Trypsin, TPCK Treated,Sequencing Grade

胰蛋白(bái)酶（TPCK處理）（測序級）

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産品标簽

TPCK-treated Trypsin 胰酶；Collagenase NB 4 膠原酶NB4；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II 中性蛋白(bái)酶；CAS：9002-07-7；

産品信息

産品描述

胰蛋白(bái)酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，來源于胰腺的一(yī)種絲氨酸蛋白(bái)酶，由223個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈多(duō)肽，底物(wù)特異性是帶正電(diàn)荷的賴氨酸和精氨酸側鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端，當兩者之一(yī)緊随為(wèi)脯氨酸的情況除外。另外，當切割位點任一(yī)邊緊鄰酸性殘基，胰酶水(shuǐ)解速率也會(huì)減緩。

胰蛋白(bái)酶（胰酶，Trypsin），以無活性的胰蛋白(bái)酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通(tōng)過切割其末端六肽而得到(dào)活化，産生(shēng)天然單鏈形式的β-胰酶（β-Trypsin），随後進行有限的自(zì)發裂解産生(shēng)具水(shuǐ)解活性的α-Trypsin（由二硫鍵共價連接的二條肽鏈組成）。胰酶水(shuǐ)解活性可被多(duō)種化合物(wù)所抑制，有1）來源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白(bái)酶抑制劑；2）銀(yín)離子；3）有機(jī)磷化合物(wù)，如氟磷酸異丙酯DFP；4）特定蛋白(bái)酶抑制劑，如AEBSF、抗蛋白(bái)酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是來源于豬胰腺的胰蛋白(bái)酶，經N-(對甲苯磺酰基)-L-苯丙氨酰甲基氯酮（TPCK）預處理以抑制任何殘留的糜蛋白(bái)酶活性，具更高(gāo)的胰蛋白(bái)酶活性。本品專一(yī)性切割蛋白(bái)分子中的賴氨酸和精氨酸位點，是蛋白(bái)質肽段分析重要的工(gōng)具酶之一(yī)。本品以凍幹粉形式提供，比活力≥10,000 BAEE units/mg protein。

産品特性

1）   EC NO：3.4.21.4

2）   CAS NO：9002-07-7

3）   同義名：Trypsin, from porcine pancreas, TPCK Treated; 胰酶，來源于牛胰腺，TPCK處理；

4）   級别：測序級（Sequencing Grade）

5）   分子量：23.8 kDa

6）   外觀：類白(bái)色或微黃色結晶粉末

7）   溶解性：溶于1mM HCl（1mg/ml）

8）   比活力（胰蛋白(bái)酶）：≥10,000 BAEE units/mg protein

9）   比活力（糜蛋白(bái)酶）：≤0.1 BTEE units/mg protein

保存與運輸方法

保存：2-8℃幹燥保存，3年(nián)有效。

運輸：冰袋運輸。

使用方法

1.      産品溶解

儲存液制備：溶于1mM HCl（pH 3）配制母液，充分溶解，-20℃分裝凍存，至少穩定保存~1年(nián)。加入Ca2+（20mM）能(néng)延緩胰蛋白(bái)酶的自(zì)溶和維持胰蛋白(bái)酶在溶液内的穩定性。

穩定性：胰蛋白(bái)酶在2.0M 尿素，2.0M 鹽酸胍或0.1%（w/v）SDS維持絕大多(duō)數活性。在高(gāo)pH（＞11）下(xià)不可逆變性，或添加三氯乙酸 （TCA，終濃度10%）沉澱樣品，或加入高(gāo)濃度尿素（＞6.5M）變性。為(wèi)了去除所有胰蛋白(bái)酶活性，在1%（w/v）SDS下(xià)于100℃至少加熱5min。

2.      産品用法

使用時，将儲存液稀釋在50mM NH4HCO3, pH 7.8或pH 7~8的合适緩沖液内。

用于酶切或蛋白(bái)測序分析的工(gōng)作條件(jiàn)，可按照(zhào)胰蛋白(bái)酶（TPCK處理）：目标蛋白(bái)的質量比（w/w）範圍為(wèi)1：20~1：50來加量。 于37℃反應2~3h。

注意事(shì)項

1）胰蛋白(bái)凍幹粉産品常遇到(dào)的活性定義及其轉換，

1 BAEE Unit：在25℃，pH 7.6 的條件(jiàn)下(xià)，以BAEE為(wèi)底物(wù)，3.2 ml的反應體系中，A253吸光(guāng)值每分鍾會(huì)發生(shēng)0.001的變化即為(wèi)一(yī)個(gè)酶活單位。

1 TAME Unit： 在25℃，pH 8.2，0.001M Ca2+條件(jiàn)下(xià)，每分鍾水(shuǐ)解 1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester（TAME）的用量。

1 USP Unit：在指定條件(jiàn)下(xià)，每分鍾引起吸光(guāng)值發生(shēng)0.003的變化的樣品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

2）為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

相(xiàng)關産品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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