目錄号 | HP1-100Kit | 售價 | 5904.00元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
規格 | 100T | 運輸溫度 | 冰袋 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
其他名稱 | 保存溫度 | 詳見(jiàn)資料 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
CAS号 | N/A | 有效期 | 1年(nián) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
應用 | 缺氧探針檢測試劑盒 | 訂購數量 |
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産品簡介: HypoxyprobeTM-1 Kit 缺氧探針檢測試劑盒
搜索關鍵詞: Hypoxyprobe, Inc.(缺氧探針公司);Pimonidazole HCl;缺氧标志(zhì)物(wù)(Hypoxia maker);Chemicon Inc.;
産品應用: 免疫化學法檢測細胞和組織缺氧情況,包括免疫熒光(guāng)(IF),免疫過氧化物(wù)酶,WB或流式細胞分析(FC);
試劑盒組分:
試劑盒組分詳細描述: 一(yī)、Hypoxyprobe-1 Hypoxyprobe-1是2-硝基咪唑的替代物(wù),其化學名和唯一(yī)成分是Pimonidazole hydrochloride(Pimonidazole HCl),分子量為(wèi)290.8,水(shuǐ)溶性為(wèi)400mM(=116 mg/ml),紫外吸收(324nm)的吸光(guāng)系數為(wèi)7020(0.9%生(shēng)理鹽水(shuǐ))。
Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化學穩定性。比如,固體形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光(guāng)線下(xià)室溫保存2年(nián),UV和HPLC分析法評估無任何降解發生(shēng)。溶于0.9%生(shēng)理鹽水(shuǐ)的Hypoxyprobe-1,濃度100g/L置于2-8℃保存4.5年(nián),UV和HPLC分析法評估無任何降解發生(shēng)。
作用機(jī)理:缺氧細胞中Pimonidazole被還(hái)原後得以活化。這一(yī)活化的中間物(wù)與蛋白(bái)質、多(duō)肽和氨基酸中的巯基基團(thiol groups)形成穩定的加合物(wù)。Mab1抗體結合這些加合物(wù)從(cóng)而能(néng)借由免疫化學法來檢測。
二、MAb1抗體 MAb1是小(xiǎo)鼠IgG1單克隆抗體(克隆4.3.11.3),為(wèi)雜(zá)交瘤細胞克隆4.3.11.3表達液過濾除菌後得到(dào)的上(shàng)清液,含60μg/ml MAb1和0.15%疊氮鈉。
感興趣組織可用免疫組化檢測(IHC),冰凍切片或者福爾馬林固定的石蠟包埋切片;也可組織降解後用流式分析法檢測;或用WB檢測。典型情況下(xià),MAb1抗體經1:50稀釋後,取100μl到(dào)組織切片上(shàng)。然後加合适的二抗方法來檢測Pimonidazole加合物(wù)。
使用指南(nán): 1、 Animal Studies 動物(wù)研究 研究正常或腫瘤組織缺氧首先通(tōng)過靜(jìng)脈注射(intravenous infusion)、腹腔注射(intraperitoneal injection)或口服(oral ingestion)法給Hypoxyprobe-1溶液,劑量為(wèi)60mg/kg體重。比如,25g小(xiǎo)鼠的探針用量為(wèi)1.5mg/隻小(xiǎo)鼠。(高(gāo)達400mg/kg的劑量用于小(xiǎo)鼠無可見(jiàn)毒性或引起組織缺氧變化,但60mg/kg以最低(dī)成本給予良好的染色結果)。
給藥後,Hypoxyprobe-1分布到(dào)包括大腦(nǎo)的所有組織,且僅僅在氧濃度≤14μM(相(xiàng)當于pO2=10mm Hg,37℃)的細胞内與蛋白(bái)質巯基形成加合物(wù)。除了腫瘤之外,正常組織如肝髒、腎髒和皮膚含pO2等于或低(dī)于10mm Hg的細胞,也會(huì)結合Hypoxyprobe-1。
2、Tissue cultures 組織培養 通(tōng)常情況下(xià),細胞懸液置于含100-200μM Hypoxyprobe-1的缺氧環境中孵育1-2h。之後細胞離心塗片、固定、MAb1和顯色或熒光(guāng)二抗染色。
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文件(jiàn)下(xià)載: 2、Hypoxyprobe frequently asked questions (FAQ) 常見(jiàn)問題 3、Hypoxyprobe Kit Application 應用文獻
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