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SHuffle T7 Chemically Competent Cell大腸杆菌​化學感受态細胞
目錄号 MF2291-1000UL 售價 429.00元
規格 10×100μl 運輸溫度 幹冰運輸
其他名稱 保存溫度 -80℃保存,六個(gè)月(yuè)有效。
CAS号 N/A 有效期
應用 訂購數量
産品簡介:

SHuffle T7 Chemically Competent Cell

大腸杆菌化學感受态細胞



産品标簽

GT115化學感受态細胞;TOP10;DH10B;XL1-Blue;pCpG-free質粒;pCpG-mcs;pCpG-LacZ;

産品訂購: 更大包裝或産品技(jì)術(shù)問題,請來電(diàn)/在線咨詢,電(diàn)話:021-54736159 。網站:www.maokangbio.com

貨号

産品名稱

規格

價格(元)

MF2291-1000UL

SHuffle T7 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

10×100μl

429

MF2291-5000UL

SHuffle T7 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

50×100μl

1799


菌株描述

SHuffle T7菌株是一(yī)款基因工(gōng)程改造的K12衍生(shēng)菌株,特别設計改進含二硫鍵蛋白(bái)在細胞質内的表達,适合于T7啓動子驅動的蛋白(bái)表達。


該菌株染色體中整合一(yī)個(gè)拷貝的二硫鍵異構酶基因—DsbC,促進錯(cuò)誤氧化的蛋白(bái)轉化為(wèi)正确形式。另外,細胞質中的DsbC也是一(yī)個(gè)分子伴侶,能(néng)協助不含二硫鍵蛋白(bái)的正确折疊。SHuffle T7菌株染色體中整合一(yī)個(gè)拷貝的T7 RNAP基因,可以表達噬菌體T7 TNA聚合酶,從(cóng)而适用于T7啓動子誘導的蛋白(bái)表達。LacIq基因的嚴格控制表達允許毒性基因得以克隆。SHuffle T7菌株具抵抗噬菌體T1(fhuA2)感染的特點,具鏈黴素和壯觀黴素抗性。

SHuffle T7菌株基因型:F´ lac, pro, lacIq / Δ(ara-leu)7697 araD139 fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)PvuII phoR ahpC* galE (or U) galK λatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, lacIq) ΔtrxB rpsL150(StrR) Δgor Δ(malF)3


産品描述

本品是大腸杆菌SHuffle T7菌株經特殊工(gōng)藝制作所得的感受态細胞,可用于DNA的熱擊轉化。經pUC19載體檢測轉化效率可達>1×108cfu/μg DNA。且在-80℃能(néng)穩定保存幾個(gè)月(yuè)轉化效率不發生(shēng)改變。


産品包裝

組分編号

組分名稱

貨号(規格)

MF2291-1000UL

MF2291-5000UL

MF2291-A

SHuffle T7Chemically Competent Cell

10×100μl

50×100μl

MF2291-B

Control Vector puC19,10pg/μl

10μl

10μl


保存與運輸條件(jiàn):

保存:-80℃保存,六個(gè)月(yuè)有效。

運輸:幹冰運輸。


注意事(shì)項

1) 感受态細胞必須用幹冰運輸。感受态細胞應在-80℃保存,不可反複凍融且放(fàng)置時間過長(cháng),否則會(huì)減低(dī)感受态細胞的轉化效率。

2) 最好在冰上(shàng)融化感受态細胞。

3) 進行轉化操作時,需在相(xiàng)應溫度及無菌條件(jiàn)下(xià)進行。

4) 為(wèi)防止轉化實驗不成功,可保留部分連接反應液以重新轉化,将損失降到(dào)最低(dī)。

5) 産品包裝内含載體pUC19 DNA(10pg/μl),供對照(zhào)實驗用。

6) SHuffle T7菌株具鏈黴素、壯觀黴素抗性,不可用于具鏈黴素、壯觀黴素抗性質粒的轉化。

7) 為(wèi)獲得需要量的蛋白(bái),最佳誘導時間、溫度、IPTG濃度(0.1~2mM)都需進行優化。

8) 為(wèi)了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。


使用方法【所有操作均在無菌條件(jiàn)的标準下(xià)進行】

1) 從(cóng)-80℃冰箱取出取感受态細胞,迅速置于冰浴中,5min後待菌塊融化,加入目的質粒,用手輕彈管底輕輕混勻(避免用槍吹打),冰浴靜(jìng)置25min。

2) 42℃水(shuǐ)浴熱激45s,迅速将離心管轉移到(dào)冰浴中,冰上(shàng)靜(jìng)置2min。此過程不要搖動離心管。

3) 向每個(gè)離心管中加入700 μl無菌的LB培養基(不含抗生(shēng)素),混勻後置于37℃搖床,200 rpm振蕩培養60min,目的使質粒上(shàng)相(xiàng)關的抗性标記基因表達,使菌體複蘇。

4) 低(dī)速離心收菌(比如5000rpm,1min),留取50-100μl左右上(shàng)清,用槍輕輕吹打重懸菌塊,之後加到(dào)含相(xiàng)應抗生(shēng)素的LB固體瓊脂培養基上(shàng),用無菌的塗布棒将細胞均勻塗開(kāi),将平闆置于室溫(或37℃)直至液體被吸收,之後倒置放(fàng)于37℃過夜培養。


【注意】:

a)塗布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA總量較多(duō),可不用離心,直接取少量轉化産物(wù)塗布平闆;反之,若轉化的DNA總量較少,則通(tōng)過離心(5,000 rpm,1min)後吸除部分培養液,懸浮菌體後将其塗布于一(yī)個(gè)平闆中。

b)新制備的固體培養基不易塗幹,可将平闆正置于37℃直至液體被吸收後再倒置培養。

c)塗布剩餘的菌液可置于4℃保存,如果次日的轉化菌落數過少,可以将剩下(xià)的菌液再塗布新培養基進行培養。


相(xiàng)關産品

貨号

名稱

規格

MF2291-1000UL

SHuffle T7 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

10×100μl

MF2292-1000UL

Stbl4 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

10×100μl

MF2293-1000UL

T1 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

10×100μl

MF2311-2000UL

DH5α Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

20×100μl

MF2312-2000UL

TOP10 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

20×100μl

MF2313-2000UL

JM109 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

20×100μl

MF2314-1000UL

DH10B Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

10×100μl

MF2315-1000UL

XL10-Gold Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

10×100μl

MF2320-1000UL

JM110 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

10×100μl

MF2331-1000UL

BL21 (DE3) Competent Cell大腸杆菌感受态細胞

10×100μl

MF2332-1000UL

BL21 (DE3) pLysS Competent Cell大腸杆菌感受态細胞

10×100μl

MF2333-1000UL

Rosetta (DE3) Competent Cell大腸杆菌感受态細胞

10×100μl

MF2334-1000UL

BL21 Star (DE3) Competent Cell大腸杆菌感受态細胞

10×100μl

MF2335-1000UL

BL21 Star (DE3) pLysS Competent Cell大腸杆菌感受态細胞

10×100μl

MF2318-1000UL

BJ5183 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

10×100μl

MF2319-1000UL

BJ5183-AD-1 Chemically Competent Cell大腸杆菌化學感受态細胞

10×100μl


 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

 

上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作,主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本,以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。

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