| 目錄号 | MF2349-5000UL | 售價 | 1696.00元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 規格 | 50×100μl | 運輸溫度 | 幹冰運輸 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 其他名稱 | 保存溫度 | -80℃保存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| CAS号 | N/A | 有效期 | 6個(gè)月(yuè) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 應用 | 訂購數量 |
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産品簡介: TOP10F` Chemically Competent Cell 大腸杆菌化學感受态細胞 産品标簽： TOP10F`；TOP10；F′附加體（F′ episome）；F-TOP10；IPTG；卡那黴素；鏈黴素；
産品訂購： 更大包裝或産品技(jì)術(shù)問題，請來電(diàn)/在線咨詢，電(diàn)話：021-54736159 。網站：www.maokangbio.com。
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産品組分：
菌株描述 TOP10F`菌株來源于TOP10菌株，除了F′附加體（F′ episome）的引入。F′附加體攜帶四環素抗性基因，使其能(néng)從(cóng)攜帶f1複制子的載體中純化單鏈DNA。F′附加體還(hái)攜帶lacIq抑制子，參與IPTG作為(wèi)誘導劑對trc，tac和lac啓動子的誘導表達。TOP10F`菌株進行藍白(bái)斑篩選，需要IPTG誘導β-半乳糖苷酶基因的表達。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩定和高(gāo)純度質粒DNA的提取。适用于高(gāo)效克隆和質粒擴繁。 TOP10F`菌株基因型：F´{lacIq Tn10 (TetR)} mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
産品描述 本品是大腸杆菌TOP10F`菌株經特殊工(gōng)藝制作所得的感受态細胞，經pUC19載體檢測轉化效率＞108 cfu/μg DNA。且在-80℃能(néng)穩定保存幾個(gè)月(yuè)轉化效率不發生(shēng)改變。
保存與運輸條件(jiàn)： 保存：-80℃保存，六個(gè)月(yuè)有效。 運輸：幹冰運輸。
注意事(shì)項 1） 感受态細胞必須用幹冰運輸。感受态細胞應在-80℃保存，不可反複凍融且放(fàng)置時間過長(cháng)，否則會(huì)減低(dī)感受态細胞的轉化效率。 2） 最好在冰上(shàng)融化感受态細胞。在冰上(shàng)融化後立即加入目标DNA，不可在冰上(shàng)放(fàng)置時間過長(cháng)。長(cháng)時間存放(fàng)會(huì)降低(dī)轉化效率，混入目的DNA時需輕柔操作。 3） 進行轉化操作時，需在相(xiàng)應溫度及無菌條件(jiàn)下(xià)進行。 4） 為(wèi)防止轉化實驗不成功，可保留部分連接反應液以重新轉化，将損失降到(dào)最低(dī)。 5） 産品包裝内含載體pUC19 DNA(10pg/μl)，供對照(zhào)實驗用。 6） 為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。 使用方法【所有操作均在無菌條件(jiàn)的标準下(xià)進行】 1.1 将TOP10F`感受态細胞從(cóng)-80℃取出，迅速插入冰中，5min後待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接産物(wù)），并用手撥打管底輕輕混勻，冰中靜(jìng)置25min。 1.2 42℃水(shuǐ)浴熱激45s，迅速放(fàng)回冰上(shàng)并靜(jìng)置2min。 此過程不要搖動離心管。 1.3 向每個(gè)離心管中加入700 μl無菌的2YT或LB培養基（不含抗生(shēng)素），混勻後置于37℃ 搖床，200 rpm振蕩培養60min，目的使質粒上(shàng)相(xiàng)關的抗性标記基因表達，使菌體複蘇。 1.4 低(dī)速離心收菌（比如4000rpm，2min），留取100μl左右上(shàng)清，用槍輕輕吹打重懸菌塊，之後加到(dào)含相(xiàng)應抗生(shēng)素的2YT或LB固體瓊脂培養基上(shàng)，用無菌的塗布棒将細胞均勻塗開(kāi)，将平闆置于室溫（或37℃）直至液體被吸收，之後倒置放(fàng)于37℃過夜培養。如果進行藍白(bái)斑篩選，37℃至少培養13h。 【注意】： a）塗布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA總量較多(duō)，可不用離心，直接取少量轉化産物(wù)塗布平闆；反之，若轉化的DNA總量較少，則通(tōng)過離心（4,000 rpm，2min）後吸除部分培養液，懸浮菌體後将其塗布于一(yī)個(gè)平闆中。 b）新制備的固體培養基不易塗幹，可将平闆正置于37℃直至液體被吸收後再倒置培養。 c）塗布剩餘的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以将剩下(xià)的菌液再塗布新培養基進行培養。 相(xiàng)關産品
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上海夢澤生物科技有限公司是一(yī)家涉足于生(shēng)命科學和生(shēng)物(wù)技(jì)術(shù)領域研究的試劑、儀器(qì)和實驗室消耗品與實驗服務工(gōng)作，主要從(cóng)事(shì)細胞生(shēng)物(wù)學、植物(wù)學、分子生(shēng)物(wù)學、免疫學、生(shēng)物(wù)化學、蛋白(bái)組學。生(shēng)物(wù)制藥與診斷試劑研發生(shēng)産等領域。 本公司秉承“以人為(wèi)本，以誠為(wèi)信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為(wèi)廣大客戶提供優質産品。 |
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