Alkaline Phosphatase from E. Coli. 堿性磷酸酶，來自(zì)大腸杆菌

産品信息

【溫馨提示1】：見(jiàn)堿性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，ALP）産品專題，了解更多(duō)相(xiàng)關産品信息。

【溫馨提示2】：見(jiàn)堿性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，ALP）活性檢測試劑盒産品。

【溫馨提示3】：見(jiàn)堿性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，ALP）染色試劑盒産品。

産品描述

堿性磷酸酶（Phosphatase, Alkaline，ALP，EC 3.1.3.1），是一(yī)種含兩個(gè)相(xiàng)同亞基的二聚體，也是一(yī)種約含12%碳水(shuǐ)化合物(wù)（6%己糖和6%其他中性糖）的糖蛋白(bái)，每個(gè)ALP分子含4個(gè)鋅離子和4個(gè)二硫鍵。鎂離子存在情況下(xià)，ALP可達到(dào)最高(gāo)酶活。AP能(néng)催化磷酸單酯水(shuǐ)解，比如對硝基苯酚磷酸鹽（pNPP）、磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2- 磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-煙(yān)酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。

堿性磷酸酶（ALP）常用來偶聯抗體和其他蛋白(bái)，從(cóng)而滿足ELISA、WB和組織化學檢測上(shàng)的應用。通(tōng)常用來蛋白(bái)的去磷酸化實驗，比如酪蛋白(bái)和核酸等。當需要高(gāo)檢測靈敏度時也能(néng)用來蛋白(bái)标記。還(hái)可用在DNA或RNA 的5′-末端去磷酸以防止自(zì)連。經堿性磷酸酶的去磷酸化作用後，DNA 或 RNA 還(hái)可被放(fàng)射性标記磷酸鹽标記（通(tōng)過 T4 多(duō)核苷酸激酶）。

本品為(wèi)大腸杆菌重組表達純化所得，以硫酸铵懸液形式提供，比活力≥10U/mg protein。

産品特性

1）CAS NO：9001-78-9

2）英文同義名：Phosphatase, Alkaline; Orthophosphoric-monoester phosphohydrolase (alkaline optimum); Phosphomonoesterase; Alkaline Phosphomonoesterase;

3）中文同義名：磷酸酶（堿性）；堿性磷酸單酯酶；大腸杆菌來源堿性磷酸酶；堿性磷酸酶（大腸杆菌）

4）來源：大腸杆菌（E. Coli）

5）純化方式：鹽分餾（Partially purified salt fraction）

6）外觀：2.5M硫酸铵懸液，pH 8.0

7）抑制劑：螯合劑和無機(jī)磷酸鹽

8）最佳pH：8.0

8）比活力：≥10 units/mg protein (25℃, pH 8.0)

9）活性單位定義：在25℃，pH8.0反應條件(jiàn)，每min内水(shuǐ)解對硝基苯磷酸鹽(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)生(shēng)成1 μmol對硝基苯酚(p-nitrophenol)所需的酶量定義為(wèi)1個(gè)活性單位(unit)。 

保存與運輸方法

保存：2-8℃保存，1年(nián)穩定。

運輸：冰袋運輸。

注意事(shì)項

1）本品穩定性高(gāo)，反應需Zn²⁺，Mg²⁺可提高(gāo)酶活。在螯合劑存在條件(jiàn)下(xià)，100℃加熱可導緻酶暫時性失活，但恢複至室溫酶活會(huì)恢複，必須進行苯酚處理，才能(néng)引起酶完全失活。本品最适pH約8.0，Tris等醇類化合物(wù)可提高(gāo)酶活。

2）為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

附錄1 純化酶産品（硫酸铵懸浮液形式）使用指導

1）當硫酸铵可能(néng)會(huì)幹擾酶反應，操作如下(xià)：

1.1 從(cóng)冰箱内取出酶。【注：硫酸铵懸浮液産品不可凍存！！】

1.2 确保蓋子擰緊，然後颠倒混勻數次得到(dào)乳白(bái)色懸浮液，此過程可能(néng)需要一(yī)分鍾左右。不可渦旋或超聲，因如此強烈的處理可能(néng)會(huì)引起某些酶的變性。

1.3 使用寬口槍頭，吸取一(yī)部分懸浮液轉移到(dào)一(yī)幹淨的離心管内。

1.4 約10,000~15,000x g離心10min。若是條件(jiàn)允許，低(dī)溫（2-8℃）設置下(xià)離心。

1.5 小(xiǎo)心吸取盡可能(néng)透明的上(shàng)清液，并保留到(dào)一(yī)幹淨的離心管内。沒有必要完全吸掉所有的硫酸铵溶液。

1.6 用适量的反應緩沖液加入沉澱中并使其溶解。

1.7 對上(shàng)述得到(dào)的上(shàng)清液，以及用反應緩沖液溶解的酶溶液進行蛋白(bái)含量和/或酶活力檢測。

【注：具體酶的活力檢測方法可見(jiàn)我司官網或與我們聯系索取相(xiàng)關資料。】

2）當硫酸铵不會(huì)幹擾酶反應，操作如下(xià)：

2.1 從(cóng)冰箱内取出酶。【注：硫酸铵懸浮液産品不可凍存！！】

2.2 确保蓋子擰緊，然後颠倒混勻數次得到(dào)乳白(bái)色懸浮液，此過程可能(néng)需要一(yī)分鍾左右。不可渦旋或超聲，因如此強烈的處理可能(néng)會(huì)引起某些酶的變性。

2.3 使用寬口槍頭，吸取一(yī)部分懸浮液直接加入反應緩沖液中即可。

【注意：對于硫酸铵懸浮液，絕大部分的酶都是以固體形式存在。很有可能(néng)僅僅可忽略量的酶以溶于硫酸铵溶液的形式存在。】

附錄2 堿性磷酸酶（大腸杆菌來源）活力測定方法，點擊此處下(xià)載PDF文檔。