WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

産品标簽

WST-1；CCK-8；WST-8；MTT 噻唑蘭；Alamar Blue 阿爾瑪藍；XTT；CAS：150849-52-8；

産品信息

産品描述

WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒（WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）是一(yī)種廣泛用于細胞增殖和細胞毒性檢測的快速高(gāo)靈敏度試劑盒。

WST-1是MTT（噻唑蘭）的升級産品，檢測原理為(wèi)：在電(diàn)子耦合試劑存在的情況下(xià)，WST-1可被線粒體内的脫氫酶還(hái)原生(shēng)成水(shuǐ)溶性的橙黃色甲臜産物(wù)（formazan）。顔色的深淺與活細胞數量（細胞增殖）成正比，與細胞毒性成反比。通(tōng)過酶标儀在450nm波長(cháng)處測定OD值來反映細胞增殖以及細胞毒性水(shuǐ)平。WST-1和MTT，以及其它MTT類似産品比如：XTT、MTS相(xiàng)比具有明顯的優勢：①WST-1、XTT和MTS生(shēng)成的甲臜産物(wù)是水(shuǐ)溶的，可以省去後續的溶解步驟；不像MTT，生(shēng)成的甲臜産物(wù)不是水(shuǐ)溶的，必需用特定的溶解液來溶解；②WST-1生(shēng)成的甲臜産物(wù)比XTT和MTS生(shēng)成的更易溶解；③WST-1比XTT和MTS更加穩定，使結果更加穩定；④WST-1比XTT和MTS的線性範圍更寬，靈敏度更高(gāo)。

WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒适用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測，也可用于小(xiǎo)分子藥物(wù)等誘導的細胞毒性或細胞生(shēng)長(cháng)抑制實驗等。本試劑盒操作便捷，所有的檢測步驟在一(yī)塊96孔闆内即能(néng)完成。不必洗滌細胞，不必收集細胞。也不需要額外步驟來溶解甲臜産物(wù)，可用于大批量樣品的檢測。酚紅(hóng)和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。

我司提供兩種規格的試劑盒，按照(zhào)96孔闆來計算(suàn)，分别可以做100個(gè)孔（MX3007-100T）和500個(gè)孔（500T）。

産品組分

保存與運輸方法

保存：-20℃避光(guāng)保存，一(yī)年(nián)有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事(shì)項

1）使用96孔闆進行檢測，如果細胞培養時間較長(cháng)，一(yī)定要注意蒸發的問題。①由于96孔闆周圍一(yī)圈最容易蒸發，可以采取棄用周圍一(yī)圈的辦法，改加PBS、無菌水(shuǐ)或培養液；②可以把96孔闆置于靠近培養箱内水(shuǐ)源的地方以緩解蒸發。

2）接種時注意細胞懸液一(yī)定要混勻，以避免細胞沉澱下(xià)來導緻每孔中的細胞數量不等，可以每接種幾個(gè)孔就(jiù)混勻一(yī)下(xià)。

3）培養基内的酚紅(hóng)和血清不會(huì)顯著幹擾結果。

4）如果沒有450nm的濾光(guāng)片，可以使用吸光(guāng)度在420-480 nm之間的濾光(guāng)片。

5）如果樣品為(wèi)高(gāo)渾濁的細胞懸液，建議設定＞600nm的波長(cháng)作為(wèi)參比波長(cháng)，扣除參比波長(cháng)的OD值即可。

6）為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

儲存液制備

1）對于WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒（MX3007-100T）：于使用前，将盒子内的1管WST-1（粉末）從(cóng)冰箱取出，置于室溫至少回溫20min，之後加入1ml 電(diàn)子耦合試劑，完全溶解即得到(dào)WST-1溶液；

2）對于WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒（MX3007-500T）：于使用前，将盒子内的1管WST-1（粉末）從(cóng)冰箱取出，置于室溫至少回溫20min，之後加入5ml 電(diàn)子耦合試劑，完全溶解即得到(dào)WST-1溶液；

3）WST-1溶液于4℃保存一(yī)周，不影響使用效果。短期不用務必分裝後置于-20℃保存，半年(nián)穩定。凍存的WST-1溶液融化後可能(néng)會(huì)觀察到(dào)一(yī)些沉澱物(wù)，此為(wèi)正常現象。可于37℃水(shuǐ)浴2-10min，通(tōng)常能(néng)完全溶解。

檢測流程（96孔闆）

1）收集對數期細胞，96孔平底闆内接種細胞，調整細胞密度為(wèi)1×10⁴-1×10⁵細胞/孔，每孔接種100μl（含或不含待測的化合物(wù)）。

【注①】：具體每孔所用的細胞數目，需根據細胞大小(xiǎo)，細胞增殖速度的快慢(màn)以及實驗用途等因素決定。對于細胞毒性實驗，建議接種更高(gāo)的起始細胞，比如：5×10⁴-1×10⁵細胞/孔。

【注②】：接種時，需注意四周孔用無菌水(shuǐ)、無菌PBS或細胞培養基填充。

【注③】：【可選】根據自(zì)身實驗設計選擇适宜時間加入藥物(wù)，一(yī)般來說，細胞貼壁後即可加藥， 或2h，或12h，每孔0-10μl，設3-5個(gè)複孔。建議設5個(gè)複孔。

【注④】：需設置空白(bái)對照(zhào)孔（不含細胞，僅含培養基，WST-1）。

2）5% CO₂，37℃培養細胞24-96h。

3）每孔加入10μl WST-1溶液（注意不要引入氣泡），繼續培養0.5-4h。

【注①】：若藥物(wù)與 WST-1 有反應，可先離心後棄去培養液，小(xiǎo)心用 PBS 沖2-3 遍後，再加入含 WST-1的培養液。

【注②】：在細胞培養箱内繼續孵育時間長(cháng)短根據細胞的類型和細胞密度等實驗情況而定，初次實驗時可以在 0.5、1、2 和 4h後分别用酶标儀檢測，然後選取吸光(guāng)度範圍比較适宜的一(yī)個(gè)時間點用于後續實驗。

4）把 96孔闆置于搖床上(shàng)搖動1min，以充分混勻待檢測體系。

5）在450nm處測定吸光(guāng)度。如無450nm 濾光(guāng)片，可以使用 420-480nm的濾光(guāng)片。另外，可以使用＞600nm 的波長(cháng)作為(wèi)參考波長(cháng)進行雙波長(cháng)測定。

結果分析

1）細胞增殖分析

2）細胞毒性分析

相(xiàng)關産品

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