Alkaline Phosphatase Staining Kit for Stem Cell

堿性磷酸酶染色試劑盒（幹細胞專用）

産品标簽：

Phosphatase, Alkaline 堿性磷酸酶；ALP/AKP；對硝基苯酚磷酸鹽（pNPP）；偶氮偶聯法；顯色法（定量）；染色法（定性）；

産品信息

【溫馨提示I】：見(jiàn)堿性磷酸酶産品專題，了解更多(duō)相(xiàng)關産品資料；

【溫馨提示II】：見(jiàn)堿性磷酸酶染色試劑盒産品專題；

【溫馨提示III】：見(jiàn)堿性磷酸酶活性檢測試劑盒産品專題；

【溫馨提示IV】：見(jiàn)堿性磷酸酶常用生(shēng)化底物(wù)及試劑盒産品；

産品描述

處于未分化狀态的胚胎幹細胞（ES）和誘導多(duō)潛能(néng)幹細胞（iPS）典型特征是呈高(gāo)水(shuǐ)平的堿性磷酸酶表達，同時結合其他的一(yī)些表面标志(zhì)物(wù)，來顯示未分化細胞具自(zì)我更新的潛能(néng)。堿性磷酸酶（ALP，或AP）是一(yī)種水(shuǐ)解酶，堿性條件(jiàn)下(xià)能(néng)夠将核苷酸、蛋白(bái)、甾醇等分子去磷酸化作用。固定ES或iPS用堿性磷酸酶染色試劑盒染色後，未分化細胞呈紅(hóng)/紫色，而分化細胞呈無色。

本堿性磷酸酶染色試劑盒特異性強，靈敏度高(gāo)，可為(wèi)ES/iPS細胞分化的表型評估提供可靠的依據。對于其他細胞來說，染色越深，表明細胞内ALP活性越高(gāo)。以24孔闆染色為(wèi)例，分别可做50次和100次染色。

産品組分

保存與運輸方法

保存：2-8℃保存，6個(gè)月(yuè)穩定。

運輸：冰袋運輸。

注意事(shì)項

為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

操作步驟（以24孔闆染色為(wèi)例）

1. 實驗前準備材料：PBST緩沖液、PBS緩沖液

2. 染色工(gōng)作液準備：按照(zhào)如下(xià)比例【溶液A: 溶液B: 溶液C=1:1:1】，配制适量染色工(gōng)作液。請務必根據單次實驗用量制備染色工(gōng)作液。為(wèi)了保證最佳染色結果，需在配制30min内用完染色工(gōng)作液，多(duō)餘染色工(gōng)作液請丢棄。

3. 染色步驟

1. 吸出細胞培養液，PBST洗2~3次，用0.5ml固定液室溫固定2~5min。【注意】：固定不要超過5min，過度固定會(huì)導緻ALP失活）。

2. 吸出固定液，PBST洗2次；

3. 吸出PBST。加入0.6ml/孔染色工(gōng)作液覆蓋細胞，室溫避光(guāng)放(fàng)置5~15min；【注意】：染色過程需密切監督顔色變化，當顔色很明亮即可終止反應，否則會(huì)引起非特異性染色。

4. 吸出染色工(gōng)作液，用PBS洗2次，最後保存于PBS或封片劑内防止幹燥，顯微鏡下(xià)觀察染色結果。結果判定：未分化細胞染色呈紅(hóng)/紫色，分化細胞染色呈無色。

5. 将平闆保存在4℃。

相(xiàng)關産品

引用文獻：

[1]Li, Z., Zhao, H., Chu, S. et al. miR-124-3p promotes BMSC osteogenesis via suppressing the GSK-3β/β-catenin signaling pathway in diabetic osteoporosis rats. In Vitro Cell.Dev.Biol.-Animal 56, 723–734 (2020). https://doi.org/10.1007/s11626-020-00502-0

An Alkaline Phosphatase Staining Kit (MP7503-50T, MKBio, Shanghai, China) was used for ALP staining. The cells were seeded into a 6-well plate, fixed with 4% paraformaldehyde (pH 7.4) for 1–2 min, and washed twice with phosphate buffered saline (PBS) and tris buffered saline with tween (TBST).

41.   Zhang X, Hong K, Sun Q, Zhu Y, Du J. Bioreducible, arginine-rich polydisulfide-based siRNA nanocomplexes with excellent tumor penetration for efficient gene silencing. Biomater Sci. 2021 Jun 28. doi: 10.1039/d1bm00643f. Epub ahead of print. PMID: 34180478.

PEI 25K was purchased from Maokang Biological Technology Co., Ltd