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DRAQ7 (0.3mM) 遠(yuǎn)紅(hóng)外DNA染料
目錄号 MX4237-1ML 售價 2122.00元
規格 1ml 運輸溫度 冰袋
其他名稱 DRAQ7 保存溫度 2-8℃避光(guāng)幹燥保存
CAS号 N/A 有效期 2年(nián)
應用 遠(yuǎn)紅(hóng)外DNA染料 訂購數量
産品簡介:

DRAQ7 (0.3mM) 遠(yuǎn)紅(hóng)外DNA染料


産品标簽

DRAQ7;DRAQ5;Anthraquinone dye 蒽醌染料;DNA染料;7-AAD;碘化丙啶(PI);細胞活力分析;TMRM 線粒體膜電(diàn)位探針;


産品信息

産品名稱  

産品編号            

規格            

價格(元)

DRAQ7 (0.3mM) 遠(yuǎn)紅(hóng)外DNA染料    

MX4237-250UL

250µl

742

DRAQ7 (0.3mM) 遠(yuǎn)紅(hóng)外DNA染料

MX4237-1ML

1ml

2122


産品描述

DRAQ7是一(yī)種不具細胞通(tōng)透性的遠(yuǎn)紅(hóng)外DNA染料,僅對死細胞和透化細胞的核染色,能(néng)與其它常見(jiàn)的标記染料(比如:GFP或FITC)聯合使用。DRAQ7是一(yī)種理想工(gōng)具用于研究死細胞或膜受損細胞,因其不用進入完整膜結構的活細胞。DRAQ7是碘化丙啶(PI)和7-AAD的理想替代品,因其不能(néng)被紫外激發,且與PE/PE同源物(wù)沒有發射光(guāng)重疊。


DRAQ7的關鍵特征包括:1)快速染色死細胞或透化細胞的dsDNA/核;2)低(dī)光(guāng)漂白(bái);3)适用于絕大多(duō)數細胞,真核和原核來源:哺乳動物(wù)、細菌、寄生(shēng)蟲、植物(wù)等;4)長(cháng)期培養無毒性;5)能(néng)與活細胞染料結合使用;6)流式細胞檢測中與常見(jiàn)的FITC/GFP+PE結合實驗無需做熒光(guāng)補償;7)不用清洗或RNase處理;


染料特性

1)   外觀:液體(0.3mM)

2)   激發波長(cháng):最理想633和647nm處(Eλmax= 599/644nm); 次理想488,514,568nm處(僅适用于流式分析)

3)   發射波長(cháng)(取決于儀器(qì)):665nm至紅(hóng)外(Emλmax= 678nm/697nm,摻入 dsDNA)

          與可見(jiàn)光(guāng)區比如:GFP和FITC,最小(xiǎo)重疊;發射濾片可能(néng)包括:695L, 715LP 或780 LP

3)與紫外/可見(jiàn)光(guāng)熒光(guāng)素的多(duō)波長(cháng)成像:與DNA結合後沒有熒光(guāng)增強;低(dī)光(guāng)漂白(bái)效應;兼容于流式細胞儀、激光(guāng)掃描細胞儀和共聚焦顯微鏡的光(guāng)學;以及基于燈泡的熒光(guāng)顯微鏡。


保存與運輸方法

保存:2-8°C避光(guāng)保存,2年(nián)有效。不可凍存!

運輸:室溫運輸。


注意事(shì)項

1)DRAQ7是Biostatus Limited的商标名。

2)熒光(guāng)染料都存在淬滅的問題,保存和操作過程中注意避光(guāng)。

3)為(wèi)了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。


染色步驟(懸浮細胞的活力染色)

1)對于每個(gè)樣本,用PBS重懸細胞使其密度約為(wèi)5×105細胞/ml。疊氮鈉影響DRAQ7染色,建議用PBS(不含鈣鎂或疊氮鈉)或細胞培養基(不含疊氮鈉)來染色。

2)加入适量DRAQ7(0.3mM)到(dào)所需濃度。推薦做濃度滴定來确定最佳的工(gōng)作濃度。用于流式細胞儀和顯微成像檢測,通(tōng)常1:100的稀釋倍數(3µM)能(néng)獲得良好的染色結果。

3)室溫避光(guāng)孵育10-15min。不需清洗。

4)流式細胞儀分析。對于流式分析,當使用藍色激光(guāng)器(qì)激發,染料用PerCP-Cy5.5或PerCP-eFluor 710的濾片設置來觀察;當使用紅(hóng)色激光(guāng)器(qì)激發,染料用Cy5的BP或LP濾片設置來觀察。另,當進行熒光(guāng)顯微鏡分析,最好用黃-紅(hóng)光(guāng)激發。用比如:695L, 715LP 或780 LP的遠(yuǎn)紅(hóng)長(cháng)通(tōng)濾片來觀察。


延伸閱讀(dú)(DRAQ7的動力學活力分析)

文獻來源:Wlodkowic D, Akagi J, Dobrucki J, et al. Kinetic viability assays using DRAQ7 probe. Curr Protoc Cytom. 2013;Chapter 9:10.1002/0471142956.cy0941s65. doi:10.1002/0471142956.cy0941s65


實驗1)DRAQ7實時染色(Real-time DRAQ7 staining)

①在合适的容器(qì)比如微量滴定闆或細胞培養瓶内接種或分散細胞到(dào)培養基;

②加10μl DRAQ7儲存液(濃度:300μM)到(dào)每1000μl細胞懸液(染料終濃度為(wèi)3μM);

③輕輕混勻使染料均勻分散在溶液内;

④在含DRAQ7的情況下(xià)使細胞生(shēng)長(cháng)高(gāo)達5天(37℃,5% CO2);

⑤定期收集染色樣本用于流式分析;【細胞體積至少符合流式細胞儀分析要求的最低(dī)樣本體積100-150μl】;

⑥不用清洗直接用流式細胞儀分析,用488nm激發器(qì)或633-647nm激發器(qì),發射波長(cháng)>660 nm。

關于DRAQ7的重要信息:DRAQ7培養高(gāo)達5天對人細胞系無毒性,在高(gāo)達20μM DRAQ7的體系内培養細胞,對細胞增殖、細胞周期、活力無明顯幹擾,且對藥物(wù)比如抗腫瘤化合物(wù)或凋亡誘導劑沒有反應。


結果呈現:

Figure 1 Assessment of live, early apoptotic and late apoptotic/necrotic cells based on stainability with plasma membrane permeability marker DRAQ7. Analysis was based on real-time labeling of THP-1 cells with 3 μM of DRAQ7. Bivariate dot plots DRAQ7 vs. forward scatter (FS) enable discrimination of live (DRAQ7−; green gate), early apoptotic (DRAQ7dim; blue gate) and late apoptotic/necrotic (DRAQ7+; red gate) subpopulations. DRAQ7 probe was excited using 633 nm laser and logarithmically amplified fluorescence signals were collected using 660 nm long-pass filter.


實驗2)DRAQ7和線粒體膜電(diàn)位敏感探針TMRM雙重實時評估細胞死亡(Two color real-time assay with DRAQ7 and TMRM)

①在合适的容器(qì)比如微量滴定闆或細胞培養瓶内接種或分散細胞到(dào)培養基;

②加10μl DRAQ7儲存液(濃度:300μM)到(dào)每1000μl細胞懸液(染料終濃度為(wèi)3μM);

③加15μl TMRM工(gōng)作液(濃度:10μM)到(dào)每1000μl細胞懸液(染料終濃度為(wèi)150nM);

④輕輕混勻使染料均勻分散在溶液内;

⑤在含DRAQ7和TMRM兩種染料的情況下(xià)使細胞生(shēng)長(cháng)高(gāo)達5天(37℃,5% CO2);

⑥定期收集染色樣本用于流式分析;【細胞體積至少符合流式細胞儀分析要求的最低(dī)樣本體積100-150μl】;

⑦不用清洗直接用流式細胞儀分析,用488nm激發器(qì)和633-647nm激發器(qì),發射波長(cháng)分别搜集575nm(TMRM)和>660 nm(DRAQ7)的信号。


重要信息:DRAQ7和TMRM兩種染料都能(néng)被488nm激發器(qì)激發。兩者相(xiàng)鄰通(tōng)道間的光(guāng)譜重疊很小(xiǎo),如兩者都用488nm激發器(qì)來激發,可能(néng)需做一(yī)些小(xiǎo)補償調整。DRAQ7熒光(guāng)能(néng)用标準APC 660nm寬帶濾片觀察,當用633nm激發器(qì)來激發,避免使用任何熒光(guāng)補償。調整對數放(fàng)大尺度來區分活細胞(明亮的TMRM+/DRAQ7−)、凋亡細胞(TMRMlow/DRAQ7−)、具受損質膜的晚期凋亡/壞死細胞(TMRMlow/DRAQ7+)。在一(yī)些細胞體系,可能(néng)有必要優化DRAQ7和TMRM濃度,以及PMT電(diàn)壓在不同的細胞時間中獲得最大的分辨率。

Figure 2 Discrimination of viable, apoptotic and late apoptotic/necrotic cells based on Δψm marker

 tetramethylrhodamine methyl ester (TMRM) and plasma membrane permeability marker DRAQ7. Analysis was based on real-time labeling of THP-1 cells with 3 μM of DRAQ7 and 150 nm of TMRM. Bivariate dot plots DRAQ7 vs. TMRM enable discrimination of live (TMRM+/DRAQ7−; green gate), early apoptotic (TMRMlow/DRAQ7dim; blue gate) and late apoptotic/necrotic (TMRMlow/DRAQ7+; red gate) subpopulations. DRAQ7 probe was excited using 633 nm laser and logarithmically amplified fluorescence signals were collected using 660 nm long-pass filter. TMRM was excited using 488 nm laser and logarithmically amplified fluorescence signals were collected using 575 nm long-pass filter. Debris signals were excluded electronically by setting the proper low threshold.


相(xiàng)關産品

貨号

名稱

規格

MF0756-1G

Ethidium Bromide (EB)溴化乙錠

1g

MF0756-5ML

EB (10 mg/ml in Water) EB水(shuǐ)溶液(10 mg/ml)

5ml

MX4205-10MG

Propidium Iodide碘化丙啶(粉末)

10mg

MX4205-1ML

Propidium Iodide (1mg/ml)碘化丙啶(1mg/ml)

1ml

MX4212-5MG

Ethidium Monoazide Bromide (EMA)疊氮溴化乙錠

5mg

MX4213-1MG

Ethidium Homodimer 1 (EthD-1)溴乙啡錠二聚體1

1mg

MX4214-1MG

Ethidium Homodimer 3 (EthD-3)溴乙啡錠二聚體3

1mg

MX4215-1MG

7-AAD (7-Aminoactinomycin D) 7-氨基放(fàng)線菌素D

1mg

MX4217-1G

Acridine Orange Hydrochloride吖啶橙鹽酸鹽

1g

MX4219-50UL

DRAQ5 (5mM)遠(yuǎn)紅(hóng)外DNA染料

50µl

MX4220-1MG

Propidium Monoazide (PMA)疊氮溴化丙錠

1mg

MX4235-25MG

LDS 751 Nucleic Acid Stain核酸染色劑

25mg

MX4237-250UL

DRAQ7 (0.3mM)遠(yuǎn)紅(hóng)外DNA染料

250µl



 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】



上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作,主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本,以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。

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