Leadmium™ Green AM dye 鉛離子（镉離子）綠色熒光(guāng)探針

訂購信息：

以上(shàng)産品均為(wèi)Life（Invitrogen）原裝正品，我司（懋康生(shēng)物(wù)）對A10024進行拆開(kāi)銷售，特惠價為(wèi)900元/支，單支50µg，現貨銷售，歡迎訂購。

【溫馨提示】：見(jiàn)我司整理的金屬離子【鈣，鉀，鈉，鋅，鎂，氯，鉛離子】熒光(guāng)染色探針産品專題。

基本介紹：

Leadmium™ Green AM dye（鉛離子/镉離子綠色熒光(guāng)探針）是Life旗下(xià)品牌Molecular Probe的專利産品，是一(yī)種獨特的工(gōng)具用來高(gāo)度特異性和高(gāo)靈敏度的檢測細胞内鉛離子（lead）和镉（cadmium）水(shuǐ)平。當溶液内鉛離子和镉離子測定的标準實驗建立後，這一(yī)獨特的Leadmium™ Green AM探針能(néng)特别設計用來檢測活細胞内這些有毒的環境污染重金屬。

産品特點

1） 高(gāo)特異性探針（指示劑）用來檢測細胞内鉛和镉水(shuǐ)平；

2） 靈活的檢測方式，适用于流式細胞儀、熒光(guāng)顯微鏡成像和熒光(guāng)酶标闆檢測；

3） 明亮的熒光(guāng)和高(gāo)度鑒别镉離子，能(néng)檢測到(dào)納摩爾（nM）水(shuǐ)平的鉛離子和微摩爾（µM）水(shuǐ)平的镉離子；

4） 檢測方便，隻需用488nm激光(guāng)激發即可；

5） 探針輕易加載進入細胞，進入細胞内經酯酶水(shuǐ)解後能(néng)極好的保存在細胞内。

産品保存

一(yī)旦收到(dào)本品，置于≤-20℃保存。一(yī)旦配制，Leadmium™ Green AM dye溶液（in DMSO）請在一(yī)天内用完。

實驗前試劑準備

1、需要的材料（自(zì)行準備）

生(shēng)理鹽水(shuǐ)（0.85% NaCl）【不能(néng)使用PBS】; DMSO（高(gāo)質量，無水(shuǐ)，如Cat#：MS4601-100mL）

2、 其他試劑（自(zì)行準備）

PbCl2溶液；CdCl2溶液；TPEN（tetrakis-(2-pyridylmethyl)ethylenediamine）；乙醇；

離子黴素鈣鹽（貨号：MZ2152-1MG）；死細胞染料比如碘化丙啶（Cat#：MX4205-10MG）。

3、 試劑準備

3.1 從(cóng)冰箱内取出一(yī)管Leadmium™ Green AM dye（50 µg），讓其回溫到(dào)室溫，避光(guāng)保存。

3.2 往管子内加入50µl 高(gāo)質量無水(shuǐ)的DMSO（Cat#：MS4601-100mL），避光(guāng)混勻，使其充分溶解。

3.3 用生(shēng)理鹽水(shuǐ)按照(zhào)1：10的比例将Leadmium™ Green AM dye的DMSO儲存液稀釋成工(gōng)作液（比如取20µl 儲存液加到(dào)180µl生(shēng)理鹽水(shuǐ)，混勻），所有溶液制備過程一(yī)直避光(guāng)。

3.4 37℃溫育生(shēng)理鹽水(shuǐ)，用于後續多(duō)個(gè)步驟的清洗過程。

3.5 【可選】如果此實驗需要設置相(xiàng)對對照(zhào)（用已經濃度的PbCl2處理細胞），建議PbCl2的起始濃度範圍是1nM-625nM。制備625nM PbCl2【添加250µl 10µM PbCl2到(dào)3.75ml生(shēng)理鹽水(shuǐ)。然後做9次連續性梯度稀釋最終得到(dào)1nM PbCl2】。37℃保存這些溶液直到(dào)需要。每個(gè)濃度需要1ml量。

3.6 【可選】如果此實驗需要設置相(xiàng)對對照(zhào)（用已經濃度的CdCl2處理細胞），建議CdCl2的起始濃度範圍是1µM-250µM。制備250µM CdCl2【添加1ml 1mM CdCl2到(dào)3ml生(shēng)理鹽水(shuǐ)。然後做8次連續性梯度稀釋最終得到(dào)1µM CdCl2】。37℃保存這些溶液直到(dào)需要。每個(gè)濃度需要1ml量。

3.7 【可選】制備10mM TPEN工(gōng)作液，通(tōng)過添加1.2ml無水(shuǐ)乙醇到(dào)5mg TPEN。混勻，室溫保存。

操作流程【流式分析，具體leadmium Green AM dye Manual】

應用實例：

Figure 1. Dual-color scatter plot showing two populations. Jurkat cells were loaded with Leadmium™ Green AM dye and washed. The sample was then incubated in the presence of 1 µM PbCl2 (in saline) and 1 µM ionomycin. After washing the sample, it was incubated in the presence of PI. Dual-color fluorescence was collected using 488 nm excitation and 525/10 nm and 610/10 nm bandpass filters. This results in visualization of two populations: dead cells (positive for PI) and live cells that contain lead (positive for Leadmium™ Green dye and negative for PI).

發表文獻（A10024）：

Cellular sequestration of cadmium in the hyperaccumulator plant species Sedum alfredii. PubMed ID: 22025609

A new ABC half-transporter in Leishmania major is involved in resistance to antimony.  PubMed ID: 23716044

Increased nuclear thioredoxin-1 potentiates cadmium-induced cytotoxicity. PubMed ID: 22961094

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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