産品簡介:
MTT Cell Proliferation Assay Kit
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
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搜索關鍵詞:
MTT噻唑蘭;台盼藍染色法;CCK-8 細胞增殖和毒性檢測試劑盒;WST-8;CAS:298-93-1;
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産品名稱
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産品編号
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規格
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價格(元)
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MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
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MX3005-500T
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500T
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299
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MX3005-1000T
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1000T
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589
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MX3005-2500T
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2500T
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999
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基本描述:
MTT也稱作溴化噻唑藍四氮唑,是一(yī)種黃色染料,已經廣泛替代傳統的台盼藍染色法或者放(fàng)射性同位素插入法,用來檢測細胞活力、細胞增殖以及毒性分析。MTT是一(yī)種可接受氫離子的化合物(wù)染料,帶正電(diàn)荷,具有細胞膜滲透性。活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能(néng)夠将外源進入的MTT還(hái)原成為(wèi)水(shuǐ)不溶性的藍紫色MTT-甲臜結晶,而死細胞不具此功能(néng)。甲臜結晶不能(néng)穿透細胞膜,因此沉積在處于增殖且未受損傷的細胞内。在特定溶劑的作用下(xià)完全溶解甲臜結晶,然後通(tōng)過酶标儀測定570 nm附近的吸光(guāng)度。細胞增殖越多(duō),則吸光(guāng)度越高(gāo);細胞毒性越大,則吸光(guāng)度越低(dī)。
本MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)采用獨特的甲臜溶解液,能(néng)夠非常好的完全甲臜結晶,使檢測本底低(dī)、靈敏度高(gāo),且線性範圍寬。
産品組分
組分編号
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組分名稱
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保存方法
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貨号(規格)
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MX3005-500T
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MX3005-1000T
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MX3005-A
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MTT Solution MTT溶液(5mg/ml)
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-20℃避光(guāng)
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5ml
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2×5ml
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MX3005-B
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Formazan Solvent 甲臜溶解液
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-20℃或室溫
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60ml
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2×60ml
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保存與運輸方法
保存:-20℃避光(guāng)保存,1年(nián)有效。MTT溶液(5mg/ml)第一(yī)次使用亦可根據需要分裝後-20℃避光(guāng)保存;甲臜溶解液亦可室溫保存。
運輸:冰袋運輸。
注意事(shì)項
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使用96孔闆進行檢測,如果細胞培養時間較長(cháng),一(yī)定要注意蒸發的問題。①由于96孔闆周圍一(yī)圈最容易蒸發,可以采取棄用周圍一(yī)圈的辦法,改加PBS、無菌水(shuǐ)或培養液;②可以把96孔闆置于靠近培養箱内水(shuǐ)源的地方以緩解蒸發。
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MTT溶液在低(dī)溫下(xià)會(huì)凝固,請置于室溫或20-25℃水(shuǐ)浴溫育片刻至全部融解後再使用。
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MTT溶液需盡量減少反複凍融的次數,若單次用量很少,建議根據需求分裝後置于-20℃保存。MTT溶液顔色如變為(wèi)灰綠色,請勿使用。
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甲臜溶解液當置于-20℃保存需解凍使用,或室溫保存産生(shēng)沉澱,可置于37℃水(shuǐ)浴孵育以促進溶解,并且必須全部溶解後混勻使用。
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加入甲臜溶解液後請輕輕混勻,但需注意避免産生(shēng)泡沫。亦可借助顯微鏡觀察甲臜是否完全溶解。
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為(wèi)了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。
使用方法(以96孔闆為(wèi)例)
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收集對數生(shēng)長(cháng)期的細胞,用含血清的培養液配制成單細胞懸液,調整細胞密度,以每孔3000-10,000個(gè)細胞接種到(dào)96孔闆,每孔體積100µl,培養闆的邊緣孔用無菌PBS填充。設置空白(bái)孔和對照(zhào)孔。
【注①】:通(tōng)常情況,細胞增殖實驗每孔加3000個(gè)細胞,細胞毒性實驗每孔加6000個(gè)細胞。具體每孔所用細胞數目,需根據細胞大小(xiǎo)、增殖速度的快慢(màn)等來決定。
【注②】:需設置空白(bái)孔(不含細胞,含培養液、MTT和甲臜溶解液),對照(zhào)孔(含細胞、相(xiàng)同濃度的藥物(wù)溶解介質、培養液、MTT和甲臜溶解液),每組設置3個(gè)複孔。
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37℃,5% CO2繼續培養或根據實驗具體需求進行培養,一(yī)般培養6-24h。
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根據實驗具體需求,給予0-20µl幹預藥物(wù)處理,37℃,5% CO2繼續培養至合适時間。
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小(xiǎo)心吸掉培養液,每孔加入100µl新鮮培養液,再加入10µl MTT溶液(5 mg/ml),加樣時盡量勤換槍頭,控制加量誤差。繼續培養4h。
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小(xiǎo)心吸掉培養液,每孔加入110µl甲臜溶解液,置搖床上(shàng)低(dī)速振蕩10min,使得結晶物(wù)充分溶解。可在光(guāng)學顯微鏡下(xià)觀察結晶物(wù)是否完全溶解。如果紫色結晶較小(xiǎo)或較少,溶解的時間會(huì)短些;如果紫色結晶較大或較多(duō),溶解的時間會(huì)長(cháng)些。
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在酶标儀上(shàng)搖勻後,選擇570nm,測定吸光(guāng)度。記錄結果,比色以空白(bái)調零。
【注①】:對于細胞毒性檢測,以未經藥物(wù)處理細胞的OD值為(wèi)100%,然後計算(suàn)藥物(wù)處理細胞所占的比率(x),公式如下(xià):OD(未經藥物(wù)處理細胞)/OD(藥物(wù)處理細胞)=100%/x。然後建立直方圖。
相(xiàng)關産品
編号
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産品名稱
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規格
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MX3001-5G
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Trypan Blue台盼藍
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5g
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MX3002-50ML
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0.4% Trypan Blue Solution 0.4%台盼藍染色液
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50ml
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MX3003-100T
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台盼藍染色細胞存活率檢測試劑盒
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100T
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MX3004-250MG
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MTT噻唑蘭
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250mg
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MX3005-500T
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MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
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500T
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MX3006-5ML
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Alamar Blue阿爾瑪藍細胞增殖及毒性檢測試劑
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5ml (500T)
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MX3007-100T
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WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
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100T
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MX3008-1ML
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Cell Counting Kit (CCK-8) CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑
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1ml (100T)
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作,主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本,以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。
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