| 目錄号 | MF2493-5000UL | 售價 | 1728.00元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 規格 | 50×100μl | 運輸溫度 | 幹冰運輸 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 其他名稱 | 保存溫度 | -80℃保存，六個(gè)月(yuè)有效。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| CAS号 | N/A | 有效期 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 應用 | 訂購數量 |
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産品簡介: S17-1 λpir Chemically Competent Cell 大腸杆菌化學感受态細胞
産品訂購： 更大包裝或産品技(jì)術(shù)問題，請來電(diàn)/在線咨詢，電(diàn)話：021-54736159 。網站：www.maokangbio.com。
菌株描述 S17-1 λpir菌株的染色體整合了RP4-2質粒，該質粒可攜帶染色體的部分DNA在接合菌株之間轉移。S17- 1 λpir菌株缺失核酸内切酶 （endA1），提高(gāo)了質粒DNA的産量和質量；重組酶缺陷型 （recA1）減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩定性。Tn7賦予該菌株弱的鏈黴素抗性。
S17-1 λpir菌株基因型：RP4-2(Km::Tn7,Tc::Mu-1), pro-82, LAMpir, recA1, endA1, thiE1, hsdR17, creC510
産品描述 本品是大腸杆菌S17-1 λpir菌株經特殊工(gōng)藝制作所得的感受态細胞，可用于DNA的熱擊轉化。經pUC19質粒檢測轉化效率可達1×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能(néng)穩定保存幾個(gè)月(yuè)轉化效率不發生(shēng)改變。
産品包裝
保存與運輸條件(jiàn)： 保存：-80℃保存，六個(gè)月(yuè)有效。 運輸：幹冰運輸。
注意事(shì)項 1） 感受态細胞必須用幹冰運輸，感受态細胞應在-80℃保存。 2） 感受态細胞最好在冰上(shàng)融化，不可在冰上(shàng)放(fàng)置時間過長(cháng)，長(cháng)時間存放(fàng)會(huì)降低(dī)轉化效率。 3） 進行轉化操作時，需在相(xiàng)應溫度及無菌條件(jiàn)下(xià)進行。 4） 為(wèi)防止轉化實驗不成功，可保留部分連接反應液以重新轉化，将損失降到(dào)最低(dī)。 5） 産品包裝内含質粒pUC19 DNA(10pg/μl)，供對照(zhào)實驗用。 6） 後續進行陽性菌落的擴繁和高(gāo)純質粒的獲取，推薦選用TB培養基（Terrific Broth），優于LB或SOC。 7） 為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。
使用方法【所有操作均在無菌條件(jiàn)的标準下(xià)進行】 1） 從(cóng)-80℃冰箱取出取感受态細胞，迅速置于冰浴中，5min後待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接産物(wù)），用手輕彈管底輕輕混勻（避免用槍吸打），冰浴靜(jìng)置25min。 2） 42℃水(shuǐ)浴熱激45s，迅速将離心管轉移到(dào)冰浴中，冰上(shàng)靜(jìng)置2min。此過程不要搖動離心管。 3） 向每個(gè)離心管中加700 μl無菌的LB培養基（不含抗生(shēng)素），混勻後置于37℃ 搖床，200 rpm振蕩培養60min，目的使質粒上(shàng)相(xiàng)關的抗性标記基因表達，使菌體複蘇。 4） 低(dī)速離心收菌（比如5000rpm，1min），留取100μl左右上(shàng)清，用槍輕輕吹打重懸菌塊，之後加到(dào)含所選質粒篩選抗生(shēng)素的LB固體瓊脂培養基上(shàng)，用無菌的塗布棒将細胞均勻塗開(kāi)，将平闆置于室溫（或37℃）直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養過夜（12-15h）。
【注意】： a）塗布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA總量較多(duō)，可不用離心，直接取少量轉化産物(wù)塗布平闆；反之，若轉化的DNA總量較少，則通(tōng)過離心（5000 rpm，1min）後吸除部分培養液，懸浮菌體後将其塗布于一(yī)個(gè)平闆中。原則是以在平闆上(shàng)能(néng)挑到(dào)單克隆菌落為(wèi)宜。 b）新制備的固體培養基不易塗幹，可将平闆正置于37℃直至液體被吸收後再倒置培養。 c）塗布剩餘的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以将剩下(xià)的菌液再塗布新培養基進行培養。
相(xiàng)關産品
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