最基本需求。

FITC标記葡聚糖（FITC-Dextran）廣泛用于微循環和細胞通(tōng)透性研究，通(tōng)過熒光(guāng)顯微測定法來檢測。還(hái)可用于植物(wù)細胞壁多(duō)孔性和毛細血管通(tōng)透性研究。小(xiǎo)分子量的FITC-Dextran也能(néng)用來測定比如内吞和細胞連接通(tōng)透性的生(shēng)理過程。FITC-Dextran 70 (FD70)可能(néng)用作一(yī)種模式化合物(wù)來開(kāi)發輸送分子到(dào)原生(shēng)質體的方法，或者用來研究水(shuǐ)凝膠和脂質體等結構内的藥物(wù)釋放(fàng)過程。也許還(hái)能(néng)用在微血管和單細胞層通(tōng)透性研究。血漿蛋白(bái)不會(huì)結合FITC-Dextran。

本品是對平均分子量約70kDa葡聚糖進行标記的熒光(guāng)素衍生(shēng)物(wù)，即異硫氰酸熒光(guāng)素葡聚糖70（fluorescein isothiocyanate dextran 70, FITC-dextran, FD70），以凍幹粉形式提供，易溶于水(shuǐ)，最大激發和發射波長(cháng)分别為(wèi)493和518nm。

産品特性

1）   CAS NO：60842-46-8

2）   化學名：Dextran(3´,6´dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9´-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate

, average Mw of approximately 70,000

3）   同義名：Fluorescein isothiocyanate-dextran 70; Fluoresceinyl thiocarbamoyl-dextran 70;

4）   分子量：average Mw 59,000-77,000

5）   置換率：0.002~0.008 mol FITC/glucose unit

6）   外觀：黃色至深橘色粉末

7）   溶解性：易溶于水(shuǐ)或鹽溶液，也溶于DMSO，甲酰胺和某些其他極性有機(jī)溶劑，不溶于更低(dī)的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺（DMF）

8）   光(guāng)譜特性：Ex/Em=493/518nm【由于熒光(guāng)素基團的電(diàn)荷狀态依賴于緩沖液的pH和離子強度，因此熒光(guāng)強度也會(huì)因這些參數的變化而變化。pH＞8觀察到(dào)最大熒光(guāng)強度。生(shēng)理緩沖液能(néng)顯著影響熒光(guāng)強度，或得到(dào)增加或受到(dào)抑制。見(jiàn)附錄圖2. pH 4-9範圍内FITC-Dextran 70的熒光(guāng)變化（Em=520nm）】

保存與運輸方法

保存：室溫避光(guāng)短期保存，2-8℃避光(guāng)長(cháng)期保存，保持密封幹燥，至少3年(nián)穩定。

運輸：室溫運輸。

産品穩定性

綜合各種溶液體系和溫度下(xià)FITC-Dextrans的穩定性測定，總的來說，體内外FITC-Dextrans的穩定性非常優秀。僅當pH＞9和上(shàng)升溫度内熒光(guāng)素可能(néng)存在水(shuǐ)解的風險。兔血漿、肌肉勻漿液、肝髒勻漿液和尿液内的FITC-Dextrans在37℃，至少3天内保持穩定，分子量不會(huì)發生(shēng)變化，且未發現熒光(guāng)素基團的釋放(fàng)。6%三氯乙酸内FITC-Dextrans室溫穩定保存3天。【文獻來源：P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

硫代氨甲酰鍵的水(shuǐ)解産生(shēng)4-或5-氨基熒光(guāng)素，能(néng)立即被HPLC定量檢測到(dào)。未發表的研究數據顯示，将高(gāo)壓處理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃長(cháng)達5個(gè)月(yuè)，發現僅在50℃情況下(xià)可能(néng)觀察到(dào)微量（1%）的自(zì)由氨基熒光(guāng)素含量增加。單獨進行高(gāo)壓處理會(huì)引起2.7%的自(zì)由氨基熒光(guāng)素産生(shēng)。

其他的未發表研究顯示，FITC-Dextran在pH4溶液35℃内能(néng)穩定保存高(gāo)達1年(nián)。而在pH4，80℃内硫代氨甲酰鍵穩定30min，可能(néng)觀察到(dào)葡聚糖的降解。pH9，35℃内存放(fàng)一(yī)個(gè)月(yuè)以上(shàng)會(huì)發生(shēng)一(yī)定量（24%）的熒光(guāng)衰減。

一(yī)些研究證明，FITC-Dextrans在持續性實驗（1-6天）的體内穩定性。【文獻來源：N. Thorball, FITC-dextran tracers in microcirculatory and permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.】

注意事(shì)項

1）  FITC-Dextrans易溶于水(shuǐ)或鹽溶液，可根據實際使用濃度配制适當濃度的母液。

2）  FITC-Dextrans溶液高(gāo)壓滅菌可能(néng)導緻少量氨基熒光(guāng)素的釋放(fàng)，若需要無菌，建議用過濾的方法來除菌。

3）  為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

附錄

圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征

圖2. pH 4-9範圍内FITC-Dextran 70的熒光(guāng)變化（Em=520nm）

 參考文獻

[1]Tang, X., Yan, K., Wang, Y. et al. Activation of PPAR-β/δ Attenuates Brain Injury by Suppressing Inflammation and Apoptosis in a Collagenase-Induced Intracerebral Hemorrhage Mouse Model. Neurochem Res 45, 837–850 (2020). https://doi.org/10.1007/s11064-020-02956-w 

[2]BBB permeability was also evaluated using 70 kDa FITC-dextran. Mice (n = 5/group) were injected with 70 kDa FITC-dextran (MS0905; MKbio, Shanghai, China) in PBS at 50 mg/kg into the tail vein. Animals were perfused with pre-chilled PBS 15 min after the dextran injection. Following perfusion, the brain tissue was removed, homogenized with 20% trichloroacetic acid, and centrifuged at 12,000 rpm for 10 min. The supernatant was isolated, and relative fluorescence was measured at excitation and emission wavelengths of 493 and 520 nm. The results were calculated using FITC-dextran as the standard, and the values are expressed as ng/g brain tissue.

— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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