Chondrex 快速膠原酶活性檢測試劑盒（Collagenase Assay Kits）

背景描述：

膠原酶（Collagenases），基質金屬蛋白(bái)酶（matrix metalloproteinase, MMP）家族的成員(yuán)之一(yī)，屬于内肽酶類，在三螺旋區降解天然膠原，參與結蹄組織的生(shēng)理和病理周轉過程。膠原是動物(wù)基質結蹄組織的主要纖維成分。膠原酶可能(néng)在腫瘤細胞轉移的多(duō)個(gè)階段中，對腫瘤細胞侵襲穿透細胞外基質的過程起到(dào)促進作用。膠原酶已被支持用于臨床治療杜普征氏掌攣縮（Dupuytren's contracture），佩羅尼氏病（Peyronie's disease）和傷口愈合。

膠原酶活性檢測方法很多(duō)，傳統的方法包括膠原酶譜法（Collagen Zymography），該法首先将樣本加入含膠原的SDS-PAGE凝膠中電(diàn)泳，然後在适當緩沖液中複性12-16h，最後染色。當底物(wù)被酶降解，在整個(gè)黑(hēi)色的背景中能(néng)看(kàn)到(dào)清晰透明的降解條帶，從(cóng)而來判斷是否存在膠原酶活性。該方法不僅費(fèi)力費(fèi)時，且很可能(néng)因複性不完全逆轉，導緻酶活性降低(dī)，結果出現較大偏差。

Rapid Collagenase Assay Kit (I) and (II)（Chondrex, Inc）

1. 試劑盒優勢

含有測定膠原酶活性的所有必要成分包括重組人MMP-8（用作對照(zhào)）和兩種類型的膠原酶活化劑。

不同于抗體為(wèi)基礎的ELISA試劑盒僅能(néng)檢測酶蛋白(bái)的存在，這些試劑盒目的在于測定酶活性。

試劑盒使用FITC标記的可溶性牛I型膠原或II型膠原為(wèi)底物(wù)，隻需2h就(jiù)能(néng)完成測試。

比底物(wù)凝膠分析法（酶譜法）快10倍，檢測靈敏度比放(fàng)射同位素标記膠原法更靈敏。

2. 特異性

哺乳動物(wù)膠原酶

3. 工(gōng)作原理

哺乳動物(wù)膠原酶切割膠原分子上(shàng)的所有三個(gè)α鏈，産生(shēng)3/4和1/4大小(xiǎo)的膠原片段，TCA和TCB，這兩個(gè)片段的變性溫度分别為(wèi)34-35℃和28-29℃，而所有完整膠原（天然膠原）的變性溫度是40℃。因此，35℃下(xià)這些切割片段能(néng)選擇性變性為(wèi)随機(jī)的螺旋構象，能(néng)夠被一(yī)種有機(jī)溶劑提取出來。為(wèi)了縮短變性過程（通(tōng)常需60min），一(yī)種蛋白(bái)酶被引入用來進一(yī)步消化膠原酶降解後的産物(wù)。

4. 反應步驟

5. 試劑盒組分

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2. 6. 試劑盒訂購：Chondrex原裝正品，歡迎來電(diàn)咨詢，021-54736159，QQ：2971634497。

3001 3002 Rapid Collagenase Assay Kit with Type I Collagen Substrate User Manual

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