Golgi-Tracker Red (BODIPY™TR Ceramide), for live-cell imaging 

高(gāo)爾基體紅(hóng)色熒光(guāng)探針（活細胞成像用）

懋康生(shēng)物(wù)提供多(duō)款高(gāo)爾基體（Golgi apparatus）熒光(guāng)探針:

【1】NBD C6-Ceramide【綠色熒光(guāng)，适用于活細胞和固定細胞】

【2】BODIPY™TR Ceramide【紅(hóng)色熒光(guāng)，适用于活細胞】

【3】BODIPY™FL Ceramide【綠色熒光(guāng)，适用于活細胞，可能(néng)某些情況下(xià)也呈現紅(hóng)色熒光(guāng)，取決于在細胞内的定位】

Golgi-Tracker Green；BODIPY™ FL C5-Ceramide；Golgi apparatus高(gāo)爾基體；Golgi-Tracker Red；高(gāo)爾基體染色探針；BODIPY™ FL；ER-Tracker Green 内質網熒光(guāng)探針；

産品信息

産品描述

Golgi-Tracker Red是神經酰胺的熒光(guāng)偶聯物(wù)，即BODIPY™ TR标記的Ceramide（BODIPY™ TR Ceramide），選擇性結合高(gāo)爾基體（Golgi apparatus），Ex/Em=589/617nm（光(guāng)譜特征見(jiàn)Fig 1），用Texas Red光(guāng)學濾片設置來觀察。Golgi-Tracker Red與同類型的NBD C6-ceramide相(xiàng)比較，表現出更好的抗光(guāng)衰減性和更明亮的熒光(guāng)，在很多(duō)應用上(shàng)都能(néng)替代NBD C6-ceramide。Golgi-Tracker Red也能(néng)用于鞘脂運輸和代謝研究，測定Schwann細胞合成脂類的速率，以及标記細胞輪廓以便在共聚焦顯微鏡下(xià)觀察形态運動。

Fig1. Golgi-TrackerRed的激發和發射光(guāng)譜圖。

懋康生(shēng)物(wù)（MKBio）提供的Golgi-TrackerRed是與BSA結合後的複合物(wù)，不僅避免有機(jī)溶劑的引入，而且對活細胞呈現出更高(gāo)效的高(gāo)爾基體标記率。本品另提供稀釋液,使用更便捷。本品适用于活細胞的高(gāo)爾基體熒光(guāng)标記，不适用于固定細胞。若需要做固定細胞的高(gāo)爾基體染色，可選擇NBD C6- ceramide（MX4354-1MG）。

産品包裝

保存與運輸方法

保存：-20ºC避光(guāng)幹燥保存，至少6個(gè)月(yuè)有效。 

運輸：冰袋運輸。

注意事(shì)項

1） 整個(gè)染色過程中需注意避光(guāng)。

2） Golgi-Tracker Red在4℃，冰浴等較低(dī)溫度下(xià)會(huì)凝固而粘附在離心管官底、管壁或管蓋内，可将置于25℃水(shuǐ)浴溫育片刻直至全部融解後使用。對于微量液體，每次使用前低(dī)速離心使得液體全部沉降至管底，再開(kāi)蓋使用。

3） 為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

使用方法

1. Golgi-TrackerRed工(gōng)作液的配制

① 第一(yī)次使用本品，可将Golgi-Tracker Red (0.5mM)根據單次用量分裝，比如10µl/管。本品一(yī)管含30µl（總量：1mg），由于本身量微少，務必低(dī)速離心後再開(kāi)蓋，然後用低(dī)吸附槍頭吸取母液，并分裝-20℃凍存，避免反複凍融。

②吸取少量Golgi-Tracker Red (0.5mM)按照(zhào)1：100的比例用Golgi-Tracker稀釋液來稀釋，比如：取10µl Golgi-Tracker Red (0.5mM)加入到(dào)1ml Golgi-Tracker稀釋液中，混勻後即為(wèi)Golgi-TrackerRed工(gōng)作液，工(gōng)作液請現配現用。

【注意】：Golgi-Tracker Red的工(gōng)作濃度可以根據實際情況進行适當調整，推薦的稀釋比例調整範圍為(wèi)1:50~1:200。

2. 活細胞高(gāo)爾基體的熒光(guāng)标記

① 去除細胞培養液，用适量的溶液如Hanks平衡鹽溶液（含鈣鎂）（貨号：MS3505-500ML）或其他緩沖液來洗滌生(shēng)長(cháng)在蓋玻片上(shàng)的細胞。

② 去除洗滌液，加入新鮮配制的Golgi-Tracker Red染色工(gōng)作液，4℃孵育30min。

③ 吸走染色液，用冰浴預冷的細胞培養液洗滌細胞3次左右，換新鮮培養液37℃再孵育30min。

④ 用新鮮培養液再洗滌一(yī)次，随後用熒光(guāng)顯微鏡或共聚焦顯微鏡進行觀察。此時可觀察到(dào)高(gāo)爾基體呈明亮的強熒光(guāng)染色，而細胞内的其他膜系統呈比較微弱的熒光(guāng)染色。

染色示例【來自(zì)文獻資源】

Ref 1）Egelund J. et al. Arabidopsis thaliana RGXT1 and RGXT2 Encode Golgi-Localized (1,3)-α-d-Xylosyltransferases Involved in the Synthesis of Pectic Rhamnogalacturonan-II. Plant Cell. 2006; 18: 2593-2607

實驗對象：拟南(nán)芥表皮細胞（Arabidopsis Epidermal Cells）

染色目的：高(gāo)爾基體染色（BODIPY TR ceramide stain for Golgi apparatus）

染色結果：

Fig 1. Subcellular Location of RGXT1-EGFP Fusion Protein in Arabidopsis Epidermal Cells after Biolistic Particle Delivery Analyzed by CLSM. (F) Fluorescence from the RGXT1-EGFP fusion protein. (G) Fluorescence from the BODIPY TR ceramide. (H) Merged images of (F) and (G) showing that the RGXT1-EGFP fusion protein colocalizes with the BODIPY TR ceramide.

Ref 2）Hong, X., Schouest, B. & Xu, H. Effects of exosome on the activation of CD4+ T cells in rhesus macaques: a potential application for HIV latency reactivation. Sci Rep 7, 15611 (2017).

實驗對象：外泌體（Exosomes）

染色目的：外泌體染色（Exosome staining）

染色步驟：總的來說，1 μl TR Ceramide儲存液 (dissolved in DMSO, 1 mM) or 20 μl anti-CD63加入 3 × 108外泌體（200 μl），37℃孵育20min。通(tōng)過外泌體純化柱（Exosome Spin Columns）來去除未标記的染料或抗體，轉到(dào)載玻片（108in 200 μl），幹燥過夜，共聚焦成像分析。

Fig 2. Isolation and identification of plasma exosomes in rhesus macaques. PBMC (A) and exosomes (B) stained by BODIPY TR, or exosomes stained by CD63 (C). Exosomes were isolated from plasma, stained by BODIPY TR, and spun onto the slide. Note CD63 aggregation on the membrane of small exosome vesicles in heterogeneous size.

Ref 3）

實驗對象：配子母細胞

實驗目的：膜标記

實驗方法：用BODIPY-TR-ceramide染色評估配子母細胞的膜重組。寄生(shēng)蟲用含0.7umol/L BODIPY-TR-ceramide的完全培養基孵育過夜。

Fig 3. P. falciparum gametocytes exhibit increased sensitivity to mitochondrial tricarboxylic acid (TCA)-cycle inhibitors. Day 7 gametocytes were labeled with (C) rhodamine-123 (Rho123) or (D) BODIPY-TR-ceramide. In untreated gametocytes, these dyes accumulated (white arrows) in (C) the reticulate mitochondrion and (D) intracellular membranes, but redistributed to the parasite plasma membrane in treated parasites (yellow arrows).

相(xiàng)關産品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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