Trypsin, TPCK Treated, Cell Culture Grade

胰蛋白(bái)酶（TPCK處理）（組織培養級）

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産品标簽

TPCK-treated Trypsin 胰酶；Collagenase NB 4 膠原酶NB4；Trypsin-EDTA (0.25%)；Dispase II 中性蛋白(bái)酶；CAS：9002-07-7；

産品信息

産品描述

胰蛋白(bái)酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，來源于胰腺的一(yī)種絲氨酸蛋白(bái)酶，由223個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈多(duō)肽，底物(wù)特異性是帶正電(diàn)荷的賴氨酸和精氨酸側鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端，當兩者之一(yī)緊随為(wèi)脯氨酸的情況除外。另外，當切割位點任一(yī)邊緊鄰酸性殘基，胰酶水(shuǐ)解速率會(huì)減緩。胰蛋白(bái)酶以無活性的胰蛋白(bái)酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通(tōng)過切割其末端六肽而得到(dào)活化，産生(shēng)天然單鏈形式的β-胰酶（β-Trypsin），随後進行有限的自(zì)發裂解産生(shēng)具水(shuǐ)解活性的α-Trypsin（由二硫鍵共價連接的二條肽鏈組成）。

胰蛋白(bái)酶的用途廣泛，包括1）組織消化，需要配合其他蛋白(bái)酶如膠原酶和彈性蛋白(bái)酶一(yī)起使用；2）胰酶消化以收集細胞；3）線粒體分離；4）體外蛋白(bái)研究；5）從(cóng)塑料或者玻璃培養表面消化以去除單細胞層；6）多(duō)種血細胞凝集過程；7）流式DNA分析的樣品制備；8）胰酶消化肽圖譜；9）指紋和測序研究；10）環境監測；11）降低(dī)組織培養的細胞密度；12）細胞亞培養；13）融合蛋白(bái)切割；14）純化糖蛋白(bái)内消化得到(dào)糖肽。

本品為(wèi)經TPCK（N-tosyl-L-phenylalanyl chloromethyl ketone,甲苯磺酰基-L-氨基聯苯氯甲基酮）處理的胰蛋白(bái)酶，有效抑制胰蛋白(bái)酶制備過程中殘留的糜蛋白(bái)酶活性。細胞培養級，适用于細胞傳代。本品以凍幹粉形式提供，比活力≥10,000 BAEE units/mg protein。

産品特性

1）   EC NO：3.4.21.4

2）   CAS NO：9002-07-7

3）   同義名：Trypsin, from porcine pancreas, TPCK Treated; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol; 胰酶，來源于牛胰腺，TPCK處理；

4）   分子量：23.4 kDa

5）   外觀：白(bái)色或者微黃色結晶粉末

6）   溶解性：溶于1mM HCl（1mg/ml）

7）   比活力（胰蛋白(bái)酶）：≥10,000 BAEE units/mg protein

8）   比活力（糜蛋白(bái)酶）：≤0.1 BTEE units/mg protein

保存與運輸方法

保存：2-8℃幹燥保存，3年(nián)有效。

運輸：冰袋運輸。

使用方法

1.      産品溶解

儲存液制備：溶于1mM HCl（pH 3）配制母液，充分溶解，-20℃分裝凍存，至少穩定保存~1年(nián)。加入Ca2+（20mM）能(néng)延緩胰蛋白(bái)酶的自(zì)溶和維持胰蛋白(bái)酶在溶液内的穩定性。

穩定性：胰蛋白(bái)酶在2.0M 尿素，2.0M 鹽酸胍或0.1%（w/v）SDS維持絕大多(duō)數活性。在高(gāo)pH（＞11）下(xià)不可逆變性，或添加三氯乙酸 （TCA，終濃度10%）沉澱樣品，或加入高(gāo)濃度尿素（＞6.5M）變性。為(wèi)了去除所有胰蛋白(bái)酶活性，在1%（w/v）SDS下(xià)于100℃至少加熱5min。

2.      産品用法

使用時，将pH 7~8的合适緩沖液将儲存液稀釋到(dào)工(gōng)作濃度。

注意事(shì)項

1）胰蛋白(bái)凍幹粉産品常遇到(dào)的活性定義及其轉換，

1 BAEE Unit：在25℃，pH 7.6 的條件(jiàn)下(xià)，以BAEE為(wèi)底物(wù)，3.2 ml的反應體系中，A253吸光(guāng)值每分鍾會(huì)發生(shēng)0.001的變化即為(wèi)一(yī)個(gè)酶活單位。

1 TAME Unit： 在25℃，pH 8.2，0.001M Ca2+條件(jiàn)下(xià)，每分鍾水(shuǐ)解 1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester（TAME）的用量。

1 USP Unit：在指定條件(jiàn)下(xià)，每分鍾引起吸光(guāng)值發生(shēng)0.003的變化的樣品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

2）為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

相(xiàng)關産品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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