問：膠原酶NB（Collagenase NB）和中性蛋白(bái)酶NB（Neutral Protease NB）的來源是什麽？

答：SERVA公司所有膠原酶NB和中性蛋白(bái)酶NB産品都來源自(zì)溶組織梭菌（Clostridium histolyticum），其是一(yī)種厭(yàn)氧、革蘭氏陽性菌，天然代謝産生(shēng)膠原酶和中性蛋白(bái)酶。

問：為(wèi)什麽膠原酶NB1和中性蛋白(bái)酶NB根據活力值來包裝，而所有其他膠原酶NB産品按照(zhào)質量來包裝？

答：膠原酶NB1和中性蛋白(bái)酶NB特别适合用來分離人胰腺來源的郎格罕氏島（胰島），這些酶的包裝大小(xiǎo)特别設計用于消化一(yī)個(gè)人胰腺。而其他膠原酶NB産品适合各種應用所以很難确定特定包裝大小(xiǎo)。

問：如何保存膠原酶NB和中性蛋白(bái)酶NB？

答：SERVA公司膠原酶NB和中性蛋白(bái)酶NB産品以凍幹粉形式提供，應置于2-8℃幹燥保存（除非COA上(shàng)特别說明）。在此條件(jiàn)下(xià)，産品在COA上(shàng)注明的有效日期前都是穩定的。避免重複的開(kāi)/關瓶子。

問：是否應該重溶膠原酶NB和分裝儲存液或每次按需稱取凍幹粉産品？

答：SERVA公司推薦制備儲存液，通(tōng)過将膠原酶NB溶解在适當體積的緩沖液，如HBSS，PBS，Tris或Ringer溶液中。重溶儲存液需過濾除菌（如果産品本身非無菌），分裝，凍存在-20℃。内部穩定性測試顯示如此條件(jiàn)下(xià)能(néng)保存1年(nián)，避免重複凍融。

如果凍幹粉産品的瓶子開(kāi)關數次，會(huì)使得粉末酶接觸空氣濕氣，可能(néng)引起酶活性降低(dī)。

問：是否可以過濾膠原酶NB和中性蛋白(bái)酶NB溶液？

答：是的，這些溶液都能(néng)經0.22µm濾膜除菌。建議使用低(dī)蛋白(bái)結合特性的濾器(qì)（濾膜），比如醋酸纖維素膜，PVDF或PES。

問：加酶到(dào)細胞之前如何保存膠原酶溶液？

答：膠原酶NB和中性蛋白(bái)酶NB溶液需要持續性保存在冰上(shàng)直至使用，因保存在更高(gāo)溫度時酶活力降低(dī)很明顯。總而言之，盡快使用酶溶液。

問：膠原酶NB和中性蛋白(bái)酶的最佳工(gōng)作溫度和最佳pH？

答：膠原酶NB的最佳工(gōng)作溫度37℃，最佳pH=7.4；中性蛋白(bái)酶的最佳溫度37℃，中性pH皆可；

問：是否能(néng)提供關于細胞分離應用的操作步驟？

答：SERVA膠原酶NB應用範圍非常廣，且使用實驗室非常多(duō)。SERVA提供應用注意事(shì)項和關于各種組織來源的細胞分離所用的膠原酶濃度和消化時間的步驟信息。見(jiàn)官網：Application details for tissue dissociation。

問：哪種緩沖液應用于細胞分離？

答：不推薦使用特别的緩沖液，因已知幾種緩沖液，包括HBSS，PBS和Tris都适用于膠原酶的細胞分離。膠原酶依賴Ca2+，因此推薦緩沖液含≥2mM Ca2+。EDTA會(huì)抑制膠原酶活性，因此緩沖液中必須完全不含鈣離子螯合劑比如EDTA。

問：如何終止酶的消化反應？

答：通(tōng)過降低(dī)溫度、添加人或胎牛血清，稀釋或清洗掉消化液都能(néng)終止消化反應。沒有特别推薦因幾種方法都有效，還(hái)是取決于組織和細胞類型和具體應用。

問：如何換算(suàn)膠原酶單位？

答：SERVA states collagenase activity in PZ units according to Wünsch:1 PZ U/mg ~ 3.9 FALGPA U/mg，1 PZ U/mg ~ 1000 Mandl or CDU/mg，1 PZ U/mg ~ 10 HP U/mg

更多(duō)産品問題請自(zì)行登錄SERVA官網或來電(diàn)索取，021-54736159，QQ：2971634497。